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- PDB-7uin: CryoEM Structure of an Group II Intron Retroelement -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 7uin
タイトルCryoEM Structure of an Group II Intron Retroelement
要素
  • DNA (37-MER)
  • E.r IIC Intron
  • Group II intron reverse transcriptase/maturase
キーワードRNA BINDING PROTEIN/RNA/DNA / RNA / intron / group II / maturase / splicing / retrotransposition / RNA BINDING PROTEIN-RNA-DNA complex
機能・相同性
機能・相同性情報


RNA-directed DNA polymerase / RNA-directed DNA polymerase activity
類似検索 - 分子機能
Group II intron, maturase-specific / Group II intron reverse transcriptase/maturase / Group II intron, maturase-specific domain / : / Reverse transcriptase (RNA-dependent DNA polymerase) / Reverse transcriptase domain / Reverse transcriptase (RT) catalytic domain profile. / DNA/RNA polymerase superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
AMMONIUM ION / DNA / DNA (> 10) / RNA / RNA (> 10) / RNA (> 100) / Group II intron reverse transcriptase/maturase
類似検索 - 構成要素
生物種[Eubacterium] rectale (バクテリア)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.8 Å
データ登録者Chung, K. / Xu, L.
資金援助 米国, 1件
組織認可番号
Howard Hughes Medical Institute (HHMI) 米国
引用ジャーナル: Science / : 2022
タイトル: Structures of a mobile intron retroelement poised to attack its structured DNA target.
著者: Kevin Chung / Ling Xu / Pengxin Chai / Junhui Peng / Swapnil C Devarkar / Anna Marie Pyle /
要旨: Group II introns are ribozymes that catalyze their self-excision and function as retroelements that invade DNA. As retrotransposons, group II introns form ribonucleoprotein (RNP) complexes that roam ...Group II introns are ribozymes that catalyze their self-excision and function as retroelements that invade DNA. As retrotransposons, group II introns form ribonucleoprotein (RNP) complexes that roam the genome, integrating by reversal of forward splicing. Here we show that retrotransposition is achieved by a tertiary complex between a structurally elaborate ribozyme, its protein mobility factor, and a structured DNA substrate. We solved cryo-electron microscopy structures of an intact group IIC intron-maturase retroelement that was poised for integration into a DNA stem-loop motif. By visualizing the RNP before and after DNA targeting, we show that it is primed for attack and fits perfectly with its DNA target. This study reveals design principles of a prototypical retroelement and reinforces the hypothesis that group II introns are ancient elements of genetic diversification.
履歴
登録2022年3月29日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02022年11月23日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年6月12日Group: Data collection / カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
B: E.r IIC Intron
D: Group II intron reverse transcriptase/maturase
A: DNA (37-MER)
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)267,98433
ポリマ-267,2673
非ポリマー71730
43224
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法
タイプ名称対称操作
identity operation1_5551

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要素

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RNA鎖 / タンパク質 / DNA鎖 , 3種, 3分子 BDA

#1: RNA鎖 E.r IIC Intron


分子量: 206779.859 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) [Eubacterium] rectale (バクテリア)
#2: タンパク質 Group II intron reverse transcriptase/maturase / Group II intron-encoded protein ltrA


分子量: 49083.914 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) [Eubacterium] rectale (バクテリア)
遺伝子: ltrA_2, ltrA, ERS852417_00966, FYL37_05080 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A173ZME3, RNA-directed DNA polymerase
#3: DNA鎖 DNA (37-MER)


分子量: 11403.316 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) [Eubacterium] rectale (バクテリア)

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非ポリマー , 3種, 54分子

#4: 化合物...
ChemComp-MG / MAGNESIUM ION / マグネシウムジカチオン


分子量: 24.305 Da / 分子数: 28 / 由来タイプ: 合成 / : Mg / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
#5: 化合物 ChemComp-NH4 / AMMONIUM ION / アンモニウム


分子量: 18.038 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / : H4N / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
#6: 水 ChemComp-HOH / water


分子量: 18.015 Da / 分子数: 24 / 由来タイプ: 天然 / : H2O

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詳細

研究の焦点であるリガンドがあるかY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Ternary complex of RNA, protein and DNA / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#3 / 由来: RECOMBINANT
分子量: 0.260 MDa / 実験値: NO
由来(天然)生物種: [Eubacterium] rectale (バクテリア)
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
緩衝液pH: 7.5
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 297 K

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN
撮影電子線照射量: 50.5 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k)

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解析

EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
2SerialEM画像取得
4cryoSPARC3.1CTF補正
9cryoSPARC3.1初期オイラー角割当
10cryoSPARC3.1最終オイラー角割当
12cryoSPARC3.13次元再構成
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
3次元再構成解像度: 2.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 914099 / 対称性のタイプ: POINT

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbjlvh1.pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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