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タイトルStructural basis for the non-self RNA-activated protease activity of the type III-E CRISPR nuclease-protease Craspase.
ジャーナル・号・ページNat Commun, Vol. 13, Issue 1, Page 7549, Year 2022
掲載日2022年12月7日
著者Ning Cui / Jun-Tao Zhang / Zhuolin Li / Xiao-Yu Liu / Chongyuan Wang / Hongda Huang / Ning Jia /
PubMed 要旨The RNA-targeting type III-E CRISPR-gRAMP effector interacts with a caspase-like protease TPR-CHAT to form the CRISPR-guided caspase complex (Craspase), but their functional mechanism is unknown. ...The RNA-targeting type III-E CRISPR-gRAMP effector interacts with a caspase-like protease TPR-CHAT to form the CRISPR-guided caspase complex (Craspase), but their functional mechanism is unknown. Here, we report cryo-EM structures of the type III-E gRAMP and gRAMP-TPR-CHAT complexes, before and after either self or non-self RNA target binding, and elucidate the mechanisms underlying RNA-targeting and non-self RNA-induced protease activation. The associated TPR-CHAT adopted a distinct conformation upon self versus non-self RNA target binding, with nucleotides at positions -1 and -2 of the CRISPR-derived RNA (crRNA) serving as a sensor. Only binding of the non-self RNA target activated the TPR-CHAT protease, leading to cleavage of Csx30 protein. Furthermore, TPR-CHAT structurally resembled eukaryotic separase, but with a distinct mechanism for protease regulation. Our findings should facilitate the development of gRAMP-based RNA manipulation tools, and advance our understanding of the virus-host discrimination process governed by a nuclease-protease Craspase during type III-E CRISPR-Cas immunity.
リンクNat Commun / PubMed:36477448 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度2.54 - 2.93 Å
構造データ

EMDB-33676: CryoEM structure of type III-E CRISPR gRAMP-crRNA binary complex
PDB-7y80: CryoEM structure of type III-E CRISPR Craspase gRAMP-crRNA binary complex
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.71 Å

EMDB-33677: CryoEM structure of type III-E CRISPR gRAMP-crRNA complex bound to non-self RNA target
PDB-7y81: CryoEM structure of type III-E CRISPR Craspase gRAMP-crRNA complex bound to non-self RNA target
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.54 Å

EMDB-33678: CryoEM structure of type III-E CRISPR gRAMP-crRNA complex bound to self RNA target
PDB-7y82: CryoEM structure of type III-E CRISPR Craspase gRAMP-crRNA complex bound to self RNA target
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.83 Å

EMDB-33679: CryoEM structure of type III-E CRISPR gRAMP-crRNA in complex with TPR-CHAT bound to non-self RNA target
PDB-7y83: CryoEM structure of type III-E CRISPR Craspase gRAMP-crRNA in complex with TPR-CHAT protease bound to non-self RNA target
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.93 Å

EMDB-33680: CryoEM structure of type III-E CRISPR gRAMP-crRNA in complex with TPR-CHAT
PDB-7y84: CryoEM structure of type III-E CRISPR Craspase gRAMP-crRNA in complex with TPR-CHAT protease
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.61 Å

EMDB-33681: CryoEM structure of type III-E CRISPR gRAMP-crRNA in complex with TPR-CHAT bound to self RNA target
PDB-7y85: CryoEM structure of type III-E CRISPR Craspase gRAMP-crRNA in complex with TPR-CHAT protease bound to self RNA target
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.73 Å

化合物

ChemComp-ZN:
Unknown entry

ChemComp-MG:
Unknown entry / マグネシウムジカチオン

由来
  • candidatus scalindua brodae (バクテリア)
キーワードSTRUCTURAL PROTEIN/RNA / Nuclease / STRUCTURAL PROTEIN-RNA COMPLEX / RNA BINDING PROTEIN

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

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  • EMDB/PDB/SASBDBのエントリから引用されている文献のデータベースです
  • Pubmedのデータを利用しています

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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