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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 2vaz | ||||||
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タイトル | Model of the S15-mRNA complex fitted into the cryo-EM map of the 70S entrapment complex. | ||||||
要素 |
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キーワード | TRANSLATION (翻訳 (生物学)) / PLATFORM-BINDING CENTER / GENE EXPRESSION REGULATION / RIBOSOMAL PROTEIN / RIBONUCLEOPROTEIN (核タンパク質) / PROTEIN SYNTHESIS (タンパク質生合成) / TRANSLATION INITIATION / RIBOSOME (リボソーム) / RIBOSWITCH (リボスイッチ) / RNA-BINDING / RRNA-BINDING / RNA PSEUDOKNOT / MRNA STRUCTURE / REPRESSOR PROTEIN (リプレッサー) | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 mRNA base-pairing translational repressor activity / small ribosomal subunit rRNA binding / ribosomal small subunit assembly / cytosolic small ribosomal subunit / cytoplasmic translation / rRNA binding / structural constituent of ribosome / 翻訳 (生物学) / 細胞質基質 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ESCHERICHIA COLI (大腸菌) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 10 Å | ||||||
Model type details | P ATOMS ONLY, CHAIN A ; CA ATOMS ONLY, CHAIN F | ||||||
データ登録者 | Marzi, S. / Myasnikov, A.G. / Serganov, A. / Ehresmann, C. / Romby, P. / Yusupov, M. / Klaholz, B.P. | ||||||
引用 | ジャーナル: Cell / 年: 2007 タイトル: Structured mRNAs regulate translation initiation by binding to the platform of the ribosome. 著者: Stefano Marzi / Alexander G Myasnikov / Alexander Serganov / Chantal Ehresmann / Pascale Romby / Marat Yusupov / Bruno P Klaholz / 要旨: Gene expression can be regulated at the level of initiation of protein biosynthesis via structural elements present at the 5' untranslated region of mRNAs. These folded mRNA segments may bind to the ...Gene expression can be regulated at the level of initiation of protein biosynthesis via structural elements present at the 5' untranslated region of mRNAs. These folded mRNA segments may bind to the ribosome, thus blocking translation until the mRNA unfolds. Here, we report a series of cryo-electron microscopy snapshots of ribosomal complexes directly visualizing either the mRNA structure blocked by repressor protein S15 or the unfolded, active mRNA. In the stalled state, the folded mRNA prevents the start codon from reaching the peptidyl-tRNA (P) site inside the ribosome. Upon repressor release, the mRNA unfolds and moves into the mRNA channel allowing translation initiation. A comparative structure and sequence analysis suggests the existence of a universal stand-by site on the ribosome (the 30S platform) dedicated for binding regulatory 5' mRNA elements. Different types of mRNA structures may be accommodated during translation preinitiation and regulate gene expression by transiently stalling the ribosome. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 2vaz.cif.gz | 16 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb2vaz.ent.gz | 7.6 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 2vaz.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/va/2vaz ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/va/2vaz | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: RNA鎖 | 分子量: 59427.113 Da / 分子数: 1 / 断片: HAIRPIN LOOP DOMAIN I AND PSEUDOKNOT / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) |
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#2: タンパク質 | 分子量: 10290.816 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / プラスミド: PET11C / 発現宿主: ESCHERICHIA COLI (大腸菌) / 株 (発現宿主): BL21(DE3) / 参照: UniProt: P0ADZ4 |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: 70S PRE-INITIATION COMPLEX ENTRAPPED BY S15- RPSOMRNA タイプ: RIBOSOME |
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緩衝液 | 名称: 20 MM TRIS-HCL PH 7.5, 60 MM KCL, 1MM DTT, 7.5 MM MGCL2 pH: 7.5 詳細: 20 MM TRIS-HCL PH 7.5, 60 MM KCL, 1MM DTT, 7.5 MM MGCL2 |
試料 | 濃度: 0.5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | 詳細: HOLEY CARBON |
急速凍結 | 装置: HOMEMADE PLUNGER / 凍結剤: ETHANE 詳細: BLOT FOR 2 SECONDS BEFORE PLUNGING IN LIQUID ETHANE USING A HOME-MADE CRYO- PLUNGER |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Tecnai F20 / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TECNAI F20 / 日付: 2005年1月5日 |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / 倍率(公称値): 50000 X / 倍率(補正後): 51484 X / 最大 デフォーカス(公称値): 3500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm / Cs: 2 mm |
試料ホルダ | 温度: 77 K |
撮影 | 電子線照射量: 20 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: KODAK SO-163 FILM |
画像スキャン | デジタル画像の数: 67 |
放射波長 | 相対比: 1 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | 詳細: INDIVIDUAL PARTICLES | ||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||
3次元再構成 | 手法: MANUAL FITTING / 解像度: 10 Å / 粒子像の数: 31415 / ピクセルサイズ(公称値): 3 Å / ピクセルサイズ(実測値): 3 Å 詳細: THE COORDINATES IN THIS ENTRY WERE GENERATED FROM ELECTRON MICROSCOPY DATA. PROTEIN DATA BANK CONVENTIONS REQUIRE THAT CRYST1 AND SCALE RECORDS BE INCLUDED, BUT THE VALUES ON THESE RECORDS ...詳細: THE COORDINATES IN THIS ENTRY WERE GENERATED FROM ELECTRON MICROSCOPY DATA. PROTEIN DATA BANK CONVENTIONS REQUIRE THAT CRYST1 AND SCALE RECORDS BE INCLUDED, BUT THE VALUES ON THESE RECORDS ARE MEANINGLESS. THE MRNA HAS BEEN MODELED USING MANIP (MASSIRE AND WESTHOF). 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: OTHER / 空間: REAL 詳細: METHOD--MANUAL REFINEMENT PROTOCOL--X-RAY AND HOMOLOGY MODELS | ||||||||||||||||
原子モデル構築 |
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精密化 | 最高解像度: 10 Å | ||||||||||||||||
精密化ステップ | サイクル: LAST / 最高解像度: 10 Å
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