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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 9k9t | |||||||||||||||||||||
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| タイトル | MPXV DNA polymerase in complex with CDV | |||||||||||||||||||||
要素 |
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キーワード | REPLICATION/DNA / complex / replicate / DNA / mpox / polymerase / REPLICATION-DNA complex | |||||||||||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報uracil DNA N-glycosylase activity / viral DNA genome replication / DNA recombination / DNA-directed DNA polymerase / DNA-directed DNA polymerase activity / DNA replication / hydrolase activity / DNA repair / nucleotide binding / DNA binding 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||||||||
| 生物種 | Monkeypox virus (サル痘ウイルス) | |||||||||||||||||||||
| 手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.96 Å | |||||||||||||||||||||
データ登録者 | Xie, Y.F. / Kuai, L. / Peng, Q. / Wang, Q. / Wang, H. / Li, X.M. / Qi, J.X. / Ding, Q. / Shi, Y. / Gao, F. | |||||||||||||||||||||
| 資金援助 | 中国, 1件
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引用 | ジャーナル: Proc Natl Acad Sci U S A / 年: 2025タイトル: Structural basis of DNA replication fidelity of the Mpox virus. 著者: Yufeng Xie / Lu Kuai / Qi Peng / Qian Wang / Han Wang / Xiaomei Li / Jianxun Qi / Qiang Ding / Yi Shi / George F Gao / ![]() 要旨: The Mpox virus (MPXV) is an orthopoxvirus that caused a global outbreak in 2022. The poxvirus DNA polymerase complex is responsible for the replication and integrity of the viral genome; however, the ...The Mpox virus (MPXV) is an orthopoxvirus that caused a global outbreak in 2022. The poxvirus DNA polymerase complex is responsible for the replication and integrity of the viral genome; however, the molecular mechanisms underlying DNA replication fidelity are still unclear. In this study, we determined the cryoelectron microscopy (cryo-EM) structures of the MPXV F8-A22-E4 polymerase holoenzyme in its editing state, in complex with mismatched primer-template DNA and DNA containing uracil deoxynucleotide. We showed that the MPXV polymerase has a similar replication-to-edit transition mechanism to proofread the mismatched nucleotides like the B-family DNA polymerases of other species. The unique processivity cofactor A22-E4 undergoes conformational changes in different working states and might affect the proofreading process. Moreover, we elucidated the base excision repair (BER) function of E4 as a uracil-DNA glycosylase and the coupling mechanism of genome replication and BER, characteristic of poxviruses. Our findings greatly enhance our molecular understanding of DNA replication fidelity of orthopoxviruses and will stimulate the development of broad-spectrum antiviral drugs. | |||||||||||||||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 9k9t.cif.gz | 348.6 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb9k9t.ent.gz | 269.4 KB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 9k9t.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| 文書・要旨 | 9k9t_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | 9k9t_full_validation.pdf.gz | 1.1 MB | 表示 | |
| XML形式データ | 9k9t_validation.xml.gz | 54.6 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | 9k9t_validation.cif.gz | 82.5 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/k9/9k9t ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/k9/9k9t | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 関連構造データ | ![]() 62198MC ![]() 9k9rC ![]() 9k9sC ![]() 9k9uC ![]() 9k9vC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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要素
