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- EMDB-15673: Cryo-EM structure of a TasA fibre -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-15673
タイトルCryo-EM structure of a TasA fibre
マップデータHelical reconstruction cryo-EM map of TasA fibres.
試料
  • 複合体: Three-subunit TasA filament
    • タンパク質・ペプチド: Major biofilm matrix component
キーワードBiofilm matrix fibre / PROTEIN FIBRIL
機能・相同性Peptidase M73, camelysin / Camelysin metallo-endopeptidase / Signal peptide, camelysin / sporulation resulting in formation of a cellular spore / extracellular region / identical protein binding / Major biofilm matrix component
機能・相同性情報
生物種Bacillus subtilis (枯草菌)
手法らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.47 Å
データ登録者Boehning J / Bharat TAM
資金援助 英国, 1件
OrganizationGrant number国
Wellcome Trust202231/Z/16/Z 英国
引用
ジャーナル: Nat Commun / 年: 2022
タイトル: Donor-strand exchange drives assembly of the TasA scaffold in Bacillus subtilis biofilms.
著者: Jan Böhning / Mnar Ghrayeb / Conrado Pedebos / Daniel K Abbas / Syma Khalid / Liraz Chai / Tanmay A M Bharat /
要旨: Many bacteria in nature exist in multicellular communities termed biofilms, where cells are embedded in an extracellular matrix that provides rigidity to the biofilm and protects cells from chemical ...Many bacteria in nature exist in multicellular communities termed biofilms, where cells are embedded in an extracellular matrix that provides rigidity to the biofilm and protects cells from chemical and mechanical stresses. In the Gram-positive model bacterium Bacillus subtilis, TasA is the major protein component of the biofilm matrix, where it has been reported to form functional amyloid fibres contributing to biofilm structure and stability. Here, we present electron cryomicroscopy structures of TasA fibres, which show that, rather than forming amyloid fibrils, TasA monomers assemble into fibres through donor-strand exchange, with each subunit donating a β-strand to complete the fold of the next subunit along the fibre. Combining electron cryotomography, atomic force microscopy, and mutational studies, we show how TasA fibres congregate in three dimensions to form abundant fibre bundles that are essential for B. subtilis biofilm formation. Our study explains the previously observed biochemical properties of TasA and shows how a bacterial extracellular globular protein can assemble from monomers into β-sheet-rich fibres, and how such fibres assemble into bundles in biofilms.
#1: ジャーナル: Biorxiv / 年: 2022
タイトル: Molecular architecture of the TasA biofilm scaffold in Bacillus subtilis
著者: Bohning J / Ghrayeb M / Pedebos C / Abbas DK / Khalid S / Chai L / Bharat TAM
履歴
登録2022年8月25日-
ヘッダ(付随情報) 公開2022年11月30日-
マップ公開2022年11月30日-
更新2025年7月9日-
現状2025年7月9日処理サイト: PDBe / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_15673.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_15673.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 83.7 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈Helical reconstruction cryo-EM map of TasA fibres.
投影像・断面図

画像のコントロール

大きさ
明度
コントラスト
その他
軸Z (Sec.)Y (Row.)X (Col.)
1.09 Å/pix.
x 280 pix.
= 305.76 Å		1.09 Å/pix.
x 280 pix.
= 305.76 Å		1.09 Å/pix.
x 280 pix.
= 305.76 Å

表面

投影像

断面 (1/3)

断面 (1/2)

断面 (2/3)

画像は Spider により作成

ボクセルのサイズX=Y=Z: 1.092 Å
密度

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)
表面レベル登録者による: 0.022
最小 - 最大-0.048423715 - 0.10818161
平均 (標準偏差)0.00006771967 (±0.0017658668)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ280280280
Spacing280280280
セルA=B=C: 305.76 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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マスク #1

ファイルemd_15673_msk_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: #2

ファイルemd_15673_half_map_1.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

-
ハーフマップ: #1

ファイルemd_15673_half_map_2.map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : Three-subunit TasA filament

全体名称: Three-subunit TasA filament
要素
  • 複合体: Three-subunit TasA filament
    • タンパク質・ペプチド: Major biofilm matrix component

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超分子 #1: Three-subunit TasA filament

超分子名称: Three-subunit TasA filament / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: all
由来(天然)生物種: Bacillus subtilis (枯草菌) / 株: ZK4363
分子量理論値: 77.211 KDa

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分子 #1: Major biofilm matrix component

分子名称: Major biofilm matrix component / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 3 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Bacillus subtilis (枯草菌) / 株: 168
分子量理論値: 25.767654 KDa
配列文字列: AFNDIKSKDA TFASGTLDLS AKENSASVNL SNLKPGDKLT KDFQFENNGS LAIKEVLMAL NYGDFKANGG SNTSPEDFLS QFEVTLLTV GKEGGNGYPK NIILDDANLK DLYLMSAKND AAAAEKIKKQ IDPKFLNASG KVNVATIDGK TAPEYDGVPK T PTDFDQVQ ...文字列:
AFNDIKSKDA TFASGTLDLS AKENSASVNL SNLKPGDKLT KDFQFENNGS LAIKEVLMAL NYGDFKANGG SNTSPEDFLS QFEVTLLTV GKEGGNGYPK NIILDDANLK DLYLMSAKND AAAAEKIKKQ IDPKFLNASG KVNVATIDGK TAPEYDGVPK T PTDFDQVQ MEIQFKDDKT KDEKGLMVQN KYQGNSIKLQ FSFEATQWNG LTIKKDHTDK DGYVKENEKA HSEDKN

UniProtKB: Major biofilm matrix component

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析らせん対称体再構成法
試料の集合状態filament

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試料調製

緩衝液pH: 8
グリッドモデル: Quantifoil R2/2 / 材質: COPPER/RHODIUM / メッシュ: 200 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 支持フィルム - トポロジー: HOLEY ARRAY / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 20 sec.
凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
平均電子線量: 48.5 e/Å2
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.0 µm
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

最終 再構成想定した対称性 - らせんパラメータ - Δz: 48.36 Å
想定した対称性 - らせんパラメータ - ΔΦ: -55.18 °
想定した対称性 - らせんパラメータ - 軸対称性: C1 (非対称)
解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.47 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1) / 使用した粒子像数: 103009
CTF補正ソフトウェア - 名称: RELION (ver. 3.1) / タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
初期モデルモデルのタイプ: OTHER
最終 角度割当タイプ: NOT APPLICABLE
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

精密化空間: REAL / プロトコル: AB INITIO MODEL
得られたモデル

PDB-8aur:
Cryo-EM structure of a TasA fibre

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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