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タイトルDifferences between bacteria and eukaryotes in clamp loader mechanism, a conserved process underlying DNA replication.
ジャーナル・号・ページJ Biol Chem, Vol. 300, Issue 4, Page 107166, Year 2024
掲載日2024年3月14日
著者Jacob T Landeck / Joshua Pajak / Emily K Norman / Emma L Sedivy / Brian A Kelch /
PubMed 要旨Clamp loaders are pentameric ATPases that place circular sliding clamps onto DNA, where they function in DNA replication and genome integrity. The central activity of a clamp loader is the opening of ...Clamp loaders are pentameric ATPases that place circular sliding clamps onto DNA, where they function in DNA replication and genome integrity. The central activity of a clamp loader is the opening of the ring-shaped sliding clamp and the subsequent binding to primer-template (p/t)-junctions. The general architecture of clamp loaders is conserved across all life, suggesting that their mechanism is retained. Recent structural studies of the eukaryotic clamp loader replication factor C (RFC) revealed that it functions using a crab-claw mechanism, where clamp opening is coupled to a massive conformational change in the loader. Here we investigate the clamp loading mechanism of the Escherichia coli clamp loader at high resolution using cryo-electron microscopy. We find that the E. coli clamp loader opens the clamp using a crab-claw motion at a single pivot point, whereas the eukaryotic RFC loader uses motions distributed across the complex. Furthermore, we find clamp opening occurs in multiple steps, starting with a partly open state with a spiral conformation, and proceeding to a wide open clamp in a surprising planar geometry. Finally, our structures in the presence of p/t-junctions illustrate how the clamp closes around p/t-junctions and how the clamp loader initiates release from the loaded clamp. Our results reveal mechanistic distinctions in a macromolecular machine that is conserved across all domains of life.
リンクJ Biol Chem / PubMed:38490435 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度3.0 - 7.7 Å
構造データ

EMDB-43094, PDB-8val:
Structure of the E. coli clamp loader bound to the beta clamp in a Open-DNAp/t conformation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.7 Å

EMDB-43095, PDB-8vam:
Structure of the E. coli clamp loader bound to the beta clamp in a Semi-Open conformation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.9 Å

EMDB-43096, PDB-8van:
Structure of the E. coli clamp loader bound to the beta clamp in an Initial-Binding conformation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 7.7 Å

EMDB-43098, PDB-8vap:
Structure of the E. coli clamp loader bound to the beta clamp in a Fully-Open conformation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.0 Å

EMDB-43099, PDB-8vaq:
Structure of the E. coli clamp loader bound to the beta clamp in a Closed-DNA1 conformation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.8 Å

EMDB-43100, PDB-8var:
Structure of the E. coli clamp loader bound to the beta clamp in a Closed-DNA2 conformation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.9 Å

EMDB-43101, PDB-8vas:
Structure of the E. coli clamp loader bound to the beta clamp in an Altered-Collar conformation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.8 Å

EMDB-43102, PDB-8vat:
Structure of the E. coli clamp loader bound to the beta clamp in a Open-RNAp/t conformation
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.2 Å

化合物

ChemComp-ZN:
Unknown entry

ChemComp-ADP:
ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE / ADP / ADP, エネルギー貯蔵分子*YM / アデノシン二リン酸

ChemComp-BEF:
BERYLLIUM TRIFLUORIDE ION

ChemComp-MG:
Unknown entry / マグネシウムジカチオン

由来
  • escherichia coli (大腸菌)
  • synthetic construct (人工物)
キーワードREPLICATION (DNA複製) / TRANSFERASE/DNA / Bacterial Clamp Loader Complex / TRANSFERASE-DNA complex / TRANSFERASE (転移酵素) / REPLICATION/DNA / REPLICATION-DNA complex

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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