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- EMDB-41856: Cryo-EM structure of E. coli NarL-transcription activation comple... -

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基本情報

登録情報
データベース: EMDB / ID: EMD-41856
タイトルCryo-EM structure of E. coli NarL-transcription activation complex at 3.2A
マップデータE coli NarL-TAC unsharpened map
試料
  • 複合体: E. coli NarL transcription activation complex on the yeaR promoter
    • タンパク質・ペプチド: x 6種
    • DNA: x 2種
    • RNA: x 1種
  • リガンド: x 2種
キーワードtranscription (転写 (生物学)) / RNA polymerase (RNAポリメラーゼ) / transcription activation / NarL / nitrate-responsive regulator / transcription-DNA complex
機能・相同性
機能・相同性情報


sigma factor antagonist complex / DNA-binding transcription repressor activity / RNA polymerase complex / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / bacterial-type flagellum assembly / sigma factor activity / phosphorelay signal transduction system ...sigma factor antagonist complex / DNA-binding transcription repressor activity / RNA polymerase complex / submerged biofilm formation / cellular response to cell envelope stress / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / regulation of DNA-templated transcription initiation / bacterial-type flagellum assembly / sigma factor activity / phosphorelay signal transduction system / bacterial-type flagellum-dependent cell motility / nitrate assimilation / transcription elongation factor complex / regulation of DNA-templated transcription elongation / transcription antitermination / 運動性 / デオキシリボ核酸 / DNA-templated transcription initiation / ribonucleoside binding / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / ポリメラーゼ / response to heat / protein-containing complex assembly / intracellular iron ion homeostasis / protein dimerization activity / transcription cis-regulatory region binding / response to antibiotic / negative regulation of DNA-templated transcription / regulation of DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / ATP binding / 生体膜 / identical protein binding / 細胞質基質 / 細胞質
類似検索 - 分子機能
LuxR-type HTH domain signature. / LuxR-type HTH domain profile. / Transcription regulator LuxR, C-terminal / Bacterial regulatory proteins, luxR family / helix_turn_helix, Lux Regulon / Transcriptional regulatory protein WalR-like / RNA polymerase sigma factor 70, non-essential domain / Sigma-70, non-essential region / RNA polymerase sigma factor 70, region 1.1 / Sigma-70 factor, region 1.1 superfamily ...LuxR-type HTH domain signature. / LuxR-type HTH domain profile. / Transcription regulator LuxR, C-terminal / Bacterial regulatory proteins, luxR family / helix_turn_helix, Lux Regulon / Transcriptional regulatory protein WalR-like / RNA polymerase sigma factor 70, non-essential domain / Sigma-70, non-essential region / RNA polymerase sigma factor 70, region 1.1 / Sigma-70 factor, region 1.1 superfamily / Sigma-70 factor, region 1.1 / Signal transduction response regulator, C-terminal effector / Sigma-70 factors family signature 1. / RNA polymerase sigma factor RpoD, C-terminal / RNA polymerase sigma factor RpoD / RNA polymerase sigma-70 region 1.2 / Sigma-70 factor, region 1.2 / RNA polymerase sigma-70 region 3 / Sigma-70 region 3 / Sigma-70 factors family signature 2. / RNA polymerase sigma-70 / RNA polymerase sigma-70 region 4 / Sigma-70, region 4 / RNA polymerase sigma-70 region 2 / RNA polymerase sigma-70 like domain / Sigma-70 region 2 / RNA polymerase sigma factor, region 2 / RNA polymerase sigma factor, region 3/4-like / Response regulator receiver domain / cheY-homologous receiver domain / Signal transduction response regulator, receiver domain / Response regulatory domain profile. / CheY-like superfamily / DNA-directed RNA polymerase, omega subunit / DNA-directed RNA polymerase, subunit beta-prime, bacterial type / DNA-directed RNA polymerase, beta subunit, external 1 domain superfamily / DNA-directed RNA polymerase, beta subunit, external 1 domain / RNA polymerase beta subunit external 1 domain / RNA polymerase, alpha subunit, C-terminal / Bacterial RNA polymerase, alpha chain C terminal domain / DNA-directed RNA polymerase, alpha subunit / DNA-directed RNA polymerase beta subunit, bacterial-type / RNA polymerase Rpb6 / RNA polymerase, subunit omega/Rpo6/RPB6 / RNA polymerase Rpb6 / RNA polymerase Rpb1, domain 3 superfamily / RNA polymerase Rpb1, clamp domain superfamily / RPB6/omega subunit-like superfamily / DNA-directed RNA polymerase, subunit beta-prime / RNA polymerase Rpb1, domain 3 / RNA polymerase Rpb1, domain 3 / RNA polymerase Rpb2, domain 2 superfamily / RNA polymerase Rpb1, domain 1 / RNA polymerase Rpb1, domain 1 / RNA polymerase, alpha subunit / RNA polymerase Rpb1, domain 4 / RNA polymerase Rpb1, domain 2 / RNA polymerase Rpb1, domain 4 / RNA polymerase, N-terminal / RNA polymerase Rpb1, funnel domain superfamily / RNA polymerase I subunit A N-terminus / RNA polymerase Rpb1, domain 5 / RNA polymerase Rpb1, domain 5 / RNA polymerase, beta subunit, protrusion / RNA polymerase beta subunit / DNA-directed RNA polymerase, insert domain / DNA-directed RNA polymerase, RpoA/D/Rpb3-type / RNA polymerase Rpb3/RpoA insert domain / RNA polymerase Rpb3/Rpb11 dimerisation domain / RNA polymerases D / DNA-directed RNA polymerase, insert domain superfamily / RNA polymerase, RBP11-like subunit / RNA polymerase Rpb2, domain 2 / RNA polymerase Rpb2, domain 2 / RNA polymerase, beta subunit, conserved site / RNA polymerase Rpb2, domain 7 / RNA polymerase Rpb2, domain 3 / RNA polymerase Rpb2, OB-fold / RNA polymerase Rpb2, domain 7 / RNA polymerase Rpb2, domain 3 / RNA polymerases beta chain signature. / DNA-directed RNA polymerase, subunit 2, hybrid-binding domain / DNA-directed RNA polymerase, subunit 2 / DNA-directed RNA polymerase, subunit 2, hybrid-binding domain superfamily / RNA polymerase Rpb2, domain 6 / Winged helix-like DNA-binding domain superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
RNA polymerase sigma factor RpoD / DNA-directed RNA polymerase subunit alpha / DNA-directed RNA polymerase subunit omega / DNA-directed RNA polymerase subunit beta' / DNA-directed RNA polymerase subunit beta / Nitrate/nitrite response regulator protein NarL
類似検索 - 構成要素
生物種Escherichia coli (大腸菌)
手法単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.23 Å
データ登録者Liu B / Kompaniiets D / Wang D
資金援助1件
OrganizationGrant number国
Not funded
引用ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2024
タイトル: Structural basis for transcription activation by the nitrate-responsive regulator NarL.
著者: Dmytro Kompaniiets / Lina He / Dong Wang / Wei Zhou / Yang Yang / Yangbo Hu / Bin Liu /
要旨: Transcription activation is a crucial step of regulation during transcription initiation and a classic check point in response to different stimuli and stress factors. The Escherichia coli NarL is a ...Transcription activation is a crucial step of regulation during transcription initiation and a classic check point in response to different stimuli and stress factors. The Escherichia coli NarL is a nitrate-responsive global transcription factor that controls the expression of nearly 100 genes. However, the molecular mechanism of NarL-mediated transcription activation is not well defined. Here we present a cryo-EM structure of NarL-dependent transcription activation complex (TAC) assembled on the yeaR promoter at 3.2 Å resolution. Our structure shows that the NarL dimer binds at the -43.5 site of the promoter DNA with its C-terminal domain (CTD) not only binding to the DNA but also making interactions with RNA polymerase subunit alpha CTD (αCTD). The key role of these NarL-mediated interactions in transcription activation was further confirmed by in vivo and in vitro transcription assays. Additionally, the NarL dimer binds DNA in a different plane from that observed in the structure of class II TACs. Unlike the canonical class II activation mechanism, NarL does not interact with σ4, while RNAP αCTD is bound to DNA on the opposite side of NarL. Our findings provide a structural basis for detailed mechanistic understanding of NarL-dependent transcription activation on yeaR promoter and reveal a potentially novel mechanism of transcription activation.
履歴
登録2023年9月7日-
ヘッダ(付随情報) 公開2024年1月17日-
マップ公開2024年1月17日-
更新2024年2月21日-
現状2024年2月21日処理サイト: RCSB / 状態: 公開

