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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-3047 | |||||||||
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タイトル | 40S-eIF1A-eIF1 complex | |||||||||
マップデータ | To see a continuous density for the eIF1 and eIF1A initiation factors, apply a Gaussian filtering of 1.05 and a contour level of 0.03 | |||||||||
試料 |
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キーワード | Eukaryotic translation initiation / 48S / small ribosome subunit. | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 formation of translation initiation ternary complex / translation reinitiation / multi-eIF complex / eukaryotic 43S preinitiation complex / formation of cytoplasmic translation initiation complex / formation of translation preinitiation complex / eukaryotic 48S preinitiation complex / Formation of the ternary complex, and subsequently, the 43S complex / Translation initiation complex formation / Ribosomal scanning and start codon recognition ...formation of translation initiation ternary complex / translation reinitiation / multi-eIF complex / eukaryotic 43S preinitiation complex / formation of cytoplasmic translation initiation complex / formation of translation preinitiation complex / eukaryotic 48S preinitiation complex / Formation of the ternary complex, and subsequently, the 43S complex / Translation initiation complex formation / Ribosomal scanning and start codon recognition / Formation of a pool of free 40S subunits / ribosomal small subunit binding / L13a-mediated translational silencing of Ceruloplasmin expression / translation regulator activity / regulation of translational fidelity / translation initiation factor binding / translational initiation / translation initiation factor activity / cytosolic ribosome / maintenance of translational fidelity / ribosomal small subunit assembly / rRNA processing / cytoplasmic stress granule / cytosolic small ribosomal subunit / ribosome binding / double-stranded RNA binding / cytoplasmic translation / small ribosomal subunit / cytosolic large ribosomal subunit / rRNA binding / リボソーム / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / 翻訳 (生物学) / protein kinase binding / RNA binding / zinc ion binding / metal ion binding / 細胞核 / 細胞質基質 / 細胞質 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Kluyveromyces lactis (酵母) / Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.46 Å | |||||||||
データ登録者 | Llacer JL / Hussain T / Ramakrishnan V | |||||||||
引用 | ジャーナル: Mol Cell / 年: 2015 タイトル: Conformational Differences between Open and Closed States of the Eukaryotic Translation Initiation Complex. 著者: Jose L Llácer / Tanweer Hussain / Laura Marler / Colin Echeverría Aitken / Anil Thakur / Jon R Lorsch / Alan G Hinnebusch / V Ramakrishnan / 要旨: Translation initiation in eukaryotes begins with the formation of a pre-initiation complex (PIC) containing the 40S ribosomal subunit, eIF1, eIF1A, eIF3, ternary complex (eIF2-GTP-Met-tRNAi), and ...Translation initiation in eukaryotes begins with the formation of a pre-initiation complex (PIC) containing the 40S ribosomal subunit, eIF1, eIF1A, eIF3, ternary complex (eIF2-GTP-Met-tRNAi), and eIF5. The PIC, in an open conformation, attaches to the 5' end of the mRNA and scans to locate the start codon, whereupon it closes to arrest scanning. We present single particle cryo-electron microscopy (cryo-EM) reconstructions of 48S PICs from yeast in these open and closed states, at 6.0 Å and 4.9 Å, respectively. These reconstructions show eIF2β as well as a configuration of eIF3 that appears to encircle the 40S, occupying part of the subunit interface. Comparison of the complexes reveals a large conformational change in the 40S head from an open mRNA latch conformation to a closed one that constricts the mRNA entry channel and narrows the P site to enclose tRNAi, thus elucidating key events in start codon recognition. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_3047.map.gz | 96.5 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-3047-v30.xml emd-3047.xml | 12.1 KB 12.1 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_3047_fsc.xml | 10.6 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | EMD-3047.png emd_3047.png | 459.3 KB 459.3 KB | ||
その他 | 40S-1-1A_half1_class001_unfil.map 40S-1-1A_half2_class001_unfil.map | 103 MB 103 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3047 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-3047 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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「今月の分子」の関連する項目 |
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_3047.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 100.6 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | To see a continuous density for the eIF1 and eIF1A initiation factors, apply a Gaussian filtering of 1.05 and a contour level of 0.03 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.34 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-添付マップデータ: 40S-1-1A half1 class001 unfil.map
ファイル | 40S-1-1A_half1_class001_unfil.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-添付マップデータ: 40S-1-1A half2 class001 unfil.map
ファイル | 40S-1-1A_half2_class001_unfil.map | ||||||||||||
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投影像・断面図 |
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密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : 40S-eIF1-eIF1A preinitiation complex
全体 | 名称: 40S-eIF1-eIF1A preinitiation complex |
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要素 |
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-超分子 #1000: 40S-eIF1-eIF1A preinitiation complex
超分子 | 名称: 40S-eIF1-eIF1A preinitiation complex / タイプ: sample / ID: 1000 / 集合状態: 1 / Number unique components: 3 |
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分子量 | 理論値: 1.23 MDa |
-超分子 #1: Ribosome small subunit
超分子 | 名称: Ribosome small subunit / タイプ: complex / ID: 1 / Name.synonym: 40S / 組換発現: No / Ribosome-details: ribosome-eukaryote: SSU 40S, SSU RNA 18S |
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由来(天然) | 生物種: Kluyveromyces lactis (酵母) |
分子量 | 理論値: 1.2 MDa |
-分子 #1: Eukaryotic initiation factor 1
分子 | 名称: Eukaryotic initiation factor 1 / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / Name.synonym: eIF1 / コピー数: 1 / 集合状態: Monomer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 別称: Baker's yeast |
分子量 | 理論値: 12.3 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 組換株: Rosetta / 組換プラスミド: pTYB2 |
配列 | UniProtKB: Eukaryotic translation initiation factor eIF-1 |
-分子 #2: Eukaryotic initiation factor 1A
分子 | 名称: Eukaryotic initiation factor 1A / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / Name.synonym: eIF1A / コピー数: 1 / 集合状態: Monomer / 組換発現: Yes |
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由来(天然) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 別称: baker's yeast |
分子量 | 理論値: 17.4 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 組換株: Rosetta / 組換プラスミド: pTYB2 |
配列 | UniProtKB: Eukaryotic translation initiation factor 1A |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.17 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 6.5 詳細: 20mM MES-KOH, 40mM K-acetate, 10mM NH4-acetate, 8mM Mg-acetate, 2mM DTT |
グリッド | 詳細: Quantifoil R2/2 400 mesh copper grids with 4-5 nm thin carbon on top |
凍結 | 凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 120 K / 装置: FEI VITROBOT MARK I / Timed resolved state: 30 second incubation time / 手法: Blot for 2.5 or 3 seconds before plunging |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
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電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 104478 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 4.0 µm / 最小 デフォーカス(公称値): 1.5 µm / 倍率(公称値): 78000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: GATAN LIQUID NITROGEN |
アライメント法 | Legacy - 非点収差: Objective lens astigmatism was corrected at 78,000 times magnification |
詳細 | Complete dataset was collected in 2 non-consecutive days |
日付 | 2014年4月28日 |
撮影 | カテゴリ: CCD フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON II (4k x 4k) 実像数: 2056 / 平均電子線量: 27 e/Å2 |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |