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万見
- PDB-9dxa: LRRC8A:D Conformation 2 -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 9dxa
タイトルLRRC8A:D Conformation 2
要素
  • Volume-regulated anion channel subunit LRRC8A,Soluble cytochrome b562
  • Volume-regulated anion channel subunit LRRC8D
キーワードMEMBRANE PROTEIN / ION CHANNEL / VOLUME-REGULATION
機能・相同性
機能・相同性情報


Miscellaneous transport and binding events / pre-B cell differentiation / volume-sensitive anion channel activity / aspartate transmembrane transport / cyclic-GMP-AMP transmembrane transporter activity / cyclic-GMP-AMP transmembrane import across plasma membrane / taurine transmembrane transport / monoatomic anion transmembrane transport / cell volume homeostasis / monoatomic anion transport ...Miscellaneous transport and binding events / pre-B cell differentiation / volume-sensitive anion channel activity / aspartate transmembrane transport / cyclic-GMP-AMP transmembrane transporter activity / cyclic-GMP-AMP transmembrane import across plasma membrane / taurine transmembrane transport / monoatomic anion transmembrane transport / cell volume homeostasis / monoatomic anion transport / cellular response to osmotic stress / protein hexamerization / response to osmotic stress / monoatomic ion channel complex / positive regulation of myoblast differentiation / intracellular glucose homeostasis / chloride transmembrane transport / electron transport chain / positive regulation of insulin secretion / spermatogenesis / periplasmic space / electron transfer activity / iron ion binding / lysosomal membrane / heme binding / endoplasmic reticulum membrane / cell surface / membrane / identical protein binding / plasma membrane / cytoplasm
類似検索 - 分子機能
LRRC8, pannexin-like TM region / Pannexin-like TM region of LRRC8 / : / : / Leucine-rich repeat region / Leucine-rich repeat, SDS22-like subfamily / Cytochrome b562 / Cytochrome b562 / Leucine rich repeat / Leucine-rich repeat, typical subtype ...LRRC8, pannexin-like TM region / Pannexin-like TM region of LRRC8 / : / : / Leucine-rich repeat region / Leucine-rich repeat, SDS22-like subfamily / Cytochrome b562 / Cytochrome b562 / Leucine rich repeat / Leucine-rich repeat, typical subtype / Leucine-rich repeats, typical (most populated) subfamily / Cytochrome c/b562 / Leucine-rich repeat profile. / Leucine-rich repeat / Leucine-rich repeat domain superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine / Soluble cytochrome b562 / Volume-regulated anion channel subunit LRRC8A / Volume-regulated anion channel subunit LRRC8D
類似検索 - 構成要素
生物種Mus musculus (ハツカネズミ)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å
データ登録者Lurie, A. / Brohawn, S.G.
資金援助 米国, 1件
組織認可番号国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)128263 米国
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2025
タイトル: Assembly and lipid-gating of LRRC8A:D volume-regulated anion channels.
著者: Antony Lurie / Christina A Stephens / David M Kern / Katharine M Henn / Naomi R Latorraca / Stephen G Brohawn /
要旨: Volume-regulated anion channels (VRACs) are ubiquitously expressed vertebrate ion channels that open in response to hypotonic swelling. VRACs assemble as heteromers of LRRC8A and LRRC8B-E subunits, ...Volume-regulated anion channels (VRACs) are ubiquitously expressed vertebrate ion channels that open in response to hypotonic swelling. VRACs assemble as heteromers of LRRC8A and LRRC8B-E subunits, with different subunit combinations resulting in channels with different properties. Recent studies have described the structures of LRRC8A:C VRACs, but how other VRACs assemble, and which structural features are conserved or variant across channel assemblies remains unknown. Herein, we used cryo-EM to determine structures of a LRRC8A:D VRAC with a 4:2 subunit stoichiometry, which we captured in two conformations. The presence of LRRC8D subunits widens and increases hydrophobicity of the selectivity filter, which may contribute to the unique substrate selectivity of LRRC8D-containing VRACs. The structures reveal lipids bound inside the channel pore, similar to those observed in LRRC8A:C VRACs. We observe that LRRC8D subunit incorporation disrupts packing of the cytoplasmic LRR domains, increasing channel dynamics and opening lateral intersubunit gaps, which we speculate are necessary for pore lipid evacuation and channel activation. Molecular dynamics simulations show that lipids can reside stably within the pore to close the channel. Using electrophysiological experiments, we confirmed that pore lipids block conduction in the closed state, demonstrating that lipid-gating is a general property of VRACs.
履歴
登録2024年10月11日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02024年11月27日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年11月27日Data content type: EM metadata / Data content type: EM metadata / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年11月27日Data content type: Additional map / Data content type: Additional map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年11月27日Data content type: Half map / Part number: 1 / Data content type: Half map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年11月27日Data content type: Half map / Part number: 2 / Data content type: Half map / Provider: repository / タイプ: Initial release
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改定 1.02024年11月27日Data content type: Primary map / Data content type: Primary map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12025年6月4日Group: Data collection / カテゴリ: em_admin / em_software / Item: _em_admin.last_update / _em_software.name
改定 1.12025年6月4日Data content type: EM metadata / Data content type: EM metadata / EM metadata / Group: Data processing / Experimental summary / Data content type: EM metadata / EM metadata / カテゴリ: em_admin / em_software / Data content type: EM metadata / EM metadata / Item: _em_admin.last_update / _em_software.name
改定 1.22025年12月24日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: citation / citation_author / em_admin
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation.year / _em_admin.last_update
改定 1.22025年12月24日Data content type: EM metadata / Data content type: EM metadata / EM metadata / Group: Database references / Experimental summary / Data content type: EM metadata / EM metadata / EM metadata / カテゴリ: citation / citation_author / em_admin
Data content type: EM metadata / EM metadata ...EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation.year / _em_admin.last_update

