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タイトルStructure Studies of the CRISPR-Csm Complex Reveal Mechanism of Co-transcriptional Interference.
ジャーナル・号・ページCell, Vol. 176, Issue 1-2, Page 239-253.e16, Year 2019
掲載日2019年1月10日
著者Lilan You / Jun Ma / Jiuyu Wang / Daria Artamonova / Min Wang / Liang Liu / Hua Xiang / Konstantin Severinov / Xinzheng Zhang / Yanli Wang /
PubMed 要旨Csm, a type III-A CRISPR-Cas interference complex, is a CRISPR RNA (crRNA)-guided RNase that also possesses target RNA-dependent DNase and cyclic oligoadenylate (cOA) synthetase activities. However, ...Csm, a type III-A CRISPR-Cas interference complex, is a CRISPR RNA (crRNA)-guided RNase that also possesses target RNA-dependent DNase and cyclic oligoadenylate (cOA) synthetase activities. However, the structural features allowing target RNA-binding-dependent activation of DNA cleavage and cOA generation remain unknown. Here, we report the structure of Csm in complex with crRNA together with structures of cognate or non-cognate target RNA bound Csm complexes. We show that depending on complementarity with the 5' tag of crRNA, the 3' anti-tag region of target RNA binds at two distinct sites of the Csm complex. Importantly, the interaction between the non-complementary anti-tag region of cognate target RNA and Csm1 induces a conformational change at the Csm1 subunit that allosterically activates DNA cleavage and cOA generation. Together, our structural studies provide crucial insights into the mechanistic processes required for crRNA-meditated sequence-specific RNA cleavage, RNA target-dependent non-specific DNA cleavage, and cOA generation.
リンクCell / PubMed:30503210 / PubMed Central
手法EM (単粒子) / X線回折
解像度2.9 - 3.8 Å
構造データ

EMDB-9653, PDB-6ifk:
Cryo-EM structure of type III-A Csm-CTR1 complex, AMPPNP bound
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.2 Å

EMDB-9654, PDB-6ifl:
Cryo-EM structure of type III-A Csm-NTR complex
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.16 Å

EMDB-9655:
Cryo-EM structure of type III-A Csm complex
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.8 Å

EMDB-9656, PDB-6ifr:
Type III-A Csm complex, Cryo-EM structure of Csm-NTR, ATP bound
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.4 Å

EMDB-9657, PDB-6ifu:
Cryo-EM structure of type III-A Csm-CTR2-dsDNA complex
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.05 Å

EMDB-9658, PDB-6ify:
Type III-A Csm complex, Cryo-EM structure of Csm-CTR1
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.8 Å

EMDB-9659, PDB-6ifz:
Type III-A Csm complex, Cryo-EM structure of Csm-CTR2-ssDNA complex
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.58 Å

EMDB-9660, PDB-6ig0:
Type III-A Csm complex, Cryo-EM structure of Csm-CTR1, ATP bound
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.37 Å

PDB-6ifn:
Crystal structure of Type III-A CRISPR Csm complex
手法: X-RAY DIFFRACTION / 解像度: 2.9 Å

化合物

ChemComp-ANP:
PHOSPHOAMINOPHOSPHONIC ACID-ADENYLATE ESTER / AMP-PNP / AMP-PNP, エネルギー貯蔵分子類似体*YM

ChemComp-MG:
Unknown entry / マグネシウムジカチオン

ChemComp-ZN:
Unknown entry

ChemComp-MN:
Unknown entry

ChemComp-ATP:
ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / ATP / ATP, エネルギー貯蔵分子*YM

由来
  • streptococcus thermophilus nd03 (ストレプトコッカス・サリバリウス 亜種 サーモフィラス)
  • streptococcus thermophilus (ストレプトコッカス・サリバリウス 亜種 サーモフィラス)
キーワードRNA BINDING PROTEIN / Csm complex / Type III-A / CRISPR-Cas system

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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