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タイトルCryoEM-sampling of metastable conformations appearing in cofactor-ligand association and catalysis of glutamate dehydrogenase.
ジャーナル・号・ページSci Rep, Vol. 14, Issue 1, Page 11165, Year 2024
掲載日2024年5月15日
著者Taiki Wakabayashi / Mao Oide / Masayoshi Nakasako /
PubMed 要旨Kinetic aspects of enzymatic reactions are described by equations based on the Michaelis-Menten theory for the initial stage. However, the kinetic parameters provide little information on the atomic ...Kinetic aspects of enzymatic reactions are described by equations based on the Michaelis-Menten theory for the initial stage. However, the kinetic parameters provide little information on the atomic mechanism of the reaction. In this study, we analyzed structures of glutamate dehydrogenase in the initial and steady stages of the reaction using cryoEM at near-atomic resolution. In the initial stage, four metastable conformations displayed different domain motions and cofactor/ligand association modes. The most striking finding was that the enzyme-cofactor-substrate complex, treated as a single state in the enzyme kinetic theory, comprised at least three different metastable conformations. In the steady stage, seven conformations, including derivatives from the four conformations in the initial stage, made the reaction pathway complicated. Based on the visualized conformations, we discussed stage-dependent pathways to illustrate the dynamics of the enzyme in action.
リンクSci Rep / PubMed:38750092 / PubMed Central
手法EM (単粒子)
解像度2.6 - 2.96 Å
構造データ

EMDB-38249, PDB-8xco:
Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus incorporating NADPH in the initial stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.64 Å

EMDB-38250, PDB-8xcp:
Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus incorporating NADP and GLU in the initial stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.64 Å

EMDB-38251, PDB-8xcq:
Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus incorporating NADP and GLU in the initial stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.6 Å

EMDB-38252, PDB-8xcr:
Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus in complex with NADP and GLU in the initial stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.6 Å

EMDB-38253, PDB-8xcs:
Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus in complex with NADPH, AKG and NH4 in the initial stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.63 Å

EMDB-38254, PDB-8xct:
Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus incorporating NADPH in the steady stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.87 Å

EMDB-38255, PDB-8xcu:
Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus incorporating NADPH, AKG and GLU in the steady stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.83 Å

EMDB-38256, PDB-8xcv:
Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus incorporating NADP in the steady stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.83 Å

EMDB-38257: Cryo-EM structure of glutamate dehydrogenase from thermococcus profundus incorporating NADPH and AKG in the steady stage of reaction
PDB-8xcw: Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus incorporating NADPH and AKG in the steady stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.87 Å

EMDB-38258, PDB-8xcx:
Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus incorporating NADP and GLU in the steady stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.83 Å

EMDB-38259, PDB-8xcy:
Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus incorporating NADP and GLU in the steady stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.91 Å

EMDB-38260: Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus incorporating NADP and GLU in the steady stage of reaction
PDB-8xcz: Cryo-EM structure of glutamate dehydrogenase from thermococcus profundus incorporating NADP and GLU in the steady stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.83 Å

EMDB-38261, PDB-8xd0:
Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus incorporating NADPH and AKG in the steady stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.83 Å

EMDB-38262, PDB-8xd1:
Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus incorporating NADP in the steady stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.96 Å

EMDB-38263, PDB-8xd2:
Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus incorporating NADP and GLU in the steady stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.64 Å

EMDB-38264, PDB-8xd3:
Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus incorporating NADP and GLU in the steady stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.87 Å

EMDB-38265, PDB-8xd4:
Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus incorporating NADP and GLU in the steady stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.87 Å

EMDB-38266, PDB-8xd5:
Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus in complex with NADP and GLU in the steady stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.75 Å

EMDB-38267, PDB-8xd6:
Cryo-EM structure of Glutamate dehydrogenase from Thermococcus profundus in complex with NADPH, AKG and NH4 in the steady stage of reaction
手法: EM (単粒子) / 解像度: 2.79 Å

化合物

ChemComp-NDP:
NADPH DIHYDRO-NICOTINAMIDE-ADENINE-DINUCLEOTIDE PHOSPHATE / NADPH

ChemComp-HOH:
WATER

ChemComp-NAP:
NADP NICOTINAMIDE-ADENINE-DINUCLEOTIDE PHOSPHATE

ChemComp-GGL:
GAMMA-L-GLUTAMIC ACID / グルタミン酸

ChemComp-AKG:
2-OXOGLUTARIC ACID / α-ケトグルタル酸

ChemComp-NH4:
AMMONIUM ION / アンモニウム

由来
  • thermococcus profundus (古細菌)
キーワードOXIDOREDUCTASE / Complex / Coenzyme / NADPH / NADP+ / Glutamate / 2-oxoglutarate / ammonium ion / NADP

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万見文献について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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  • EMDB/PDB/SASBDBのエントリから引用されている文献のデータベースです
  • Pubmedのデータを利用しています

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 万見 (Yorodumi) / EMN文献 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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