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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-0934 | ||||||||||||
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タイトル | Sub-tomogram averaging of immature Zika virus in complex with Fab DV62.5 | ||||||||||||
マップデータ | |||||||||||||
試料 |
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生物種 | Zika virus ZIKV/H. sapiens/FrenchPolynesia/10087PF/2013 (ジカ熱ウイルス) / Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||
手法 | サブトモグラム平均法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 13.0 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Tan TY / Fibriansah G / Kostyuchenko VA / Ng TS / Lim XX / Lim XN / Shi J / Morais MC / Corti D / Lok SM | ||||||||||||
資金援助 | シンガポール, 3件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2020 タイトル: Capsid protein structure in Zika virus reveals the flavivirus assembly process. 著者: Ter Yong Tan / Guntur Fibriansah / Victor A Kostyuchenko / Thiam-Seng Ng / Xin-Xiang Lim / Shuijun Zhang / Xin-Ni Lim / Jiaqi Wang / Jian Shi / Marc C Morais / Davide Corti / Shee-Mei Lok / 要旨: Structures of flavivirus (dengue virus and Zika virus) particles are known to near-atomic resolution and show detailed structure and arrangement of their surface proteins (E and prM in immature virus ...Structures of flavivirus (dengue virus and Zika virus) particles are known to near-atomic resolution and show detailed structure and arrangement of their surface proteins (E and prM in immature virus or M in mature virus). By contrast, the arrangement of the capsid proteins:RNA complex, which forms the core of the particle, is poorly understood, likely due to inherent dynamics. Here, we stabilize immature Zika virus via an antibody that binds across the E and prM proteins, resulting in a subnanometer resolution structure of capsid proteins within the virus particle. Fitting of the capsid protein into densities shows the presence of a helix previously thought to be removed via proteolysis. This structure illuminates capsid protein quaternary organization, including its orientation relative to the lipid membrane and the genomic RNA, and its interactions with the transmembrane regions of the surface proteins. Results show the capsid protein plays a central role in the flavivirus assembly process. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_0934.map.gz | 9.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-0934-v30.xml emd-0934.xml | 13.2 KB 13.2 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
画像 | emd_0934.png | 194.8 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0934 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-0934 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_0934_validation.pdf.gz | 79.2 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_0934_full_validation.pdf.gz | 78.3 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_0934_validation.xml.gz | 493 B | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-0934 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-0934 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_0934.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 125 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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投影像・断面図 | 画像のコントロール
画像は Spider により作成 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 3.42 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : Zika virus ZIKV/H. sapiens/FrenchPolynesia/10087PF/2013
全体 | 名称: Zika virus ZIKV/H. sapiens/FrenchPolynesia/10087PF/2013 (ジカ熱ウイルス) |
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要素 |
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-超分子 #1: Zika virus ZIKV/H. sapiens/FrenchPolynesia/10087PF/2013
超分子 | 名称: Zika virus ZIKV/H. sapiens/FrenchPolynesia/10087PF/2013 タイプ: virus / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#5 詳細: The virus was isolated from Zika patient. The immature Zika virus was grown in Aedes Albopictus clone C6/36 cell. The anti-prM antibody DV62.5 was generated from EBV-immortalized PBMC that ...詳細: The virus was isolated from Zika patient. The immature Zika virus was grown in Aedes Albopictus clone C6/36 cell. The anti-prM antibody DV62.5 was generated from EBV-immortalized PBMC that was obtained from dengue patient. ウイルスタイプ: VIRION / ウイルス・単離状態: STRAIN / ウイルス・エンベロープ: Yes / ウイルス・中空状態: No |
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-超分子 #2: Zika virus
超分子 | 名称: Zika virus / タイプ: complex / ID: 2 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #1-#2, #5 |
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由来(天然) | 生物種: Zika virus ZIKV/H. sapiens/FrenchPolynesia/10087PF/2013 (ジカ熱ウイルス) 株: H/PF/2013 |
-超分子 #3: anti-prM antibody DV62.5
超分子 | 名称: anti-prM antibody DV62.5 / タイプ: complex / ID: 3 / 親要素: 1 / 含まれる分子: #3-#4 |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) |
組換発現 | 生物種: Human herpesvirus 4 (strain B95-8) (ヘルペスウイルス) |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | サブトモグラム平均法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
緩衝液 | pH: 8 / 詳細: 10 mM Tris-HCl, 120 mM NaCl, 1 mM EDTA, pH 8 |
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凍結 | 凍結剤: ETHANE |
詳細 | Immature Zika virus-Fab DV62.5 complex sample was prepared by mixing purified immature Zika virus with Fab DV62.5 at an E protein-Fab DV62.5 ratio of 1:1.1 and then the mixture was incubated at 37deg C for 30 min. The sample then was mixed with solution of 10 nm gold particles. |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 平均電子線量: 3.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 照射モード: SPOT SCAN / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 3.0 µm / 倍率(公称値): 47000 |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
-画像解析
最終 再構成 | 想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 13.0 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: emClarity / 使用したサブトモグラム数: 1152 |
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抽出 | トモグラム数: 63 / 使用した粒子像数: 1934 / ソフトウェア - 名称: emClarity |
CTF補正 | ソフトウェア - 名称: emClarity |
最終 角度割当 | タイプ: OTHER / ソフトウェア - 名称: emClarity (ver. 2.1) 詳細: a missing-wedge constrained cross correlation grid search |
-原子モデル構築 1
精密化 | プロトコル: FLEXIBLE FIT |
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