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タイトルTime-resolved cryo-EM visualizes ribosomal translocation with EF-G and GTP.
ジャーナル・号・ページNat Commun, Vol. 12, Issue 1, Page 7236, Year 2021
掲載日2021年12月13日
著者Christine E Carbone / Anna B Loveland / Howard B Gamper / Ya-Ming Hou / Gabriel Demo / Andrei A Korostelev /
PubMed 要旨During translation, a conserved GTPase elongation factor-EF-G in bacteria or eEF2 in eukaryotes-translocates tRNA and mRNA through the ribosome. EF-G has been proposed to act as a flexible motor that ...During translation, a conserved GTPase elongation factor-EF-G in bacteria or eEF2 in eukaryotes-translocates tRNA and mRNA through the ribosome. EF-G has been proposed to act as a flexible motor that propels tRNA and mRNA movement, as a rigid pawl that biases unidirectional translocation resulting from ribosome rearrangements, or by various combinations of motor- and pawl-like mechanisms. Using time-resolved cryo-EM, we visualized GTP-catalyzed translocation without inhibitors, capturing elusive structures of ribosome•EF-G intermediates at near-atomic resolution. Prior to translocation, EF-G binds near peptidyl-tRNA, while the rotated 30S subunit stabilizes the EF-G GTPase center. Reverse 30S rotation releases Pi and translocates peptidyl-tRNA and EF-G by ~20 Å. An additional 4-Å translocation initiates EF-G dissociation from a transient ribosome state with highly swiveled 30S head. The structures visualize how nearly rigid EF-G rectifies inherent and spontaneous ribosomal dynamics into tRNA-mRNA translocation, whereas GTP hydrolysis and Pi release drive EF-G dissociation.
リンクNat Commun / PubMed:34903725 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度2.9 - 3.9 Å
構造データ

EMDB-25405, PDB-7ss9:
Late translocation intermediate with EF-G partially dissociated (Structure V)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.9 Å

EMDB-25407, PDB-7ssd:
Mid translocation intermediate with EF-G bound with GDP (Structure IV)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.3 Å

EMDB-25409, PDB-7ssl:
Pre translocation intermediate with EF-G bound to GDP and Pi (Structure III)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.8 Å

EMDB-25410, PDB-7ssn:
Pre translocation 70S ribosome with A/P* and P/E tRNA (Structure II-B)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.2 Å

EMDB-25411, PDB-7sso:
Pre translocation 70S ribosome with A/A and P/E tRNA (Structure II-A)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.2 Å

EMDB-25415, PDB-7ssw:
Late translocation intermediate with EF-G dissociated (Structure VI)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.8 Å

EMDB-25418, PDB-7st2:
Post translocation, non-rotated 70S ribosome with EF-G dissociated (Structure VII)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.9 Å

EMDB-25420, PDB-7st6:
Pre translocation, non-rotated 70S ribosome (Structure I)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.0 Å

EMDB-25421, PDB-7st7:
Pre translocation intermediate stalled with viomycin and bound with EF-G in a GDP and Pi state (Structure III-vio)
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.2 Å

化合物

ChemComp-GDP:
GUANOSINE-5'-DIPHOSPHATE / GDP / GDP, エネルギー貯蔵分子*YM / グアノシン二リン酸

ChemComp-PO4:
PHOSPHATE ION / ホスファ-ト / リン酸塩

ChemComp-FME:
N-FORMYLMETHIONINE / N-ホルミルメチオニン / N-ホルミルメチオニン

ChemComp-PRO:
PROLINE / プロリン / プロリン

由来
  • escherichia coli k-12 (大腸菌)
  • escherichia coli 113303 (大腸菌)
  • streptomyces californicus (バクテリア)
キーワードRIBOSOME (リボソーム) / EF-G (EF-G) / GTP / Translocation / GDP / Hybrid / Classical / RIBOSOME/ANTIBIOTIC / Ribosome-Antibiotic complex / Viomycin

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

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  • Pubmedのデータを利用しています

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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