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タイトルType IV-A CRISPR-Csf complex: Assembly, dsDNA targeting, and CasDinG recruitment.
ジャーナル・号・ページMol Cell, Vol. 83, Issue 14, Page 2493-22508.e5, Year 2023
掲載日2023年7月20日
著者Ning Cui / Jun-Tao Zhang / Yongrui Liu / Yanhong Liu / Xiao-Yu Liu / Chongyuan Wang / Hongda Huang / Ning Jia /
PubMed 要旨Type IV CRISPR-Cas systems, which are primarily found on plasmids and exhibit a strong plasmid-targeting preference, are the only one of the six known CRISPR-Cas types for which the mechanistic ...Type IV CRISPR-Cas systems, which are primarily found on plasmids and exhibit a strong plasmid-targeting preference, are the only one of the six known CRISPR-Cas types for which the mechanistic details of their function remain unknown. Here, we provide high-resolution functional snapshots of type IV-A Csf complexes before and after target dsDNA binding, either in the absence or presence of CasDinG, revealing the mechanisms underlying Csf complex assembly, "DWN" PAM-dependent dsDNA targeting, R-loop formation, and CasDinG recruitment. Furthermore, we establish that CasDinG, a signature DinG family helicase, harbors ssDNA-stimulated ATPase activity and ATP-dependent 5'-3' DNA helicase activity. In addition, we show that CasDinG unwinds the non-target strand (NTS) and target strand (TS) of target dsDNA from the Csf complex. These molecular details advance our mechanistic understanding of type IV-A CRISPR-Csf function and should enable Csf complexes to be harnessed as genome-engineering tools for biotechnological applications.
リンクMol Cell / PubMed:37343553
手法EM (単粒子) / X線回折
解像度2.6 - 3.7 Å
構造データ

EMDB-33180, PDB-7xfz:
CryoEM structure of type IV-A Csf-crRNAsp14-dsDNA ternary complex
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.0 Å

EMDB-33181, PDB-7xg0:
CryoEM structure of type IV-A Csf-crRNA-dsDNA ternary complex
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.6 Å

EMDB-33183, PDB-7xg2:
CryoEM structure of type IV-A NTS-nicked dsDNA bound Csf-crRNA ternary complex
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.8 Å

EMDB-33184, PDB-7xg3:
CryoEM structure of type IV-A CasDinG bound NTS-nicked Csf-crRNA-dsDNA quaternary complex
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.0 Å

EMDB-33185, PDB-7xg4:
CryoEM structure of type IV-A CasDinG bound NTS-nicked Csf-crRNA-dsDNA quaternary complex in a second state
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.7 Å

PDB-7xex:
Crystal strucutre of apoCasDinG
手法: X-RAY DIFFRACTION / 解像度: 3 Å

PDB-7xf0:
Crystal strucutre of CasDinG in complex with ATP
手法: X-RAY DIFFRACTION / 解像度: 3.1 Å

PDB-7xf1:
Crystal strucutre of apoCasDinG in complex with ssDNA
手法: X-RAY DIFFRACTION / 解像度: 3.2 Å

化合物

ChemComp-ATP:
ADENOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / ATP / ATP, エネルギー貯蔵分子*YM

ChemComp-ZN:
Unknown entry

由来
  • pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
  • synthetic construct (人工物)
キーワードSTRUCTURAL PROTEIN / Nuclease / STRUCTURAL PROTEIN/DNA / STRUCTURAL PROTEIN-DNA complex / STRUCTURAL PROTEIN/RNA/DNA / STRUCTURAL PROTEIN-RNA-DNA COMPLEX

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

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  • EMDB/PDB/SASBDBのエントリから引用されている文献のデータベースです
  • Pubmedのデータを利用しています

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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