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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 9nnh | ||||||||||||||||||||||||
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| タイトル | Cryo-EM structure of the Retron Ec78 complex, PtuA:PtuB:RT (4:2:2) | ||||||||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | DNA-RNA HYBRID / Retron / ncRNA / msDNA | ||||||||||||||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報DNA synthesis involved in DNA repair / RNA-directed DNA polymerase / RNA-directed DNA polymerase activity / double-strand break repair / endonuclease activity / defense response to virus / ATP hydrolysis activity / RNA binding / ATP binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||||||||
| 生物種 | ![]() | ||||||||||||||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.69 Å | ||||||||||||||||||||||||
データ登録者 | Wang, B. / Li, H. | ||||||||||||||||||||||||
| 資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Struct Mol Biol / 年: 2025タイトル: Structural basis for retron co-option of anti-phage ATPase-nuclease. 著者: Bing Wang / Renee D Hoffman / Ya-Ming Hou / Hong Li / ![]() 要旨: Retrons have been recently identified as bacterial defense systems that employ a tripartite of reverse transcriptase, non-coding RNA (ncRNA) and its derived multi-copy single stranded DNA (msDNA) to ...Retrons have been recently identified as bacterial defense systems that employ a tripartite of reverse transcriptase, non-coding RNA (ncRNA) and its derived multi-copy single stranded DNA (msDNA) to sequester effector activity. Phage invasion activates retrons, triggering effector activity and inducing abortive infection and cell growth arrest. Ec78 differs from other retrons by leveraging the Septu defense system, a stand-alone ATPase-nuclease pair (PtuAB), by reshaping the phage sensing and molecular assembly processes of PtuAB. To elucidate how Ec78 hijacks PtuAB, we determined electron cryomicroscopy structures of Ec78 as well as the retron-displaced PtuAB. We show that the Ec78-associated ATPase, PtuA, acquired unique elements that enable its interactions with the reverse transcriptase and the msDNA, and self-assembly when displaced by the retron. By biochemical and mutational analyses, we also show that the retron-displaced PtuAB forms a tetramer, unlike its stand-alone counterpart, that restricts the host. However, in the presence of the retron, the retron-displaced PtuAB confers a well-controlled immune response, eliciting ATP hydrolysis- and msDNA-regulated targeting to host factors. Our studies reveal an evolutionary principle for retrons to co-opt conserved enzyme modules for defense in response to different cellular needs. | ||||||||||||||||||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 9nnh.cif.gz | 889.1 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb9nnh.ent.gz | 590.1 KB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 9nnh.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/nn/9nnh ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/nn/9nnh | HTTPS FTP |
|---|
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 49575MC ![]() 9nnbC ![]() 9nnkC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
|---|---|
| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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|---|---|
| 1 |
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要素
-Retron I-A effector ... , 2種, 6分子 CDEFJK
| #1: タンパク質 | 分子量: 62467.766 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() #2: タンパク質 | 分子量: 26879.172 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() |
|---|
-タンパク質 / DNA鎖 / RNA鎖 / 非ポリマー , 4種, 9分子 BANMLX

| #3: タンパク質 | 分子量: 35538.195 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() #4: DNA鎖 | 分子量: 24120.449 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() #5: RNA鎖 | 分子量: 21425.598 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) ![]() #6: 化合物 | |
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-詳細
| 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
|---|---|
| Has protein modification | Y |
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 | 名称: Retron Ec78 complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#5 / 由来: RECOMBINANT |
|---|---|
| 分子量 | 実験値: NO |
| 由来(天然) | 生物種: ![]() |
| 由来(組換発現) | 生物種: ![]() |
| 緩衝液 | pH: 7.5 |
| 試料 | 濃度: 3 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
| 急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 281 K |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: OTHER / 最大 デフォーカス(公称値): 1700 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm |
| 撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOCONTINUUM (6k x 4k) |
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解析
| EMソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.21.2_5419 / カテゴリ: モデル精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 2.69 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 301183 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
| 原子モデル構築 | プロトコル: AB INITIO MODEL | ||||||||||||||||||||||||
| 精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | ||||||||||||||||||||||||
| 原子変位パラメータ | Biso mean: 48.51 Å2 | ||||||||||||||||||||||||
| 拘束条件 |
|
ムービー
コントローラー
万見について






米国, 1件
引用




PDBj

































































FIELD EMISSION GUN