+データを開く
-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-43705 | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | HIV-1 wild-type intasome core | |||||||||
マップデータ | Primary map | |||||||||
試料 |
| |||||||||
キーワード | HIV-1 / integrase (インテグラーゼ) / nucleoprotein complexes / INSTI / VIRAL PROTEIN (ウイルスタンパク質) | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 DNA integration / viral genome integration into host DNA / establishment of integrated proviral latency / RNA-directed DNA polymerase activity / endonuclease activity / DNA recombination / symbiont entry into host cell / DNA binding / zinc ion binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Human immunodeficiency virus 1 (ヒト免疫不全ウイルス) | |||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å | |||||||||
データ登録者 | Li M / Craigie R | |||||||||
資金援助 | 米国, 1件
| |||||||||
引用 | ジャーナル: J Mol Biol / 年: 2024 タイトル: HIV-1 Integrase Assembles Multiple Species of Stable Synaptic Complex Intasomes That Are Active for Concerted DNA Integration In vitro. 著者: Min Li / Renbin Yang / Xuemin Chen / Huaibin Wang / Rodolfo Ghirlando / Emilios K Dimitriadis / Robert Craigie / 要旨: Retroviral DNA integration is mediated by nucleoprotein complexes (intasomes) in which a pair of viral DNA ends are bridged by a multimer of integrase (IN). Most of the high-resolution structures of ...Retroviral DNA integration is mediated by nucleoprotein complexes (intasomes) in which a pair of viral DNA ends are bridged by a multimer of integrase (IN). Most of the high-resolution structures of HIV-1 intasomes are based on an HIV-1 IN with an Sso7d protein domain fused to the N-terminus. Sso7d-IN aggregates much less than wild-type IN and has been critical for structural studies of HIV-1 intasomes. Unexpectedly, these structures revealed that the common core architecture that mediates catalysis could be assembled in various ways, giving rise to both tetrameric and dodecameric intasomes, together with other less well-characterized species. This differs from related retroviruses that assemble unique multimeric intasomes, although the number of protomers in the intasome varies between viruses. The question of whether the additional Sso7d domain contributes to the heterogeneity of HIV-1 intasomes is therefore raised. We have addressed this by biochemical and structural studies of intasomes assembled with wild-type HIV-1 IN. Negative stain and cryo-EM reveal a similar range of multimeric intasome species as with Sso7d-IN with the same common core architecture. Stacks of intasomes resulting from domain swapping are also seen with both wild-type and Sso7d-IN intasomes. The propensity to assemble multimeric intasome species is, therefore, an intrinsic property of HIV-1 IN and is not conferred by the presence of the Sso7d domain. The recently solved intasome structures of different retroviral species, which have been reported to be tetrameric, octameric, dodecameric, and hexadecameric, highlight how a common intasome core architecture can be assembled in different ways for catalysis. | |||||||||
履歴 |
|
-構造の表示
添付画像 |
---|
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_43705.map.gz | 158.7 MB | EMDBマップデータ形式 | |
---|---|---|---|---|
ヘッダ (付随情報) | emd-43705-v30.xml emd-43705.xml | 21.5 KB 21.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_43705_fsc.xml | 12.7 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_43705.png | 65.1 KB | ||
Filedesc metadata | emd-43705.cif.gz | 6.5 KB | ||
その他 | emd_43705_additional_1.map.gz emd_43705_half_map_1.map.gz emd_43705_half_map_2.map.gz | 159.1 MB 159.5 MB 159.5 MB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-43705 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-43705 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
---|
-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_43705.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 178 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | Primary map | ||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 1.05 Å | ||||||||||||||||||||
密度 |
| ||||||||||||||||||||
対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
|
-添付データ
-追加マップ: #1