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構造の表示

添付画像

emd_41856.png

ダウンロードとリンク

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マップ

ファイルダウンロード / ファイル: emd_41856.map.gz / 形式: CCP4 / 大きさ: 216 MB / タイプ: IMAGE STORED AS FLOATING POINT NUMBER (4 BYTES)
注釈E coli NarL-TAC unsharpened map
ボクセルのサイズX=Y=Z: 0.88533 Å
密度
表面レベル登録者による: 0.08
最小 - 最大-0.35114324 - 0.7116764
平均 (標準偏差)0.0013024393 (±0.020329671)
対称性空間群: 1
詳細

EMDB XML:

マップ形状
Axis orderXYZ
Origin000
サイズ384384384
Spacing384384384
セルA=B=C: 339.968 Å
α=β=γ: 90.0 °

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添付データ

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追加マップ: E coli NarL-TAC sharpened map

ファイルemd_41856_additional_1.map
注釈E coli NarL-TAC sharpened map
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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追加マップ: Local refinement map on the NarL-DNA region

ファイルemd_41856_additional_2.map
注釈Local refinement map on the NarL-DNA region
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: E coli NarL-TAC half map A

ファイルemd_41856_half_map_1.map
注釈E coli NarL-TAC half map A
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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ハーフマップ: E coli NarL-TAC half map B

ファイルemd_41856_half_map_2.map
注釈E coli NarL-TAC half map B
投影像・断面図
軸ZYX

投影像

断面 (1/2)
密度ヒストグラム

ヒストグラム

ヒストグラム (対数)

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試料の構成要素

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全体 : E. coli NarL transcription activation complex on the yeaR promoter

全体名称: E. coli NarL transcription activation complex on the yeaR promoter
要素
  • 複合体: E. coli NarL transcription activation complex on the yeaR promoter
    • タンパク質・ペプチド: DNA-directed RNA polymerase subunit alphaポリメラーゼ
    • タンパク質・ペプチド: DNA-directed RNA polymerase subunit betaポリメラーゼ
    • タンパク質・ペプチド: DNA-directed RNA polymerase subunit beta'ポリメラーゼ
    • タンパク質・ペプチド: DNA-directed RNA polymerase subunit omegaポリメラーゼ
    • タンパク質・ペプチド: RNA polymerase sigma factor RpoD
    • タンパク質・ペプチド: Nitrate/nitrite response regulator protein NarL
    • DNA: DNA (69-MER)
    • DNA: DNA (69-MER)
    • RNA: RNA (5'-D(*(GTP))-R(P*AP*A)-3')
  • リガンド: ZINC ION
  • リガンド: MAGNESIUM ION

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超分子 #1: E. coli NarL transcription activation complex on the yeaR promoter

超分子名称: E. coli NarL transcription activation complex on the yeaR promoter
タイプ: complex / ID: 1 / 親要素: 0 / 含まれる分子: #1-#9
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 625 KDa

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分子 #1: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha

分子名称: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha / タイプ: protein_or_peptide / ID: 1 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ポリメラーゼ
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 36.55868 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MQGSVTEFLK PRLVDIEQVS STHAKVTLEP LERGFGHTLG NALRRILLSS MPGCAVTEVE IDGVLHEYST KEGVQEDILE ILLNLKGLA VRVQGKDEVI LTLNKSGIGP VTAADITHDG DVEIVKPQHV ICHLTDENAS ISMRIKVQRG RGYVPASTRI H SEEDERPI ...文字列:
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UniProtKB: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha

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分子 #2: DNA-directed RNA polymerase subunit beta

