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タイトルThe reduction of FIB damage on cryo-lamella by lowering energy of ion beam revealed by a quantitative analysis.
ジャーナル・号・ページStructure, Vol. 31, Issue 10, Page 1275-11281.e4, Year 2023
掲載日2023年10月5日
著者Qi Yang / Chunling Wu / Dongjie Zhu / Junxi Li / Jing Cheng / Xinzheng Zhang /
PubMed 要旨Focused ion beam (FIB) is widely used for thinning frozen cells to produce lamellae for cryo-electron microscopy imaging and for protein structures study in vivo. However, FIB damages the lamellae ...Focused ion beam (FIB) is widely used for thinning frozen cells to produce lamellae for cryo-electron microscopy imaging and for protein structures study in vivo. However, FIB damages the lamellae and a quantitative experimental analysis of the damage is lacking. We used a 30-keV gallium FIB to prepare lamellae of a highly concentrated icosahedral virus sample. The viruses were grouped according to their distance from the surface of lamellae and reconstructed. Damage to the approximately 20-nm-thick outermost lamella surface was similar to that from exposure to 16 e/Å in a 300-kV cryo-electron microscope at high-resolution range. The damage was negligible at a depth beyond 50 nm, which was reduced to 30 nm if 8-keV Ga was used during polishing. We designed extra steps in the reconstruction refinement to maximize undamaged signals and increase the resolution. The results demonstrated that low-energy beam polishing was essential for high-quality thinner lamellae.
リンクStructure / PubMed:37527655
手法EM (単粒子)
解像度3.09 - 4.05 Å
構造データ

EMDB-36343: The cryo-EM structure of Parvovirus milled by 30 keV gallium FIB at 3.09 Angstrom resolution.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.09 Å

EMDB-36346: The cryo-EM structure of 10-20nm group Parvovirus from lamellae surface milled by 30 keV Ga+ FIB at 4.05 Angstrom resolution.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 4.05 Å

EMDB-36347: The cryo-EM structure of 20-30nm group Parvovirus from lamellae surface milled by 30 keV Ga+ FIB at 3.88 Angstrom resolution.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.88 Å

EMDB-36348: The cryo-EM structure of 30-40 nm group Parvovirus from lamellae surface milled by 30 keV Ga+ FIB at 3.82 Angstrom resolution.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.82 Å

EMDB-36349: The cryo-EM structure of 40-50 nm group Parvovirus from lamellae surface milled by 30 keV Ga+ FIB at 3.62 Angstrom resolution.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.62 Å

EMDB-36350: The cryo-EM structure of 50-60 nm group Parvovirus from lamellae surface milled by 30 keV Ga+ FIB at 3.60 Angstrom resolution.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.6 Å

EMDB-36351: The cryo-EM structure of 60-70 nm group Parvovirus from lamellae surface milled by 30 keV Ga+ FIB at 3.57 Angstrom resolution.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.57 Å

EMDB-36352: The cryo-EM structure of Parvovirus milled by 8 keV gallium FIB at 3.11 Angstrom resolution.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.11 Å

EMDB-36355: The cryo-EM structure of 10-20 nm group Parvovirus from lamellae surface milled by 8 keV Ga+ FIB at 3.88 Angstrom resolution.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.88 Å

EMDB-36356: The cryo-EM structure of 20-30 nm group Parvovirus from lamellae surface milled by 8 keV Ga+ FIB at 3.70 Angstrom resolution.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.7 Å

EMDB-36357: The cryo-EM structure of 30-40 nm group Parvovirus from lamellae surface milled by 8 keV Ga+ FIB at 3.60 Angstrom resolution.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.6 Å

EMDB-36358: The cryo-EM structure of 40-50 nm group Parvovirus from lamellae surface milled by 8 keV Ga+ FIB at 3.54 Angstrom resolution.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.54 Å

EMDB-36359: The cryo-EM structure of 50-60 nm group Parvovirus from lamellae surface milled by 8 keV Ga+ FIB at 3.57 Angstrom resolution.
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.57 Å

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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  • Pubmedのデータを利用しています

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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