| #1: タンパク質 | 分子量: 119837.016 Da / 分子数: 1 / 変異: D166A,E168A / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Monkeypox virus (サル痘ウイルス)遺伝子: OPG071, POL, MPXVgp056 / 発現宿主: Spodoptera (蝶・蛾) / 参照: UniProt: A0A7H0DN44, DNA-directed DNA polymerase |
|---|---|
| #2: DNA鎖 | 分子量: 11677.539 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Monkeypox virus (サル痘ウイルス) |
| #3: DNA鎖 | 分子量: 7392.804 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Monkeypox virus (サル痘ウイルス) |
| #4: タンパク質 | 分子量: 49203.926 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Monkeypox virus (サル痘ウイルス)遺伝子: A22R, MPXV-COP-126, MPXV-M2940_FCT-131, MPXV-M2957_Lagos-131, MPXV-M3021_Delta-131, MPXV-M5320_M15_Bayelsa-124, MPXV-Nig_SEV71_2_82-126, MPXV-PCH-128, MPXV-Singapore-131, MPXV-SL-126, MPXV- ...遺伝子: A22R, MPXV-COP-126, MPXV-M2940_FCT-131, MPXV-M2957_Lagos-131, MPXV-M3021_Delta-131, MPXV-M5320_M15_Bayelsa-124, MPXV-Nig_SEV71_2_82-126, MPXV-PCH-128, MPXV-Singapore-131, MPXV-SL-126, MPXV-UK_P1-131, MPXV-UK_P2-131, MPXV-UK_P3-131, MPXV-USA2003_099_GR-131, MPXV-USA2003_206_DM-131, MPXV-USA2003_223_RS-131, MPXV-UTC-122, MPXV-W_Nigeria-126, MPXV-WRAIR126, MPXV297957_122, MPXV298464_113, MPXV_LIB1970_184_138, MPXV_USA2003_039_138, MPXV_USA2003_044_138, PDLMKLCO_00135 発現宿主: Spodoptera (蝶・蛾) / 参照: UniProt: Q5IXP2 |
| #5: タンパク質 | 分子量: 25107.742 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Monkeypox virus (サル痘ウイルス)遺伝子: E4R, UNG, MPXV-CAM1990_02-093, MPXV-Congo_8-094, MPXV-COP-095, MPXV-GAB1988_001-094, MPXV-Ikubi-093, MPXV-M2940_FCT-099, MPXV-M2957_Lagos-099, MPXV-M3021_Delta-099, MPXV-M5320_M15_Bayelsa- ...遺伝子: E4R, UNG, MPXV-CAM1990_02-093, MPXV-Congo_8-094, MPXV-COP-095, MPXV-GAB1988_001-094, MPXV-Ikubi-093, MPXV-M2940_FCT-099, MPXV-M2957_Lagos-099, MPXV-M3021_Delta-099, MPXV-M5320_M15_Bayelsa-092, MPXV-Nig_SEV71_2_82-094, MPXV-PCH-096, MPXV-Singapore-099, MPXV-SL-095, MPXV-UK_P1-099, MPXV-UK_P2-099, MPXV-UK_P3-099, MPXV-USA2003_099_GR-099, MPXV-USA2003_206_DM-099, MPXV-USA2003_223_RS-099, MPXV-UTC-090, MPXV-W_Nigeria-094, MPXV-WRAIR095, MPXV297957_090, MPXV298464_081, MPXV_DRC_Yandongi_102, MPXV_LIB1970_184_106, MPXV_RCG2003_358_106, MPXV_SUD2005_01_102, MPXV_USA2003_039_106, MPXV_USA2003_044_106, MPXV_ZAI1979_005_106, MPXVgp101, PDLMKLCO_00104 発現宿主: Spodoptera (蝶・蛾) / 参照: UniProt: Q5IXS4, uracil-DNA glycosylase |
| Has protein modification | N |
-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
|---|---|
| EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
| 構成要素 | 名称: MPXV DNA polymerase in complex with primer/4U template DNA タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
|---|---|
| 由来(天然) | 生物種: Monkeypox virus (サル痘ウイルス) |
| 由来(組換発現) | 生物種: Spodoptera (蝶・蛾) |
| 緩衝液 | pH: 8 |
| 試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
| 急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
| 実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
|---|---|
| 顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
| 電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
| 電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm |
| 撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
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解析
| EMソフトウェア | 名称: PHENIX / カテゴリ: モデル精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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| CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
| 3次元再構成 | 解像度: 2.96 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 52654 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
| 精密化 | 最高解像度: 2.96 Å 立体化学のターゲット値: REAL-SPACE (WEIGHTED MAP SUM AT ATOM CENTERS) | ||||||||||||||||||||||||
| 拘束条件 |
|
ムービー
コントローラー
万見について




Monkeypox virus (サル痘ウイルス)
中国, 1件
引用








PDBj









































Spodoptera (蝶・蛾)
FIELD EMISSION GUN