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タイトルSingle-stranded DNA drives σ subunit loading onto mycobacterial RNA polymerase to unlock initiation-competent conformations.
ジャーナル・号・ページNucleic Acids Res, Vol. 53, Issue 7, Year 2025
掲載日2025年4月10日
著者Rishi Kishore Vishwakarma / Nils Marechal / Zakia Morichaud / Mickaël Blaise / Emmanuel Margeat / Konstantin Brodolin /
PubMed 要旨Initiation of transcription requires the formation of the "open" promoter complex (RPo). For this, the σ subunit of bacterial RNA polymerase (RNAP) binds to the nontemplate strand of the -10 element ...Initiation of transcription requires the formation of the "open" promoter complex (RPo). For this, the σ subunit of bacterial RNA polymerase (RNAP) binds to the nontemplate strand of the -10 element sequence of promoters and nucleates DNA unwinding. This is accompanied by a cascade of conformational changes on RNAP, the exact mechanics of which remains elusive. Here, using single-molecule Förster resonance energy transfer and cryo-electron microscopy, we explored the conformational landscape of RNAP from the human pathogen Mycobacterium tuberculosis upon binding to a single-stranded DNA (ssDNA) fragment that includes the -10 element sequence (-10 ssDNA). We found that like the transcription activator RNAP-binding protein A, -10 ssDNA induced σ subunit loading onto the DNA/RNA channels of RNAP. This triggered RNAP clamp closure and unswiveling that are required for RPo formation and RNA synthesis initiation. Our results reveal a mechanism of ssDNA-guided RNAP maturation and identify the σ subunit as a regulator of RNAP conformational dynamics.
リンクNucleic Acids Res / PubMed:40240004 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度3.2 - 4.33 Å
構造データ

EMDB-50508, PDB-9fjp:
Cryo-EM structure of Mycobacterium tuberculosis sigma-B RNA polymerase bound to -10 promoter element ssDNA oligo
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.2 Å

EMDB-50509: cryo-EM structure of Mycobacterium tuberculosis sigma-B RNA polymerase bound to -10 promoter element ssDNA oligo - consensus map
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.33 Å

EMDB-50510, PDB-9fjr:
Cryo-EM structure of Mycobacterium tuberculosis sigma-B RNA polymerase bound to -10 promoter element ssDNA oligo - sigma-B docked conformation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.43 Å

EMDB-50511: Cryo-EM structure of Mycobacterium tuberculosis sigma-B RNA polymerase bound to -10 promoter element ssDNA oligo - sigma-B udocked conformation
PDB-9fjs: Cryo-EM structure of Mycobacterium tuberculosis sigma-B RNA polymerase bound to -10 promoter element ssDNA oligo - sigma-B undocked conformation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.48 Å

EMDB-50512: Cryo-EM structure of Mycobacterium tuberculosis sigma-B RNA polymerase bound to -10 promoter element ssDNA oligo - swiveled conformation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.33 Å

EMDB-50514: Cryo-EM structure of Mycobacterium tuberculosis sigma-B RNA polymerase bound to -10 promoter element ssDNA oligo - unswiveled conformation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.79 Å

化合物

ChemComp-ZN:
Unknown entry

ChemComp-MG:
Unknown entry / マグネシウムジカチオン

由来
  • mycobacterium tuberculosis h37rv (結核菌)
  • escherichia coli (大腸菌)
キーワードTRANSCRIPTION / RNA polymerase; sigma factor; SigB / stress response; -10 promoter element; promoter recognition; tuberculosis

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

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  • EMDB/PDB/SASBDBのエントリから引用されている文献のデータベースです
  • Pubmedのデータを利用しています

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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