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タイトルSerial Lift-Out: sampling the molecular anatomy of whole organisms.
ジャーナル・号・ページNat Methods, Year 2023
掲載日2023年12月18日
著者Oda Helene Schiøtz / Christoph J O Kaiser / Sven Klumpe / Dustin R Morado / Matthias Poege / Jonathan Schneider / Florian Beck / David P Klebl / Christopher Thompson / Jürgen M Plitzko /
PubMed 要旨Cryo-focused ion beam milling of frozen-hydrated cells and subsequent cryo-electron tomography (cryo-ET) has enabled the structural elucidation of macromolecular complexes directly inside cells. ...Cryo-focused ion beam milling of frozen-hydrated cells and subsequent cryo-electron tomography (cryo-ET) has enabled the structural elucidation of macromolecular complexes directly inside cells. Application of the technique to multicellular organisms and tissues, however, is still limited by sample preparation. While high-pressure freezing enables the vitrification of thicker samples, it prolongs subsequent preparation due to increased thinning times and the need for extraction procedures. Additionally, thinning removes large portions of the specimen, restricting the imageable volume to the thickness of the final lamella, typically <300 nm. Here we introduce Serial Lift-Out, an enhanced lift-out technique that increases throughput and obtainable contextual information by preparing multiple sections from single transfers. We apply Serial Lift-Out to Caenorhabditis elegans L1 larvae, yielding a cryo-ET dataset sampling the worm's anterior-posterior axis, and resolve its ribosome structure to 7 Å and a subregion of the 11-protofilament microtubule to 13 Å, illustrating how Serial Lift-Out enables the study of multicellular molecular anatomy.
リンクNat Methods / PubMed:38110637
手法EM (サブトモグラム平均) / EM (トモグラフィー)
解像度6.9 - 15.0 Å
構造データ

EMDB-17241: C. elegans L1 80S ribosome
手法: EM (サブトモグラム平均) / 解像度: 6.9 Å

EMDB-17242: C. elegans L1 larva 80S ribosome class 1
手法: EM (サブトモグラム平均) / 解像度: 14.0 Å

EMDB-17243: C. elegans L1 larva 80S ribosome class 2
手法: EM (サブトモグラム平均) / 解像度: 12.0 Å

EMDB-17244: C. elegans L1 larva 80S ribosome class 3
手法: EM (サブトモグラム平均) / 解像度: 15.0 Å

EMDB-17245: C. elegans L1 larva 80S ribosome class 4
手法: EM (サブトモグラム平均) / 解像度: 8.4 Å

EMDB-17246: C. elegans L1 larva body wall muscle tomogram
手法: EM (トモグラフィー)

EMDB-17247: C. elegans L1 larva ventral pharyngeal periphery tomogram
手法: EM (トモグラフィー)

EMDB-17248: Tomogram of the nucleus of a C. elegans L1 larva
手法: EM (トモグラフィー)

EMDB-18186: C. elegans L1 larva
手法: EM (トモグラフィー)

EMDB-18187: Focused refinment of 11-protofilament microtubule from C. elegans
手法: EM (サブトモグラム平均) / 解像度: 13.0 Å

由来
  • Caenorhabditis elegans (センチュウ)

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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