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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-10017 | ||||||||||||||||||
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タイトル | Inward-open structure of the ASCT2 (SLC1A5) in absence of substrate | ||||||||||||||||||
マップデータ | None | ||||||||||||||||||
試料 |
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機能・相同性 | 機能・相同性情報 glutamine secretion / L-glutamine import across plasma membrane / glutamine transport / L-glutamine transmembrane transporter activity / L-serine transmembrane transporter activity / ligand-gated channel activity / neutral amino acid transport / amino acid transmembrane transporter activity / L-aspartate transmembrane transporter activity / Amino acid transport across the plasma membrane ...glutamine secretion / L-glutamine import across plasma membrane / glutamine transport / L-glutamine transmembrane transporter activity / L-serine transmembrane transporter activity / ligand-gated channel activity / neutral amino acid transport / amino acid transmembrane transporter activity / L-aspartate transmembrane transporter activity / Amino acid transport across the plasma membrane / L-aspartate import across plasma membrane / neutral L-amino acid transmembrane transporter activity / symporter activity / antiporter activity / amino acid transport / RHOJ GTPase cycle / RHOQ GTPase cycle / protein homotrimerization / RHOH GTPase cycle / transport across blood-brain barrier / RAC3 GTPase cycle / RAC1 GTPase cycle / erythrocyte differentiation / basal plasma membrane / melanosome / virus receptor activity / signaling receptor activity / extracellular exosome / membrane / metal ion binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 6.98 Å | ||||||||||||||||||
データ登録者 | Garaeva AA / Guskov A / Slotboom DJ / Paulino C | ||||||||||||||||||
資金援助 | オランダ, 5件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2019 タイトル: A one-gate elevator mechanism for the human neutral amino acid transporter ASCT2. 著者: Alisa A Garaeva / Albert Guskov / Dirk J Slotboom / Cristina Paulino / 要旨: The human Alanine Serine Cysteine Transporter 2 (ASCT2) is a neutral amino acid exchanger that belongs to the solute carrier family 1 (SLC1A). SLC1A structures have revealed an elevator-type ...The human Alanine Serine Cysteine Transporter 2 (ASCT2) is a neutral amino acid exchanger that belongs to the solute carrier family 1 (SLC1A). SLC1A structures have revealed an elevator-type mechanism, in which the substrate is translocated across the cell membrane by a large displacement of the transport domain, whereas a small movement of hairpin 2 (HP2) gates the extracellular access to the substrate-binding site. However, it has remained unclear how substrate binding and release is gated on the cytoplasmic side. Here, we present an inward-open structure of the human ASCT2, revealing a hitherto elusive SLC1A conformation. Strikingly, the same structural element (HP2) serves as a gate in the inward-facing as in the outward-facing state. The structures reveal that SLC1A transporters work as one-gate elevators. Unassigned densities near the gate and surrounding the scaffold domain, may represent potential allosteric binding sites, which could guide the design of lipidic-inhibitors for anticancer therapy. | ||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_10017.map.gz | 28.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-10017-v30.xml emd-10017.xml | 19.5 KB 19.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_10017_fsc.xml | 7.3 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_10017.png | 89.4 KB | ||
マスクデータ | emd_10017_msk_1.map | 30.5 MB | マスクマップ | |
その他 | emd_10017_half_map_1.map.gz emd_10017_half_map_2.map.gz | 23.3 MB 23.2 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10017 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-10017 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_10017_validation.pdf.gz | 383.3 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_10017_full_validation.pdf.gz | 382.4 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_10017_validation.xml.gz | 12.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10017 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-10017 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_10017.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 30.5 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | None | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.012 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-マスク #1
ファイル | emd_10017_msk_1.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map 2 used during refinement and for...
ファイル | emd_10017_half_map_1.map | ||||||||||||
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注釈 | half map 2 used during refinement and for FSC gold-standard resolution calculation of apo ASCT2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: half map 1 used during refinement and for...
ファイル | emd_10017_half_map_2.map | ||||||||||||
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注釈 | half map 1 used during refinement and for FSC gold-standard resolution calculation of apo ASCT2 | ||||||||||||
投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : ASCT2 (Alanine Serine Cysteine Transporter 2, SLC1A)
全体 | 名称: ASCT2 (Alanine Serine Cysteine Transporter 2, SLC1A) |
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要素 |
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-超分子 #1: ASCT2 (Alanine Serine Cysteine Transporter 2, SLC1A)
超分子 | 名称: ASCT2 (Alanine Serine Cysteine Transporter 2, SLC1A) タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all / 詳細: in absence of substrate |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Komagataella pastoris (菌類) |
分子量 | 理論値: 172 KDa |
-分子 #1: ASCT2
分子 | 名称: ASCT2 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / 光学異性体: LEVO |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
配列 | 文字列: MVADPPRDSK GLAAAEPTAN GGLALASIED QGAAAGGYCG SRDQVRRCLR ANLLVLLTVV AVVAGVALG LGVSGAGGAL ALGPERLSAF VFPGELLLRL LRMIILPLVV CSLIGGAASL D PGALGRLG AWALLFFLVT TLLASALGVG LALALQPGAA SAAINASVGA ...文字列: MVADPPRDSK GLAAAEPTAN GGLALASIED QGAAAGGYCG SRDQVRRCLR ANLLVLLTVV AVVAGVALG LGVSGAGGAL ALGPERLSAF VFPGELLLRL LRMIILPLVV CSLIGGAASL D PGALGRLG AWALLFFLVT TLLASALGVG LALALQPGAA SAAINASVGA AGSAENAPSK EV LDSFLDL ARNIFPSNLV SAAFRSYSTT YEERNITGTR VKVPVGQEVE GMNILGLVVF AIV FGVALR KLGPEGELLI RFFNSFNEAT MVLVSWIMWY APVGIMFLVA GKIVEMEDVG LLFA RLGKY ILCCLLGHAI HGLLVLPLIY FLFTRKNPYR FLWGIVTPLA TAFGTSSSSA TLPLM MKCV EENNGVAKHI SRFILPIGAT VNMDGAALFQ CVAAVFIAQL SQQSLDFVKI ITILVT ATA SSVGAAGIPA GGVLTLAIIL EAVNLPVDHI SLILAVDWLV DRSCTVLNVE GDALGAG LL QNYVDRTESR STEPELIQVK SELPLDPLPV PTEEGNPLLK HYRGPAGDAT VASEKESV M HHHHHH |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 8 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 7.4 詳細: 20 mM Tris pH 7.4, 300 mM NaCl, 0.05% DDM, 0.005% CHS |
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: GOLD / メッシュ: 300 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY |
凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 288 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TALOS ARCTICA |
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温度 | 最低: 90.0 K / 最高: 105.0 K |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: COUNTING / デジタル化 - サイズ - 横: 3838 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 3710 pixel / デジタル化 - 画像ごとのフレーム数: 1-60 / 撮影したグリッド数: 6 / 実像数: 4305 / 平均露光時間: 9.0 sec. / 平均電子線量: 52.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 100.0 µm / 最大 デフォーカス(補正後): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(補正後): 0.3 µm / 倍率(補正後): 49407 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 0.3 µm / 倍率(公称値): 49407 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
実験機器 | モデル: Talos Arctica / 画像提供: FEI Company |
+画像解析
-原子モデル構築 1
初期モデル | PDB ID: |
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精密化 | 空間: REAL |