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-基本情報
登録情報 | データベース: EMDB / ID: EMD-4296 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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タイトル | Recombinant human MUC5B mucin N-terminal | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
マップデータ | None | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
試料 |
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生物種 | Homo sapiens (ヒト) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
手法 | 単粒子再構成法 / ネガティブ染色法 / 解像度: 25.5 Å | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
データ登録者 | Trillo-Muoy S / Nilsson HE / Hebert H / Hansson GC | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
資金援助 | スウェーデン, 米国, 16件
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引用 | ジャーナル: J Biol Chem / 年: 2018 タイトル: Granule-stored MUC5B mucins are packed by the non-covalent formation of N-terminal head-to-head tetramers. 著者: Sergio Trillo-Muyo / Harriet E Nilsson / Christian V Recktenwald / Anna Ermund / Caroline Ridley / Lauren N Meiss / Andrea Bähr / Nikolai Klymiuk / Jeffrey J Wine / Philip J B Koeck / David ...著者: Sergio Trillo-Muyo / Harriet E Nilsson / Christian V Recktenwald / Anna Ermund / Caroline Ridley / Lauren N Meiss / Andrea Bähr / Nikolai Klymiuk / Jeffrey J Wine / Philip J B Koeck / David J Thornton / Hans Hebert / Gunnar C Hansson / 要旨: Most MUC5B mucin polymers in the upper airways of humans and pigs are produced by submucosal glands. MUC5B forms N-terminal covalent dimers that are further packed into larger assemblies because of ...Most MUC5B mucin polymers in the upper airways of humans and pigs are produced by submucosal glands. MUC5B forms N-terminal covalent dimers that are further packed into larger assemblies because of low pH and high Ca in the secretory granule of the mucin-producing cell. We purified the recombinant MUC5B N-terminal covalent dimer and used single-particle electron microscopy to study its structure under intracellular conditions. We found that, at intragranular pH, the dimeric MUC5B organized into head-to-head noncovalent tetramers where the von Willebrand D1-D2 domains hooked into each other. These N-terminal tetramers further formed long linear complexes from which, we suggest, the mucin domains and their C termini project radially outwards. Using conventional and video microscopy, we observed that, upon secretion into the submucosal gland ducts, a flow of bicarbonate-rich fluid passes the mucin-secreting cells. We suggest that this unfolds and pulls out the MUC5B assemblies into long linear threads. These further assemble into thicker mucin bundles in the glandular ducts before emerging at the gland duct opening. We conclude that the combination of intracellular packing of the MUC5B mucin and the submucosal gland morphology creates an efficient machine for producing linear mucin bundles. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
ムービー |
ムービービューア |
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構造ビューア | EMマップ: SurfViewMolmilJmol/JSmol |
添付画像 |
-ダウンロードとリンク
-EMDBアーカイブ
マップデータ | emd_4296.map.gz | 3.8 MB | EMDBマップデータ形式 | |
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ヘッダ (付随情報) | emd-4296-v30.xml emd-4296.xml | 15.5 KB 15.5 KB | 表示 表示 | EMDBヘッダ |
FSC (解像度算出) | emd_4296_fsc.xml | 8.1 KB | 表示 | FSCデータファイル |
画像 | emd_4296.png | 39 KB | ||
アーカイブディレクトリ | http://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4296 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/structures/EMD-4296 | HTTPS FTP |
-検証レポート
文書・要旨 | emd_4296_validation.pdf.gz | 222.4 KB | 表示 | EMDB検証レポート |
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文書・詳細版 | emd_4296_full_validation.pdf.gz | 221.6 KB | 表示 | |
XML形式データ | emd_4296_validation.xml.gz | 9.6 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4296 ftp://ftp.pdbj.org/pub/emdb/validation_reports/EMD-4296 | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
EMDBのページ | EMDB (EBI/PDBe) / EMDataResource |
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-マップ
ファイル | ダウンロード / ファイル: emd_4296.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 27 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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注釈 | None | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
ボクセルのサイズ | X=Y=Z: 2.0785 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
密度 |
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対称性 | 空間群: 1 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
詳細 | EMDB XML:
CCP4マップ ヘッダ情報:
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-添付データ
-試料の構成要素
-全体 : MUC5B N-terminal oligomeric state
全体 | 名称: MUC5B N-terminal oligomeric state |
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要素 |
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-超分子 #1: MUC5B N-terminal oligomeric state
超分子 | 名称: MUC5B N-terminal oligomeric state / タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 詳細: The MUC5B N-terminal covalent dimers form non-covalent tetramers at low pH, high Ca2+ in the secretory vesicles of the mucus secreting cells |
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由来(天然) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) / 株: Human / 器官: submucosal gland / 組織: gland |
組換発現 | 生物種: Cricetinae gen. sp. (ネズミ) / 組換株: ovary / 組換細胞: CHO-K1 cells 組換プラスミド: mammalian episomal expression vector pCEP-His |
分子量 | 実験値: 570 KDa |
-実験情報
-構造解析
手法 | ネガティブ染色法 |
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解析 | 単粒子再構成法 |
試料の集合状態 | particle |
-試料調製
濃度 | 0.015 mg/mL |
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緩衝液 | pH: 6.2 / 構成要素 - 濃度: 20.0 mM / 構成要素 - 式: C6H13NO4S / 構成要素 - 名称: MES |
染色 | タイプ: NEGATIVE / 材質: Uranyl acetate / 詳細: 2% (w/v) uranyl acetate |
グリッド | 材質: COPPER / メッシュ: 400 / 支持フィルム - 材質: CARBON / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 雰囲気: AIR / 前処理 - 気圧: 0.005 kPa |
詳細 | Sample was incubated at room temperature overnight and then fixed in 0.6% glutaraldehyde for 4 min Before the negtive stain procedure |
-電子顕微鏡法
顕微鏡 | JEOL 2100F |
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撮影 | フィルム・検出器のモデル: TVIPS TEMCAM-F415 (4k x 4k) デジタル化 - サイズ - 横: 4096 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4096 pixel / デジタル化 - サンプリング間隔: 15.0 µm / 撮影したグリッド数: 3 / 実像数: 95 / 平均露光時間: 0.5 sec. / 平均電子線量: 15.0 e/Å2 |
電子線 | 加速電圧: 200 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN |
電子光学系 | 倍率(補正後): 72165 / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELD / Cs: 2.0 mm / 倍率(公称値): 50000 |
試料ステージ | 試料ホルダーモデル: JEOL |