分子名称: DNA-directed RNA polymerase subunit beta / タイプ: protein_or_peptide / ID: 2 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ポリメラーゼ
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 150.820875 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MVYSYTEKKR IRKDFGKRPQ VLDVPYLLSI QLDSFQKFIE QDPEGQYGLE AAFRSVFPIQ SYSGNSELQY VSYRLGEPVF DVQECQIRG VTYSAPLRVK LRLVIYEREA PEGTVKDIKE QEVYMGEIPL MTDNGTFVIN GTERVIVSQL HRSPGVFFDS D KGKTHSSG ...文字列:
MVYSYTEKKR IRKDFGKRPQ VLDVPYLLSI QLDSFQKFIE QDPEGQYGLE AAFRSVFPIQ SYSGNSELQY VSYRLGEPVF DVQECQIRG VTYSAPLRVK LRLVIYEREA PEGTVKDIKE QEVYMGEIPL MTDNGTFVIN GTERVIVSQL HRSPGVFFDS D KGKTHSSG KVLYNARIIP YRGSWLDFEF DPKDNLFVRI DRRRKLPATI ILRALNYTTE QILDLFFEKV IFEIRDNKLQ ME LVPERLR GETASFDIEA NGKVYVEKGR RITARHIRQL EKDDVKLIEV PVEYIAGKVV AKDYIDESTG ELICAANMEL SLD LLAKLS QSGHKRIETL FTNDLDHGPY ISETLRVDPT NDRLSALVEI YRMMRPGEPP TREAAESLFE NLFFSEDRYD LSAV GRMKF NRSLLREEIE GSGILSKDDI IDVMKKLIDI RNGKGEVDDI DHLGNRRIRS VGEMAENQFR VGLVRVERAV KERLS LGDL DTLMPQDMIN AKPISAAVKE FFGSSQLSQF MDQNNPLSEI THKRRISALG PGGLTRERAG FEVRDVHPTH YGRVCP IET PEGPNIGLIN SLSVYAQTNE YGFLETPYRK VTDGVVTDEI HYLSAIEEGN YVIAQANSNL DEEGHFVEDL VTCRSKG ES SLFSRDQVDY MDVSTQQVVS VGASLIPFLE HDDANRALMG ANMQRQAVPT LRADKPLVGT GMERAVAVDS GVTAVAKR G GVVQYVDASR IVIKVNEDEM YPGEAGIDIY NLTKYTRSNQ NTCINQMPCV SLGEPVERGD VLADGPSTDL GELALGQNM RVAFMPWNGY NFEDSILVSE RVVQEDRFTT IHIQELACVS RDTKLGPEEI TADIPNVGEA ALSKLDESGI VYIGAEVTGG DILVGKVTP KGETQLTPEE KLLRAIFGEK ASDVKDSSLR VPNGVSGTVI DVQVFTRDGV EKDKRALEIE EMQLKQAKKD L SEELQILE AGLFSRIRAV LVAGGVEAEK LDKLPRDRWL ELGLTDEEKQ NQLEQLAEQY DELKHEFEKK LEAKRRKITQ GD DLAPGVL KIVKVYLAVK RRIQPGDKMA GRHGNKGVIS KINPIEDMPY DENGTPVDIV LNPLGVPSRM NIGQILETHL GMA AKGIGD KINAMLKQQQ EVAKLREFIQ RAYDLGADVR QKVDLSTFSD EEVMRLAENL RKGMPIATPV FDGAKEAEIK ELLK LGDLP TSGQIRLYDG RTGEQFERPV TVGYMYMLKL NHLVDDKMHA RSTGSYSLVT QQPLGGKAQF GGQRFGEMEV WALEA YGAA YTLQEMLTVK SDDVNGRTKM YKNIVDGNHQ MEPGMPESFN VLLKEIRSLG INIELEDE

UniProtKB: DNA-directed RNA polymerase subunit beta

+
分子 #3: DNA-directed RNA polymerase subunit beta'

分子名称: DNA-directed RNA polymerase subunit beta' / タイプ: protein_or_peptide / ID: 3 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ポリメラーゼ
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 155.366781 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MKDLLKFLKA QTKTEEFDAI KIALASPDMI RSWSFGEVKK PETINYRTFK PERDGLFCAR IFGPVKDYEC LCGKYKRLKH RGVICEKCG VEVTQTKVRR ERMGHIELAS PTAHIWFLKS LPSRIGLLLD MPLRDIERVL YFESYVVIEG GMTNLERQQI L TEEQYLDA ...文字列:
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UniProtKB: DNA-directed RNA polymerase subunit beta'

+
分子 #4: DNA-directed RNA polymerase subunit omega

分子名称: DNA-directed RNA polymerase subunit omega / タイプ: protein_or_peptide / ID: 4 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO / EC番号: ポリメラーゼ
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 10.249547 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
MARVTVQDAV EKIGNRFDLV LVAARRARQM QVGGKDPLVP EENDKTTVIA LREIEEGLIN NQILDVRERQ EQQEQEAAEL QAVTAIAEG RR