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Volume-regulated anion channel subunit LRRC8A,Soluble cytochrome b562
B: Volume-regulated anion channel subunit LRRC8A,Soluble cytochrome b562
C: Volume-regulated anion channel subunit LRRC8A,Soluble cytochrome b562
D: Volume-regulated anion channel subunit LRRC8A,Soluble cytochrome b562
E: Volume-regulated anion channel subunit LRRC8D
F: Volume-regulated anion channel subunit LRRC8D
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)634,14924
ポリマ－620,7566
非ポリマー13,39318
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者・ソフトウェアが定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法, not applicable
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1

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要素

#1: タンパク質
Volume-regulated anion channel subunit LRRC8A,Soluble cytochrome b562 / Leucine-rich repeat-containing protein 8A / Protein ebouriffe / ebo / Cytochrome b-562


分子量: 105530.102 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: LRRC8A(BRIL),LRRC8A(BRIL),LRRC8A(BRIL) / 由来: (組換発現) Mus musculus (ハツカネズミ) / 遺伝子: Lrrc8a, Lrrc8, cybC, Z5846, ECs5213
発現宿主: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
参照: UniProt: Q80WG5, UniProt: P0ABE8
#2: タンパク質 Volume-regulated anion channel subunit LRRC8D / Leucine-rich repeat-containing protein 5 / Leucine-rich repeat-containing protein 8D


分子量: 99317.867 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Mus musculus (ハツカネズミ) / 遺伝子: Lrrc8d, Lrrc5
発現宿主: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
参照: UniProt: Q8BGR2
#3: 化合物
ChemComp-PEE / 1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine / DOPE


分子量: 744.034 Da / 分子数: 18 / 由来タイプ: 合成 / 式: C41H78NO8P / コメント: DOPE, リン脂質*YM
研究の焦点であるリガンドがあるかN
Has protein modificationY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: LRRC8A:D channel / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#2 / 由来: RECOMBINANT
分子量値: 0.620 MDa / 実験値: NO
由来(天然)生物種: Mus musculus (ハツカネズミ)
由来(組換発現)生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
緩衝液pH: 7.4
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
急速凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: TFS KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 18000 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 6000 nm
撮影電子線照射量: 50 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)

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解析

EMソフトウェア名称: PHENIX / カテゴリ: モデル精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
3次元再構成解像度: 3.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 46893 / 対称性のタイプ: POINT

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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