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タイトルTertiary and quaternary structure remodeling by occupancy of the substrate binding pocket in a large glutamate dehydrogenase.
ジャーナル・号・ページProtein Sci, Vol. 35, Issue 4, Page e70544, Year 2026
掲載日2026年3月25日
著者Melisa Lázaro / Nicolás Chamorro / Jorge P López-Alonso / Diego Charro / Rodolfo M Rasia / Gonzalo Jiménez-Osés / Mikel Valle / María-Natalia Lisa /
PubMed 要旨Glutamate dehydrogenases (GDHs) catalyze the oxidative deamination of L-glutamate to 2-oxoglutarate using NAD(P) as a cofactor. The large type of GDHs (L-GDHs) displays a dynamic homotetrameric ...Glutamate dehydrogenases (GDHs) catalyze the oxidative deamination of L-glutamate to 2-oxoglutarate using NAD(P) as a cofactor. The large type of GDHs (L-GDHs) displays a dynamic homotetrameric architecture that alternates between open and closed states. However, the catalytic mechanism and the functional relevance of the large conformational changes in L-GDHs remain poorly understood. Here, we use cryo-EM to investigate the structure and the conformational landscape of the mycobacterial L-GDH composed of 180 kDa subunits (mL-GDH) when incubated with L-glutamate and NAD. Classification of the heterogeneous population of tetramers reveals opening-closing motions and sorting of individual subunits resolves the occupancy of the cofactor and substrate binding pockets. Cryo-EM maps show that ligand binding to the glutamate binding pocket is accompanied by structural changes in a region approximately two nanometers away from the active site, leading to the formation of a previously undetected interaction between the catalytic domains of neighboring subunits in mL-GDH closed tetrameric states. Our findings indicate that the occupancy of the substrate binding site of mL-GDH is linked to a remodeling of both the tertiary and quaternary structure of the enzyme.
リンクProtein Sci / PubMed:41877587
手法EM (単粒子)
解像度2.63 - 4.1 Å
構造データ

EMDB-52419: CryoEM map of the large glutamate dehydrogenase composed of 180 kDa subunits from Mycobacterium smegmatis obtained in the presence of NAD+ and L-glutamate. Open Tetramer
PDB-9hux: CryoEM map of the large glutamate dehydrogenase composed of 180 kDa subunits from Mycobacterium smegmatis obtained in the presence of NAD+ and L-glutamate. Open Tetramer.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.88 Å

EMDB-52420, PDB-9huy:
CryoEM map of the large glutamate dehydrogenase composed of 180 kDa subunits from Mycobacterium smegmatis obtained in the presence of NAD+ and L-glutamate. Closed1 tetramer.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.54 Å

EMDB-52421, PDB-9huz:
CryoEM map of the large glutamate dehydrogenase composed of 180 kDa subunits from Mycobacterium smegmatis obtained in the presence of NAD+ and L-glutamate. Closed2 tetramer
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.57 Å

EMDB-52422, PDB-9hv0:
CryoEM map of the large glutamate dehydrogenase composed of 180 kDa subunits from Mycobacterium smegmatis obtained in the presence of NAD+ and L-glutamate. Empty monomer.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.07 Å

EMDB-52423, PDB-9hv4:
CryoEM map of the large glutamate dehydrogenase composed of 180 kDa subunits from Mycobacterium smegmatis obtained in the presence of NAD+ and L-glutamate. cofactor-monomer.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.95 Å

EMDB-52424, PDB-9hv5:
CryoEM map of the large glutamate dehydrogenase composed of 180 kDa subunits from Mycobacterium smegmatis obtained in the presence of NAD+ and L-glutamate. Cofactor/ligand-monomer
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.12 Å

EMDB-52425: CryoEM map of the large glutamate dehydrogenase composed of 180 kDa subunits from Mycobacterium smegmatis obtained in the presence of NAD+ and L-glutamate. cofactor/ligand-monomer in Open tetramer.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.23 Å

EMDB-52426: CryoEM map of the large glutamate dehydrogenase composed of 180 kDa subunits from Mycobacterium smegmatis obtained in the presence of NAD+ and L-glutamate. cofactor/ligand-monomer in Closed1 tetramer.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.11 Å

EMDB-52427: CryoEM map of the large glutamate dehydrogenase composed of 180 kDa subunits from Mycobacterium smegmatis obtained in the presence of NAD+ and L-glutamate. cofactor/ligand-monomer in Closed2 tetramer.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.18 Å

EMDB-52428, PDB-9hv6:
CryoEM map of the large glutamate dehydrogenase composed of 180 kDa subunits from Mycobacterium smegmatis obtained in the presence of NAD+ and L-glutamate. Total-monomer
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.63 Å

EMDB-52429: CryoEM map of the large glutamate dehydrogenase composed of 180 kDa subunits from Mycobacterium smegmatis obtained in the presence of NAD+ and L-glutamate. Closed2 tetramer with cofactor/ligand-monomer.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.1 Å

化合物

ChemComp-NAD:
NICOTINAMIDE-ADENINE-DINUCLEOTIDE / NAD*YM

ChemComp-GLU:
GLUTAMIC ACID / グルタミン酸

由来
  • mycolicibacterium smegmatis (バクテリア)
キーワードOXIDOREDUCTASE / Large glutamate dehydrogenase / Tetramer

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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