UniProtKB: DNA-directed RNA polymerase subunit omega

+
分子 #5: RNA polymerase sigma factor RpoD

分子名称: RNA polymerase sigma factor RpoD / タイプ: protein_or_peptide / ID: 5 / コピー数: 1 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 72.206266 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列: MRGSHHHHHH TDQFTMEQNP QSQLKLLVTR GKEQGYLTYA EVNDHLPEDI VDSDQIEDII QMINDMGIQV MEEAPDADDL MLAENTADE DAAEAAAQVL SSVESEIGRT TDPVRMYMRE MGTVELLTRE GEIDIAKRIE DGINQVQCSV AEYPEAITYL L EQYDRVEA ...文字列:
MRGSHHHHHH TDQFTMEQNP QSQLKLLVTR GKEQGYLTYA EVNDHLPEDI VDSDQIEDII QMINDMGIQV MEEAPDADDL MLAENTADE DAAEAAAQVL SSVESEIGRT TDPVRMYMRE MGTVELLTRE GEIDIAKRIE DGINQVQCSV AEYPEAITYL L EQYDRVEA EEARLSDLIT GFVDPNAEED LAPTATHVGS ELSQEDLDDD EDEDEEDGDD DSADDDNSID PELAREKFAE LR AQYVVTR DTIKAKGRSH ATAQEEILKL SEVFKQFRLV PKQFDYLVNS MRVMMDRVRT QERLIMKLCV EQCKMPKKNF ITL FTGNET SDTWFNAAIA MNKPWSEKLH DVSEEVHRAL QKLQQIEEET GLTIEQVKDI NRRMSIGEAK ARRAKKEMVE ANLR LVISI AKKYTNRGLQ FLDLIQEGNI GLMKAVDKFE YRRGYKFSTY ATWWIRQAIT RSIADQARTI RIPVHMIETI NKLNR ISRQ MLQEMGREPT PEELAERMLM PEDKIRKVLK IAKEPISMET PIGDDEDSHL GDFIEDTTLE LPLDSATTES LRAATH DVL AGLTAREAKV LRMRFGIDMN TDYTLEEVGK QFDVTRERIR QIEAKALRKL RHPSRSEVLR SFLDD

UniProtKB: RNA polymerase sigma factor RpoD

+
分子 #6: Nitrate/nitrite response regulator protein NarL

分子名称: Nitrate/nitrite response regulator protein NarL / タイプ: protein_or_peptide / ID: 6 / コピー数: 2 / 光学異性体: LEVO
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 8.903552 KDa
組換発現生物種: Escherichia coli (大腸菌)
配列文字列:
RDVNQLTPRE RDILKLIAQG LPNKMIARRL DITESTVKVH VKHMLKKMKL KSRVEAAVWV HQERIFLEHH HHHH

UniProtKB: Nitrate/nitrite response regulator protein NarL

+
分子 #7: DNA (69-MER)

分子名称: DNA (69-MER) / タイプ: dna / ID: 7 / コピー数: 1 / 分類: DNA
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 21.307693 KDa
配列文字列: (DA)(DG)(DT)(DA)(DA)(DC)(DC)(DA)(DA)(DT) (DA)(DA)(DA)(DT)(DG)(DG)(DT)(DA)(DT)(DT) (DT)(DA)(DA)(DA)(DA)(DT)(DG)(DC)(DA) (DA)(DA)(DT)(DT)(DA)(DT)(DC)(DA)(DG)(DG) (DC) (DG)(DT)(DA)(DC)(DC) ...文字列:
(DA)(DG)(DT)(DA)(DA)(DC)(DC)(DA)(DA)(DT) (DA)(DA)(DA)(DT)(DG)(DG)(DT)(DA)(DT)(DT) (DT)(DA)(DA)(DA)(DA)(DT)(DG)(DC)(DA) (DA)(DA)(DT)(DT)(DA)(DT)(DC)(DA)(DG)(DG) (DC) (DG)(DT)(DA)(DC)(DC)(DC)(DT)(DC) (DT)(DT)(DT)(DG)(DC)(DG)(DA)(DA)(DT)(DT) (DC)(DG) (DC)(DG)(DG)(DC)(DA)(DG)(DC) (DG)(DG)

+
分子 #8: DNA (69-MER)

