[日本語] English
万見
- PDB-9f3r: 13pf E254Q microtubule from recombinant human tubulin decorated w... -

+
データを開く


IDまたはキーワード:

読み込み中...

-
基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 9f3r
タイトル13pf E254Q microtubule from recombinant human tubulin decorated with EB3
要素
  • Detyrosinated tubulin alpha-1B chain
  • Microtubule-associated protein RP/EB family member 3
  • Tubulin beta-3 chain
キーワードSTRUCTURAL PROTEIN / Microtubule Tubulin GTP cp Cell cycle
機能・相同性
機能・相同性情報


netrin receptor binding / mitotic spindle astral microtubule end / Post-chaperonin tubulin folding pathway / protein localization to microtubule / dorsal root ganglion development / Cilium Assembly / cytoskeleton-dependent intracellular transport / Microtubule-dependent trafficking of connexons from Golgi to the plasma membrane / Carboxyterminal post-translational modifications of tubulin / microtubule plus-end ...netrin receptor binding / mitotic spindle astral microtubule end / Post-chaperonin tubulin folding pathway / protein localization to microtubule / dorsal root ganglion development / Cilium Assembly / cytoskeleton-dependent intracellular transport / Microtubule-dependent trafficking of connexons from Golgi to the plasma membrane / Carboxyterminal post-translational modifications of tubulin / microtubule plus-end / Intraflagellar transport / Sealing of the nuclear envelope (NE) by ESCRT-III / Formation of tubulin folding intermediates by CCT/TriC / Gap junction assembly / microtubule plus-end binding / positive regulation of cyclin-dependent protein serine/threonine kinase activity / Prefoldin mediated transfer of substrate to CCT/TriC / COPI-independent Golgi-to-ER retrograde traffic / Kinesins / Assembly and cell surface presentation of NMDA receptors / COPI-dependent Golgi-to-ER retrograde traffic / regulation of microtubule polymerization / microtubule organizing center / Recycling pathway of L1 / RHOH GTPase cycle / positive regulation of protein kinase activity / regulation of microtubule polymerization or depolymerization / spindle midzone / RHO GTPases activate IQGAPs / microtubule-based process / intercellular bridge / Hedgehog 'off' state / Activation of AMPK downstream of NMDARs / cytoplasmic microtubule / spindle assembly / COPI-mediated anterograde transport / Mitotic Prometaphase / EML4 and NUDC in mitotic spindle formation / MHC class II antigen presentation / Recruitment of NuMA to mitotic centrosomes / Resolution of Sister Chromatid Cohesion / cellular response to interleukin-4 / peptide binding / axon guidance / HSP90 chaperone cycle for steroid hormone receptors (SHR) in the presence of ligand / cell periphery / Translocation of SLC2A4 (GLUT4) to the plasma membrane / filopodium / RHO GTPases Activate Formins / PKR-mediated signaling / structural constituent of cytoskeleton / microtubule cytoskeleton organization / HCMV Early Events / Aggrephagy / mitotic spindle / Separation of Sister Chromatids / The role of GTSE1 in G2/M progression after G2 checkpoint / intracellular protein localization / mitotic cell cycle / lamellipodium / double-stranded RNA binding / microtubule cytoskeleton / growth cone / midbody / microtubule binding / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; GTPに作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / microtubule / cilium / axon / cell division / neuronal cell body / GTPase activity / dendrite / ubiquitin protein ligase binding / protein kinase binding / GTP binding / positive regulation of DNA-templated transcription / perinuclear region of cytoplasm / structural molecule activity / extracellular exosome / metal ion binding / identical protein binding / nucleus / cytoplasm
類似検索 - 分子機能
EB1, C-terminal / Microtubule-associated protein RP/EB / EB1, C-terminal domain superfamily / EB1-C terminal (EB1-C) domain profile. / EB1-like C-terminal motif / Calponin homology (CH) domain / Calponin homology domain / CH domain superfamily / Calponin homology (CH) domain profile. / Tubulin-beta mRNA autoregulation signal. ...EB1, C-terminal / Microtubule-associated protein RP/EB / EB1, C-terminal domain superfamily / EB1-C terminal (EB1-C) domain profile. / EB1-like C-terminal motif / Calponin homology (CH) domain / Calponin homology domain / CH domain superfamily / Calponin homology (CH) domain profile. / Tubulin-beta mRNA autoregulation signal. / Alpha tubulin / Beta tubulin, autoregulation binding site / Beta tubulin / Tubulin / Tubulin, C-terminal / Tubulin C-terminal domain / Tubulin, conserved site / Tubulin subunits alpha, beta, and gamma signature. / Tubulin/FtsZ family, C-terminal domain / Tubulin/FtsZ-like, C-terminal domain / Tubulin/FtsZ, C-terminal / Tubulin/FtsZ, 2-layer sandwich domain / Tubulin/FtsZ family, GTPase domain / Tubulin/FtsZ family, GTPase domain / Tubulin/FtsZ, GTPase domain / Tubulin/FtsZ, GTPase domain superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / Tubulin alpha-1B chain / Tubulin beta-3 chain / Microtubule-associated protein RP/EB family member 3
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法電子顕微鏡法 / らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4.3 Å
データ登録者Estevez-Gallego, J. / Blum, T.B. / Steinmetz, M.O. / Surrey, T.
資金援助 スペイン, スイス, European Union, 5件
組織認可番号国
Spanish Ministry of Science, Innovation, and UniversitiesPID2019-108415GB-I00 スペイン
Swiss National Science Foundation310030_192566 スイス
Generalitat de CatalunyaIU16-014045 (CRYO-TEM) スペイン
European Research Council (ERC)951430European Union
Spanish Ministry of Science, Innovation, and UniversitiesFJC2020-043857-I スペイン
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2025
タイトル: Hydrolysis-deficient mosaic microtubules as faithful mimics of the GTP cap.
著者: Juan Estévez-Gallego / Thorsten B Blum / Felix Ruhnow / María Gili / Silvia Speroni / Raquel García-Castellanos / Michel O Steinmetz / Thomas Surrey /
要旨: A critical feature of microtubules is their GTP cap, a stabilizing GTP-tubulin rich region at growing microtubule ends. Microtubules polymerized in the presence of GTP analogs or from GTP hydrolysis- ...A critical feature of microtubules is their GTP cap, a stabilizing GTP-tubulin rich region at growing microtubule ends. Microtubules polymerized in the presence of GTP analogs or from GTP hydrolysis-deficient tubulin mutants have been used as GTP-cap mimics for structural and biochemical studies. However, these analogs and mutants generate microtubules with diverse biochemical properties and lattice structures, leaving it unclear what is the most faithful GTP mimic and hence the structure of the GTP cap. Here, we generate a hydrolysis-deficient human tubulin mutant, αE254Q, with the smallest possible modification. We show that αE254Q-microtubules are stable, but still exhibit mild mutation-induced growth abnormalities. However, mixing two GTP hydrolysis-deficient tubulin mutants, αE254Q and αE254N, at an optimized ratio eliminates growth and lattice abnormalities, indicating that these 'mosaic microtubules' are faithful GTP cap mimics. Their cryo-electron microscopy structure reveals that longitudinal lattice expansion, but not protofilament twist, is the primary structural feature distinguishing the GTP-tubulin containing cap from the GDP-tubulin containing microtubule shaft. However, alterations in protofilament twist may be transiently needed to allow lattice compaction and GTP hydrolysis. Together, our results provide insights into the structural origin of GTP cap stability, the pathway of GTP hydrolysis and hence microtubule dynamic instability.
履歴
登録2024年4月25日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02025年3月19日Provider: repository / タイプ: Initial release

