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タイトルThe twist-and-squeeze activation of CARF-fused adenosine deaminase by cyclic oligoadenylates.
ジャーナル・号・ページEMBO J, Vol. 44, Issue 23, Page 6919-6943, Year 2025
掲載日2025年10月17日
著者Charlisa Whyms / Yu Zhao / Doreen Addo-Yobo / Huan He / Arthur Carl Whittington / Despoina Trasanidou / Carl Raymund P Salazar / Raymond H J Staals / Hong Li /
PubMed 要旨The recently identified CARF (CRISPR-associated Rossman-fold) family of proteins play a critical role in prokaryotic defense, mediating cOA (cyclic oligoadenylate)-stimulated ancillary immune ...The recently identified CARF (CRISPR-associated Rossman-fold) family of proteins play a critical role in prokaryotic defense, mediating cOA (cyclic oligoadenylate)-stimulated ancillary immune responses in the type III CRISPR-Cas systems. Whereas most previously characterized CARF proteins contain nucleic acids or protein degradation effectors, a subset of the family, including the CARF-fused adenosine deaminase (ADA) (Cad1), has recently been shown to convert ATP to ITP. The enzymatic mechanism and the activation process of Cad1, however, remain incompletely understood. Here we present biochemical and structural analyses of a ring nuclease Cad1, revealing its substrate binding specificity and a sequential activation process by cOAs. Despite an overall structural similarity to canonical ADA enzymes, the ADA domain of Cad1 possesses unique structural features that confer a specificity for ATP. Supported by mutational analysis, our structural work demonstrates an allosteric link between the cOA-binding CARF and the ADA domain through a protein network within the hexameric enzyme assembly. Binding of a cA4 molecule to paired CARF domains induces a twisting of the linked ADA domains around one another, which remodels their active sites and alters interactions with neighboring ADA domains, thereby driving a sequential conformational activation mechanism.
リンクEMBO J / PubMed:41107544 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度2.31 - 3.17 Å
構造データ

EMDB-47886: CRISPR-associated deaminase Cad1 in cA4 bound form, symmetry expanded dimer, consensus map
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.36 Å

EMDB-47887: CRISPR-associated deaminase Cad1 in cA4 bound form, symmetry expanded dimer, CARF domain focus refined map
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.53 Å

EMDB-47888: CRISPR-associated deaminase Cad1 in cA4 bound form, symmetry expanded dimer, deaminase domain focus refined map
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.31 Å

EMDB-47890, PDB-9ebt:
CRISPR-associated deaminase Cad1 in cA4 bound form, symmetry expanded dimer, refined against a composite map
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.36 Å

EMDB-48116, PDB-9eka:
CRISPR-associated deaminase Cad1 in Apo form
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.1 Å

EMDB-48405, PDB-9mmw:
CRISPR-associated deaminase Cad1 in cA4 bound in hexamer form refined against the consensus map
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.36 Å

EMDB-70417: CryoEM structure of Cad1 in App form, symmetry expanded dimer, refined against a composite map
PDB-9of1: CryoEM structure of Cad1 in Apo form, symmetry expanded dimer, refined against a composite map
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.7 Å

EMDB-70419: Consensus map of Cad1 in App form
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.7 Å

EMDB-70422, PDB-9ofb:
CryoEM structure of Cad1 bound with cA4 and ATP, symmetry expanded dimer refined against a composite map
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.68 Å

EMDB-70423: Focused map on CARF domain of Cad1 in Apo form
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.87 Å

EMDB-70424: Focused map for the ADA domain of Cad1 in Apo form
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.55 Å

EMDB-70425: Consensus map of Cad1 bound with cA4 and ATP
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.68 Å

EMDB-70426: Focused map of the CARF domain of Cad1 bound with cA4 and ATP
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.54 Å

EMDB-70427: Focused map of the ADA domain of Cad1 bound with cA4 and ATP
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.45 Å

EMDB-70428, PDB-9ofc:
CryoEM structure of Cad1 bound with cA4 and ATP, hexamer with three intact dimers
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.17 Å

EMDB-70429, PDB-9ofd:
CryoEM structure of Cad1 bound with cA4 and ATP, hexamer with one intact dimer
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.86 Å

EMDB-70430, PDB-9ofe:
CryoEM structure of Cad1 bound with cA4 and ATP, hexamer with two intact dimers
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.68 Å

化合物

ChemComp-ZN:
Unknown entry

ChemComp-ATP:
ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / ATP / ATP, エネルギー貯蔵分子*YM

ChemComp-MG:
Unknown entry / マグネシウムジカチオン

ChemComp-HOH:
WATER

由来
  • thermoanaerobaculum aquaticum (バクテリア)
キーワードSIGNALING PROTEIN / CRISPR-associated CARF ring nuclease / Cad1 / CRISPR-associated adenosine deaminase / S-adenosylmethionine / HYDROLASE / ANTIVIRAL PROTEIN/RNA / ANTIVIRAL PROTEIN / ANTIVIRAL PROTEIN-RNA complex / IMMUNE SYSTEM / CRISPR-associated Rossman-fold (CARF) / ATP deaminase / CRISPR immunity / cooperative activation

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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