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万見
- PDB-9h3f: Cryo-EM structure of YhaM -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 9h3f
タイトルCryo-EM structure of YhaM
要素3'-5' exoribonuclease YhaM
キーワードDNA BINDING PROTEIN / 3'-5' exoribonuclease
機能・相同性
機能・相同性情報


rRNA 3'-end processing / 3'-5'-RNA exonuclease activity / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素 / DNA binding
類似検索 - 分子機能
3'-5' exoribonuclease YhaM / : / HD domain profile. / HD domain / HD domain / Metal dependent phosphohydrolases with conserved 'HD' motif. / HD/PDEase domain / Nucleic acid-binding, OB-fold
類似検索 - ドメイン・相同性
3'-5' exoribonuclease YhaM
類似検索 - 構成要素
生物種Bacillus subtilis (枯草菌)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.47 Å
データ登録者Pane-Farre, J. / Madej, M.G. / Fu, L. / Ziegler, C. / Hinrichs, R.
資金援助1件
組織認可番号国
Other governmentSYN/5/2023
引用
ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2025
タイトル: A conserved nuclease facilitates environmental DNA uptake.
著者: Juri Hanßmann / Jan Pané-Farré / Milena Meiser / Mathias Girbig / Lifei Fu / M Gregor Madej / Franziska L Sendker / Clemens Thölken / Marcus Lechner / Christine Ziegler / Georg K A ...著者: Juri Hanßmann / Jan Pané-Farré / Milena Meiser / Mathias Girbig / Lifei Fu / M Gregor Madej / Franziska L Sendker / Clemens Thölken / Marcus Lechner / Christine Ziegler / Georg K A Hochberg / Gert Bange / Martin Thanbichler / Rebecca Hinrichs /
要旨: Bacteria acquire new traits through the uptake of genetic material from the environment, a process requiring DNA processing. However, the molecular inventory mediating this process is far from being ...Bacteria acquire new traits through the uptake of genetic material from the environment, a process requiring DNA processing. However, the molecular inventory mediating this process is far from being completely understood. Here, we identify YhaM in Bacillus subtilis as a conserved 3'-deoxyribonuclease essential for the uptake and processing of genetic information in the form of single-stranded DNA. Our results show that YhaM assembles into hexamers in the presence of divalent cations, enhancing substrate binding, which is achieved through its conserved oligonucleotide-binding domain. Cells lacking YhaM show a severe defect in the uptake of plasmids and genomic DNA, but the transduction of double-stranded DNA by the phage SPP1 remains unaffected. These findings highlight a critical role of YhaM in single-stranded DNA maturation during natural transformation. Importantly, this function is conserved in various Gram-positive human pathogens such as Staphylococcus aureus, suggesting that it could contribute to the spread of antibiotic resistance.
#1: ジャーナル: Acta Crystallogr D Struct Biol / 年: 2019
タイトル: Macromolecular structure determination using X-rays, neutrons and electrons: recent developments in Phenix.
著者: Dorothee Liebschner / Pavel V Afonine / Matthew L Baker / Gábor Bunkóczi / Vincent B Chen / Tristan I Croll / Bradley Hintze / Li Wei Hung / Swati Jain / Airlie J McCoy / Nigel W Moriarty / ...著者: Dorothee Liebschner / Pavel V Afonine / Matthew L Baker / Gábor Bunkóczi / Vincent B Chen / Tristan I Croll / Bradley Hintze / Li Wei Hung / Swati Jain / Airlie J McCoy / Nigel W Moriarty / Robert D Oeffner / Billy K Poon / Michael G Prisant / Randy J Read / Jane S Richardson / David C Richardson / Massimo D Sammito / Oleg V Sobolev / Duncan H Stockwell / Thomas C Terwilliger / Alexandre G Urzhumtsev / Lizbeth L Videau / Christopher J Williams / Paul D Adams /
要旨: Diffraction (X-ray, neutron and electron) and electron cryo-microscopy are powerful methods to determine three-dimensional macromolecular structures, which are required to understand biological ...Diffraction (X-ray, neutron and electron) and electron cryo-microscopy are powerful methods to determine three-dimensional macromolecular structures, which are required to understand biological processes and to develop new therapeutics against diseases. The overall structure-solution workflow is similar for these techniques, but nuances exist because the properties of the reduced experimental data are different. Software tools for structure determination should therefore be tailored for each method. Phenix is a comprehensive software package for macromolecular structure determination that handles data from any of these techniques. Tasks performed with Phenix include data-quality assessment, map improvement, model building, the validation/rebuilding/refinement cycle and deposition. Each tool caters to the type of experimental data. The design of Phenix emphasizes the automation of procedures, where possible, to minimize repetitive and time-consuming manual tasks, while default parameters are chosen to encourage best practice. A graphical user interface provides access to many command-line features of Phenix and streamlines the transition between programs, project tracking and re-running of previous tasks.
履歴
登録2024年10月16日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02025年8月6日Provider: repository / タイプ: Initial release

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: 3'-5' exoribonuclease YhaM
B: 3'-5' exoribonuclease YhaM
C: 3'-5' exoribonuclease YhaM
D: 3'-5' exoribonuclease YhaM
E: 3'-5' exoribonuclease YhaM
F: 3'-5' exoribonuclease YhaM
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)219,99918
ポリマ－219,7086
非ポリマー29212
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者・ソフトウェアが定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法, not applicable
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1

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要素

#1: タンパク質
3'-5' exoribonuclease YhaM


分子量: 36617.926 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Bacillus subtilis (枯草菌) / 遺伝子: yhaM, BSU09930 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
参照: UniProt: O07521, 加水分解酵素; エステル加水分解酵素
#2: 化合物
ChemComp-MG / MAGNESIUM ION / マグネシウムジカチオン


分子量: 24.305 Da / 分子数: 12 / 由来タイプ: 合成 / 式: Mg
研究の焦点であるリガンドがあるかN
Has protein modificationN

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: YhaM / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT
由来(天然)生物種: Bacillus subtilis (枯草菌)
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
緩衝液pH: 8
緩衝液成分
ID濃度名称Buffer-ID
125 mMTRIS1
2200 mMNaCl1
320 mMMagnesium chloride1
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
急速凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡撮影

顕微鏡モデル: JEOL CRYO ARM 200
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 1400 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 600 nm
試料ホルダ試料ホルダーモデル: JEOL CRYOSPECPORTER
撮影電子線照射量: 57.21 e/Å2 / 検出モード: COUNTING
フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k)
電子光学装置エネルギーフィルター名称: In-column Omega Filter
エネルギーフィルタースリット幅: 20 eV

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解析

EMソフトウェア
ID名称カテゴリ
2PHENIXモデル精密化
3SerialEM画像取得
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
粒子像の選択選択した粒子像数: 3338722
3次元再構成解像度: 3.47 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 1168864 / 対称性のタイプ: POINT
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.00510440
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.86814124
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d5.1451368
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.0531578
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0061806

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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