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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 9ngi | |||||||||
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タイトル | ELIC5 with propylamine facing ECD inwards in liposomes with 2:1:1 POPC:POPE:POPG | |||||||||
![]() | Erwinia chrysanthemi ligand-gated ion channel | |||||||||
![]() | MEMBRANE PROTEIN / ELIC / ion channel / pLGIC / Structural Protein / TRANSPORT PROTEIN | |||||||||
機能・相同性 | ![]() extracellular ligand-gated monoatomic ion channel activity / transmembrane signaling receptor activity / identical protein binding / membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | ![]() | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.3 Å | |||||||||
![]() | Dalal, V. / Cheng, W.W.L. | |||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Cryo-EM structures of a pentameric ligand-gated ion channel in liposomes. 著者: Vikram Dalal / Brandon K Tan / Hanrui Xu / Wayland W L Cheng / ![]() 要旨: Detergents and lipid nanodiscs affect the cryo-EM structures of pentameric ligand-gated ion channels (pLGICs) including ELIC. To determine the structure of a pLGIC in a membrane environment that ...Detergents and lipid nanodiscs affect the cryo-EM structures of pentameric ligand-gated ion channels (pLGICs) including ELIC. To determine the structure of a pLGIC in a membrane environment that supports ion channel function, we performed single particle cryo-EM of ELIC in liposomes. ELIC activation and desensitization were confirmed in liposomes with a stopped-flow thallium flux assay. Using WT ELIC and a non-desensitizing mutant (ELIC5), we captured resting, activated, and desensitized structures at high resolution. In the desensitized structure, the ion conduction pore has a constriction at the 9' leucine of the pore-lining M2 helix, indicating that 9' is the desensitization gate in ELIC. The agonist-bound structures of ELIC in liposomes are distinct from those in nanodiscs. In general, the transmembrane domain is more loosely packed in liposomes compared to nanodiscs. It has been suggested that large nanodiscs are superior for supporting membrane protein function. However, ELIC localizes to the rim of large circularized nanodiscs, and structures of ELIC in large nanodiscs deviate from the liposome structures more than those in small nanodiscs. Using liposomes for cryo-EM structure determination of a pLGIC increases our confidence that the structures are snapshots of functional states. #1: ![]() タイトル: Cryo-EM structures of a pentameric ligand-gated ion channel in liposomes 著者: Dalal, V. / Tan, B.K. / Xu, H. / Cheng, W.W. | |||||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 280.1 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 230.1 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.3 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.4 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 56.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 77.1 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 49385MC ![]() 9ngfC ![]() 9nggC ![]() 9ngqC ![]() 9ngrC ![]() 9ngsC ![]() 9nh4C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 37011.055 Da / 分子数: 5 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) ![]() ![]() ![]() #2: 化合物 | ChemComp-3CN / #3: 化合物 | ChemComp-NA / 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | Has protein modification | N | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: ELIC5 with propylamine facing ECD inwards in liposomes with 2:1:1 POPC:POPE:POPG タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: ![]() |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() |
緩衝液 | pH: 7 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 75000 X / 倍率(補正後): 75000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2400 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm / Cs: 0.01 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 56.9 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 |
電子光学装置 | 球面収差補正装置: Cs Corrected System |
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解析
EMソフトウェア | 名称: EPU / バージョン: 3.8 / カテゴリ: 画像取得 |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
3次元再構成 | 解像度: 4.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 7244 / 対称性のタイプ: POINT |
原子モデル構築 | プロトコル: AB INITIO MODEL / 空間: REAL |