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Structure paper

タイトルBeam image-shift accelerated data acquisition for near-atomic resolution single-particle cryo-electron tomography.
ジャーナル・号・ページNat Commun, Vol. 12, Issue 1, Page 1957, Year 2021
掲載日2021年3月30日
著者Jonathan Bouvette / Hsuan-Fu Liu / Xiaochen Du / Ye Zhou / Andrew P Sikkema / Juliana da Fonseca Rezende E Mello / Bradley P Klemm / Rick Huang / Roel M Schaaper / Mario J Borgnia / Alberto Bartesaghi /
PubMed 要旨Tomographic reconstruction of cryopreserved specimens imaged in an electron microscope followed by extraction and averaging of sub-volumes has been successfully used to derive atomic models of ...Tomographic reconstruction of cryopreserved specimens imaged in an electron microscope followed by extraction and averaging of sub-volumes has been successfully used to derive atomic models of macromolecules in their biological environment. Eliminating biochemical isolation steps required by other techniques, this method opens up the cell to in-situ structural studies. However, the need to compensate for errors in targeting introduced during mechanical navigation of the specimen significantly slows down tomographic data collection thus limiting its practical value. Here, we introduce protocols for tilt-series acquisition and processing that accelerate data collection speed by up to an order of magnitude and improve map resolution compared to existing approaches. We achieve this by using beam-image shift to multiply the number of areas imaged at each stage position, by integrating geometrical constraints during imaging to achieve high precision targeting, and by performing per-tilt astigmatic CTF estimation and data-driven exposure weighting to improve final map resolution. We validated our beam image-shift electron cryo-tomography (BISECT) approach by determining the structure of a low molecular weight target (~300 kDa) at 3.6 Å resolution where density for individual side chains is clearly resolved.
リンクNat Commun / PubMed:33785757 / PubMed Central
手法EM (単粒子) / EM (サブトモグラム平均)
解像度3.3 - 5.6 Å
構造データ

EMDB-23355:
Structure of dNTPase at 3.3 Angstrom Resolution
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.3 Å

EMDB-23356:
Structure of dNTPase at 3.6 Angstrom Resolution
手法: EM (サブトモグラム平均) / 解像度: 3.6 Å

EMDB-23357:
Structure of 80S ribosome from EMPIAR-10064 at 5.6 Angstrom Resolution
手法: EM (サブトモグラム平均) / 解像度: 5.6 Å

EMDB-23358:
Structure of E. coli 70S ribosome from EMPIAR-10304 at 4.8 Angstrom Resolution
手法: EM (サブトモグラム平均) / 解像度: 4.8 Å

由来
  • Vibrio cholerae (コレラ菌)
  • Oryctolagus cuniculus (ウサギ)
  • Escherichia coli (大腸菌)

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

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  • EMDB/PDB/SASBDBのエントリから引用されている文献のデータベースです
  • Pubmedのデータを利用しています

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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