分子名称: DNA (69-MER) / タイプ: dna / ID: 8 / コピー数: 1 / 分類: DNA
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 21.164541 KDa
配列文字列: (DC)(DC)(DG)(DC)(DT)(DG)(DC)(DC)(DG)(DC) (DG)(DA)(DA)(DT)(DT)(DC)(DC)(DG)(DT)(DT) (DT)(DC)(DA)(DG)(DG)(DG)(DT)(DA)(DC) (DG)(DC)(DC)(DT)(DG)(DA)(DT)(DA)(DA)(DT) (DT) (DT)(DG)(DC)(DA)(DT) ...文字列:
(DC)(DC)(DG)(DC)(DT)(DG)(DC)(DC)(DG)(DC) (DG)(DA)(DA)(DT)(DT)(DC)(DC)(DG)(DT)(DT) (DT)(DC)(DA)(DG)(DG)(DG)(DT)(DA)(DC) (DG)(DC)(DC)(DT)(DG)(DA)(DT)(DA)(DA)(DT) (DT) (DT)(DG)(DC)(DA)(DT)(DT)(DT)(DT) (DA)(DA)(DA)(DT)(DA)(DC)(DC)(DA)(DT)(DT) (DT)(DA) (DT)(DT)(DG)(DG)(DT)(DT)(DA) (DC)(DT)

+
分子 #9: RNA (5'-D(*(GTP))-R(P*AP*A)-3')

分子名称: RNA (5'-D(*(GTP))-R(P*AP*A)-3') / タイプ: rna / ID: 9 / コピー数: 1
由来(天然)生物種: Escherichia coli (大腸菌)
分子量理論値: 1.118619 KDa
配列文字列:
(GTP)AA

+
分子 #10: ZINC ION

分子名称: ZINC ION / タイプ: ligand / ID: 10 / コピー数: 2 / 式: ZN
分子量理論値: 65.409 Da

+
分子 #11: MAGNESIUM ION

分子名称: MAGNESIUM ION / タイプ: ligand / ID: 11 / コピー数: 1 / 式: MG
分子量理論値: 24.305 Da

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実験情報

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構造解析

手法クライオ電子顕微鏡法
解析単粒子再構成法
試料の集合状態particle

-
試料調製

濃度15 mg/mL
緩衝液pH: 8
グリッドモデル: Quantifoil R1.2/1.3 / 材質: COPPER / メッシュ: 300 / 前処理 - タイプ: GLOW DISCHARGE / 前処理 - 時間: 60 sec. / 前処理 - 雰囲気: AIR
凍結凍結剤: ETHANE / チャンバー内湿度: 100 % / チャンバー内温度: 290 K / 装置: FEI VITROBOT MARK IV

-
電子顕微鏡法

顕微鏡FEI TITAN KRIOS
電子線加速電圧: 300 kV / 電子線源: FIELD EMISSION GUN
電子光学系C2レンズ絞り径: 50.0 µm / 照射モード: FLOOD BEAM / 撮影モード: BRIGHT FIELDBright-field microscopy / Cs: 2.7 mm / 最大 デフォーカス（公称値）: 2.0 µm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1.0 µm / 倍率（公称値）: 130000
特殊光学系エネルギーフィルター - 名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルター - スリット幅: 20 eV
試料ステージ試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
ホルダー冷却材: NITROGEN
温度最低: 77.0 K
撮影フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
デジタル化 - サイズ - 横: 5769 pixel / デジタル化 - サイズ - 縦: 4092 pixel / 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 8727 / 平均露光時間: 2.0 sec. / 平均電子線量: 42.0 e/Å2
実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company

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画像解析

粒子像選択選択した数: 2554259
初期モデルモデルのタイプ: NONE
初期 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC
最終 角度割当タイプ: MAXIMUM LIKELIHOOD / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC
最終 再構成想定した対称性 - 点群: C1 (非対称) / アルゴリズム: SIMULTANEOUS ITERATIVE (SIRT) / 解像度のタイプ: BY AUTHOR / 解像度: 3.23 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / ソフトウェア - 名称: cryoSPARC / 使用した粒子像数: 104500
FSC曲線 (解像度の算出)

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原子モデル構築 1

精密化空間: REAL / プロトコル: OTHER
得られたモデル

PDB-8u3b:
Cryo-EM structure of E. coli NarL-transcription activation complex at 3.2A

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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