-
構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

-
集合体

登録構造単位
S: Microtubule-associated protein RP/EB family member 3
T: Microtubule-associated protein RP/EB family member 3
A: Detyrosinated tubulin alpha-1B chain
B: Tubulin beta-3 chain
G: Detyrosinated tubulin alpha-1B chain
N: Tubulin beta-3 chain
C: Detyrosinated tubulin alpha-1B chain
D: Tubulin beta-3 chain
I: Detyrosinated tubulin alpha-1B chain
P: Tubulin beta-3 chain
E: Detyrosinated tubulin alpha-1B chain
F: Tubulin beta-3 chain
K: Detyrosinated tubulin alpha-1B chain
R: Tubulin beta-3 chain
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)649,39538
ポリマ－642,82514
非ポリマー6,57024
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者・ソフトウェアが定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法, not applicable
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1

-
要素

#1: タンパク質 Microtubule-associated protein RP/EB family member 3 / EB1 protein family member 3 / EBF3 / End-binding protein 3 / EB3 / RP3


分子量: 15386.819 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: MAPRE3 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: Q9UPY8
#2: タンパク質
Detyrosinated tubulin alpha-1B chain


分子量: 50732.238 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: TUBA1B / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: P68363
#3: タンパク質
Tubulin beta-3 chain / Tubulin beta-4 chain / Tubulin beta-III


分子量: 51276.367 Da / 分子数: 6 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: TUBB3, TUBB4 / 発現宿主: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ) / 参照: UniProt: Q13509
#4: 化合物
ChemComp-GTP / GUANOSINE-5'-TRIPHOSPHATE / GTP


分子量: 523.180 Da / 分子数: 12 / 由来タイプ: 合成 / 式: C10H16N5O14P3 / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION / コメント: GTP, エネルギー貯蔵分子*YM
#5: 化合物
ChemComp-MG / MAGNESIUM ION / マグネシウムジカチオン


分子量: 24.305 Da / 分子数: 12 / 由来タイプ: 合成 / 式: Mg / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
研究の焦点であるリガンドがあるかY
Has protein modificationN

-
実験情報

-
実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: HELICAL ARRAY / ３次元再構成法: らせん対称体再構成法

-
試料調製

構成要素名称: 13pf E254Q microtubule from recombinant human tubulin decorated with EB3
タイプ: ORGANELLE OR CELLULAR COMPONENT / Entity ID: #1-#3 / 由来: RECOMBINANT
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
由来(組換発現)生物種: Trichoplusia ni (イラクサキンウワバ)
緩衝液pH: 6.8
試料濃度: 20 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドのタイプ: C-flat
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 310 K

-
電子顕微鏡撮影

顕微鏡モデル: TFS GLACIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2200 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 700 nm
撮影電子線照射量: 7.19 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k)
撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 2954

-
解析

EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
1RELION3.1.2粒子像選択
4RELION3.1.2CTF補正
7Coot0.9.8.92モデルフィッティング
9PHENIX1.21モデル精密化
12RELION3.1.2分類
13PHENIX1.21３次元再構成
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
らせん対称回転角度/サブユニット: -27.6835 ° / 軸方向距離/サブユニット: 9.58171 Å / らせん対称軸の対称性: C13
粒子像の選択選択した粒子像数: 790270
3次元再構成解像度: 4.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 33410 / 対称性のタイプ: HELICAL
原子モデル構築B value: 190 / プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL
原子モデル構築PDB-ID: 7sj7

7sj7


Accession code: 7sj7 / Source name: PDB / タイプ: experimental model
精密化交差検証法: NONE
立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2
原子変位パラメータBiso mean: 32.06 Å2
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.005144256
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.739360082
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.0496552
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.00617794
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d11.59336068

+
万見について

-
お知らせ

-
2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

-
2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

+
2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

+
2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

+
2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

-
万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

他の情報も見る