+
データを開く
-
基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 9p6h | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Structure of P. gingivalis PorK and PorN complexes from cryo electron microscopy | |||||||||
![]() |
| |||||||||
![]() | TRANSPORT PROTEIN / T9SS / porphyromonas gingivalis | |||||||||
機能・相同性 | ![]() | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.75 Å | |||||||||
![]() | Hanssen, E. / Morton, C. / Gorasia, D.G. / Veith, P.D. / Reynolds, E.C. | |||||||||
資金援助 | ![]()
| |||||||||
![]() | ![]() タイトル: Insights into type IX secretion from PorKN cogwheel structure bound to PorG and attachment complexes. 著者: Dhana G Gorasia / Eric Hanssen / Manasi Mudaliyar / Craig J Morton / Sepideh Valimehr / Christine Seers / Lianyi Zhang / Matthew T Doyle / Debnath Ghosal / Paul D Veith / Eric C Reynolds / ![]() 要旨: The Type IX Secretion System exports proteins across the outer membrane (OM) of bacteria in the Bacteroidota phylum, however, the mechanistic details remain unknown. In Porphyromonas gingivalis the ...The Type IX Secretion System exports proteins across the outer membrane (OM) of bacteria in the Bacteroidota phylum, however, the mechanistic details remain unknown. In Porphyromonas gingivalis the core components of the multi-protein complex are the Sov translocon, Attachment Complexes (PorQ, U, V, Z), PorLM molecular motors and PorKN rings. Here, we present a ~ 3.5 Å cryo-EM structure of the periplasmic rings comprising 32-33 subunits each of PorK and PorN. Additionally, we show the presence of a critical disulfide bond between PorK and the OM protein PorG that is essential for protein secretion and demonstrate that the Attachment Complexes bind to, and are localized above, the PorKN rings. Overall, each ring resembles a cogwheel with PorN forming cog-like projections that we propose engage with the PorLM motor to drive the rotation of the PorKN cogwheel together with PorG and associated Attachment Complexes, thus providing the energy to complete protein secretion and the coordinated cell surface attachment of the secreted cargo. #1: ![]() タイトル: Near-atomic structure of the PorKN rings, disulfide bonded to PorG and bound to Attachment Complexes, provide mechanistic insights into the type IX secretion system 著者: Gorasia, D. / Hanssen, E. / Mudaliyar, M. / Morton, C. / Valimehr, S. / Seers, C. / Zhang, L. / Ghosal, D. / Veith, P. / Reynolds, E. | |||||||||
履歴 |
|
-
構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
---|
-
ダウンロードとリンク
-
ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 149.4 KB | 表示 | ![]() |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | ![]() | 111.5 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.3 MB | 表示 | ![]() |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | ![]() | 1.3 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 35.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 51.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-
リンク
-
集合体
登録構造単位 | ![]()
|
---|---|
1 |
|
-
要素
-タンパク質 , 2種, 2分子 AB
#1: タンパク質 | 分子量: 30080.869 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 株: W83 / 参照: UniProt: Q7MXB4 |
---|---|
#2: タンパク質 | 分子量: 51184.895 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) ![]() 株: W83 / 参照: UniProt: Q7MXB7 |
-糖 , 3種, 5分子 
#3: 多糖 | タイプ: oligosaccharide / 分子量: 1217.088 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 天然 #4: 多糖 | beta-D-glucopyranose-(1-4)-alpha-D-glucopyranuronic acid-(1-2)-[alpha-L-rhamnopyranose-(1-4)]alpha- ...beta-D-glucopyranose-(1-4)-alpha-D-glucopyranuronic acid-(1-2)-[alpha-L-rhamnopyranose-(1-4)]alpha-D-mannopyranose | タイプ: oligosaccharide / 分子量: 664.561 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 #5: 糖 | |
---|
-非ポリマー , 1種, 1分子 
#6: 化合物 | ChemComp-CA / |
---|
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
---|---|
Has protein modification | Y |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-
試料調製
構成要素 | 名称: PorK/N protein complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#2 / 由来: NATURAL | |||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
分子量 | 値: 3.5 MDa / 実験値: NO | |||||||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: ![]() | |||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 7.5 | |||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
| |||||||||||||||||||||||||
試料 | 濃度: 1.2 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | |||||||||||||||||||||||||
試料支持 | 詳細: 15mA / グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | |||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % / 凍結前の試料温度: 295 K / 詳細: Blot forace -1 blot time 3sec sample size 4ul |
-
電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 64000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 1600 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 600 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 5.34 sec. / 電子線照射量: 54 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 8909 |
電子光学装置 | エネルギーフィルター名称: GIF Bioquantum / エネルギーフィルタースリット幅: 10 eV |
-
解析
EMソフトウェア |
| ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 556522 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.75 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 69982 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 9MYJ Accession code: 9MYJ / Source name: PDB / タイプ: experimental model | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
精密化 | 最高解像度: 2.75 Å 立体化学のターゲット値: REAL-SPACE (WEIGHTED MAP SUM AT ATOM CENTERS) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
|