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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 9j0x | ||||||||||||||||||||||||||||||
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タイトル | Cryo-EM Structure of the Guard Cell Potassium Channel GORK | ||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | Potassium channel GORK | ||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | MEMBRANE PROTEIN / Guard cell / Potassium channel / outward-rectifying | ||||||||||||||||||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() monoatomic ion transmembrane transporter activity / response to jasmonic acid / response to abscisic acid / response to water deprivation / outward rectifier potassium channel activity / monoatomic ion channel complex / monoatomic ion transport / response to cold / response to calcium ion / nucleus 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||||||||||||||
生物種 | ![]() ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3 Å | ||||||||||||||||||||||||||||||
![]() | Zhang, X. / Zhang, P. | ||||||||||||||||||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: GORK K channel structure and gating vital to informing stomatal engineering. 著者: Xue Zhang / William Carroll / Thu Binh-Anh Nguyen / Thanh-Hao Nguyen / Zhao Yang / Miaolian Ma / Xiaowei Huang / Adrian Hills / Hui Guo / Rucha Karnik / Michael R Blatt / Peng Zhang / ![]() ![]() 要旨: The Arabidopsis GORK channel is a major pathway for guard cell K efflux that facilitates stomatal closure. GORK is an outwardly-rectifying member of the cyclic-nucleotide binding-homology domain ...The Arabidopsis GORK channel is a major pathway for guard cell K efflux that facilitates stomatal closure. GORK is an outwardly-rectifying member of the cyclic-nucleotide binding-homology domain (CNBHD) family of K channels with close homologues in all other angiosperms known to date. Its bioengineering has demonstrated the potential for enhanced carbon assimilation and water use efficiency. Here we identify critical domains through structural and functional analysis, highlighting conformations that reflect long-lived closed and pre-open states of GORK. These conformations are marked by interactions at the cytosolic face of the membrane between so-called voltage-sensor, C-linker and CNBHD domains, the latter relocating across 10 Å below the voltage sensor. The interactions center around two coupling sites that functional analysis establish are critical for channel gating. The channel is also subject to putative, ligand-like interactions within the CNBHD, which leads to its gating independence of cyclic nucleotides such as cAMP or cGMP. These findings implicate a multi-step mechanism of semi-independent conformational transitions that underlie channel activity and offer promising new sites for optimizing GORK to engineer stomata. | ||||||||||||||||||||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 479.3 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 396.2 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.3 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.3 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 80.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 120.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 94583.477 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() ![]() 遺伝子: GORK, At5g37500, MPA22.4 発現宿主: ![]() ![]() 参照: UniProt: Q94A76 #2: 化合物 | ChemComp-K / 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | Has protein modification | N | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: GORK Channel Tetramer / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
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由来(天然) | 生物種: ![]() ![]() |
由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2200 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1200 nm |
撮影 | 電子線照射量: 58.4 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
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解析
EMソフトウェア | 名称: PHENIX |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) |
3次元再構成 | 解像度: 3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 422702 / 対称性のタイプ: POINT |
精密化 | 最高解像度: 3 Å |