ファイル | emd_43705_additional_1.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half1 map
ファイル | emd_43705_half_map_1.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | Half1 map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-ハーフマップ: Half2 map
ファイル | emd_43705_half_map_2.map | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
注釈 | Half2 map | ||||||||||||
投影像・断面図 |
| ||||||||||||
密度ヒストグラム |
-試料の構成要素
-全体 : wild-type HIV-1 intasomes
全体 | 名称: wild-type HIV-1 intasomes |
---|---|
要素 |
|
-超分子 #1: wild-type HIV-1 intasomes
超分子 | 名称: wild-type HIV-1 intasomes / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#3 詳細: HIV-1 intasomes assembled with wild-type NL4-3 integrase |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Human immunodeficiency virus 1 (ヒト免疫不全ウイルス) |
分子量 | 理論値: 400 KDa |
-分子 #1: Integrase
分子 | 名称: Integrase / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 8 / 光学異性体: LEVO |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Human immunodeficiency virus 1 (ヒト免疫不全ウイルス) |
分子量 | 理論値: 32.658252 KDa |
組換発現 | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
配列 | 文字列: GSHMFLDGID KAQEEHEKYH SNWRAMASDF NLPPVVAKEI VASCDKCQLK GEAMHGQVDC SPGIWQLDCT HLEGKVILVA VHVASGYIE AEVIPAETGQ ETAYFLLKLA GRWPVKTVHT DNGSNFTSTT VKAACWWAGI KQEFGIPYNP QSQGVIESMN K ELKKIIGQ ...文字列: GSHMFLDGID KAQEEHEKYH SNWRAMASDF NLPPVVAKEI VASCDKCQLK GEAMHGQVDC SPGIWQLDCT HLEGKVILVA VHVASGYIE AEVIPAETGQ ETAYFLLKLA GRWPVKTVHT DNGSNFTSTT VKAACWWAGI KQEFGIPYNP QSQGVIESMN K ELKKIIGQ VRDQAEHLKT AVQMAVFIHN FKRKGGIGGY SAGERIVDII ATDIQTKELQ KQITKIQNFR VYYRDSRDPV WK GPAKLLW KGEGAVVIQD NSDIKVVPRR KAKIIRDYGK QMAGDDCVAS RQDED UniProtKB: インテグラーゼ |
-分子 #2: vDNA
分子 | 名称: vDNA / タイプ: dna / ID: 2 / コピー数: 2 / 分類: DNA |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Human immunodeficiency virus 1 (ヒト免疫不全ウイルス) |
分子量 | 理論値: 27.371412 KDa |
配列 | 文字列: (DA)(DC)(DT)(DG)(DC)(DT)(DA)(DG)(DA)(DG) (DA)(DT)(DT)(DT)(DT)(DC)(DC)(DA)(DC)(DA) (DC)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT) (DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT) (DT) (DT)(DT)(DT)(DT)(DT) ...文字列: (DA)(DC)(DT)(DG)(DC)(DT)(DA)(DG)(DA)(DG) (DA)(DT)(DT)(DT)(DT)(DC)(DC)(DA)(DC)(DA) (DC)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT) (DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT) (DT) (DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT) (DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT) (DT)(DT) (DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT) (DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT) (DT)(DT)(DT) (DT)(DT)(DT)(DT)(DT)(DT) (DT)(DT)(DT)(DT) |
-分子 #3: vDNA
分子 | 名称: vDNA / タイプ: dna / ID: 3 / コピー数: 2 / 分類: DNA |
---|---|
由来(天然) | 生物種: Human immunodeficiency virus 1 (ヒト免疫不全ウイルス) |
分子量 | 理論値: 8.374477 KDa |
配列 | 文字列: (DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DA)(DG)(DT) (DG)(DT)(DG)(DG)(DA)(DA)(DA)(DA)(DT)(DC) (DT)(DC)(DT)(DA)(DG)(DC)(DA) |
-分子 #4: MAGNESIUM ION
分子 | 名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 4 / コピー数: 4 / 式: MG |
---|---|
分子量 | 理論値: 24.305 Da |
-分子 #5: ZINC ION
分子 | 名称: ZINC ION / タイプ: ligand / ID: 5 / コピー数: 2 / 式: ZN |
---|---|
分子量 | 理論値: 65.409 Da |
-分子 #6: (4R,12aS)-N-(2,4-difluorobenzyl)-7-hydroxy-4-methyl-6,8-dioxo-3,4...
分子 | 名称: (4R,12aS)-N-(2,4-difluorobenzyl)-7-hydroxy-4-methyl-6,8-dioxo-3,4,6,8,12,12a-hexahydro-2H-pyrido[1',2':4,5]pyrazino[2,1-b][1,3]oxazine-9-carboxamide タイプ: ligand / ID: 6 / コピー数: 2 / 式: DLU |
---|---|
分子量 | 理論値: 419.379 Da |
Chemical component information | ChemComp-DLU: |
-実験情報
-構造解析
手法 | クライオ電子顕微鏡法 |
---|---|
解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.4 mg/mL |
---|---|
緩衝液 | pH: 6.2 |
グリッド | モデル: Quantifoil R1.2/1.3 |
凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | FEI TITAN KRIOS |
---|---|
電子線 | 加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | C2レンズ絞り径: 70.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス(公称値): 2.6 µm 最小 デフォーカス(公称値): 1.4000000000000001 µm 倍率(公称値): 105000 |
特殊光学系 | エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER ホルダー冷却材: NITROGEN |
撮影 | フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) 検出モード: SUPER-RESOLUTION / 平均電子線量: 50.0 e/Å2 |
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |