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タイトルStructural basis for the activity of the type VII CRISPR-Cas system.
ジャーナル・号・ページNature, Vol. 633, Issue 8029, Page 465-472, Year 2024
掲載日2024年8月14日
著者Jie Yang / Xuzichao Li / Qiuqiu He / Xiaoshen Wang / Jingjing Tang / Tongyao Wang / Yi Zhang / Feiyang Yu / Shuqin Zhang / Zhikun Liu / Lingling Zhang / Fumeng Liao / Hang Yin / Haiyan Zhao / Zengqin Deng / Heng Zhang /
PubMed 要旨The newly identified type VII CRISPR-Cas candidate system uses a CRISPR RNA-guided ribonucleoprotein complex formed by Cas5 and Cas7 proteins to target RNA. However, the RNA cleavage is executed by a ...The newly identified type VII CRISPR-Cas candidate system uses a CRISPR RNA-guided ribonucleoprotein complex formed by Cas5 and Cas7 proteins to target RNA. However, the RNA cleavage is executed by a dedicated Cas14 nuclease, which is distinct from the effector nucleases of the other CRISPR-Cas systems. Here we report seven cryo-electron microscopy structures of the Cas14-bound interference complex at different functional states. Cas14, a tetrameric protein in solution, is recruited to the Cas5-Cas7 complex in a target RNA-dependent manner. The N-terminal catalytic domain of Cas14 binds a stretch of the substrate RNA for cleavage, whereas the C-terminal domain is primarily responsible for tethering Cas14 to the Cas5-Cas7 complex. The biochemical cleavage assays corroborate the captured functional conformations, revealing that Cas14 binds to different sites on the Cas5-Cas7 complex to execute individual cleavage events. Notably, a plugged-in arginine of Cas7 sandwiched by a C-shaped clamp of C-terminal domain precisely modulates Cas14 binding. More interestingly, target RNA cleavage is altered by a complementary protospacer flanking sequence at the 5' end, but not at the 3' end. Altogether, our study elucidates critical molecular details underlying the assembly of the interference complex and substrate cleavage in the type VII CRISPR-Cas system, which may help rational engineering of the type VII CRISPR-Cas system for biotechnological applications.
リンクNature / PubMed:39143216
手法EM (単粒子)
解像度2.85 - 3.2 Å
構造データ

EMDB-39287, PDB-8yhd:
Cryo-EM structure of CTR-bound type VII CRISPR-Cas complex at post-state I
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.93 Å

EMDB-39288, PDB-8yhe:
Cryo-EM structure of CTR-bound type VII CRISPR-Cas complex at post-state II
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.07 Å

EMDB-39766, PDB-8z4j:
Cryo-EM structure of CTR-bound type VII CRISPR-Cas complex at substrate-engaged state II
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.97 Å

EMDB-39767, PDB-8z4l:
Cryo-EM structure of CTR-bound type VII CRISPR-Cas complex at substrate-engaged state I
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.85 Å

EMDB-39857, PDB-8z99:
Cryo-EM structure of NTR-bound type VII CRISPR-Cas complex at substrate-engaged state +I
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.2 Å

EMDB-39859, PDB-8z9c:
Cryo-EM structure of NTR-bound type VII CRISPR-Cas complex at substrate-engaged state I
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.01 Å

EMDB-39861, PDB-8z9e:
Cryo-EM structure of NTR-bound type VII CRISPR-Cas complex at substrate-engaged state II
手法: EM (単粒子) / 解像度: 3.13 Å

化合物

ChemComp-ZN:
Unknown entry

由来
  • metagenome (メタゲノム)
キーワードANTIVIRAL PROTEIN / a protein complex / protein structure

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見文献

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関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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