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- PDB-9b6c: Human asparagine synthetase Arg-142 to Ile-142 (R142I) variant -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 9b6c
タイトルHuman asparagine synthetase Arg-142 to Ile-142 (R142I) variant
要素Asparagine synthetase [glutamine-hydrolyzing]
キーワードBIOSYNTHETIC PROTEIN / asparagine / aspartic acid / glutamine / ammonia
機能・相同性
機能・相同性情報


asparagine synthase (glutamine-hydrolysing) / L-asparagine biosynthetic process / asparagine synthase (glutamine-hydrolyzing) activity / : / Response of EIF2AK1 (HRI) to heme deficiency / Aspartate and asparagine metabolism / ATF4 activates genes in response to endoplasmic reticulum stress / Response of EIF2AK4 (GCN2) to amino acid deficiency / cellular response to glucose starvation / positive regulation of mitotic cell cycle ...asparagine synthase (glutamine-hydrolysing) / L-asparagine biosynthetic process / asparagine synthase (glutamine-hydrolyzing) activity / : / Response of EIF2AK1 (HRI) to heme deficiency / Aspartate and asparagine metabolism / ATF4 activates genes in response to endoplasmic reticulum stress / Response of EIF2AK4 (GCN2) to amino acid deficiency / cellular response to glucose starvation / positive regulation of mitotic cell cycle / negative regulation of apoptotic process / ATP binding / cytosol
類似検索 - 分子機能
Asparagine synthase, glutamine-hydrolyzing / Asparagine synthase, N-terminal domain / : / Glutamine amidotransferase domain / Asparagine synthase / Asparagine synthase / Glutamine amidotransferase type 2 domain profile. / Glutamine amidotransferase type 2 domain / Nucleophile aminohydrolases, N-terminal / Rossmann-like alpha/beta/alpha sandwich fold
類似検索 - ドメイン・相同性
Asparagine synthetase [glutamine-hydrolyzing]
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.35 Å
データ登録者Coricello, A. / Nardone, A. / Lupia, A. / Gratteri, C. / Vos, M. / Chaptal, V. / Alcaro, S. / Zhu, W. / Takagi, Y. / Richards, N.
資金援助 米国, フランス, 英国, European Union, 6件
組織認可番号国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)R01GM111695 米国
American Cancer SocietyDBG-23-1038947-01-IBCD 米国
National Institutes of Health/National Institute of General Medical Sciences (NIH/NIGMS)S10OD028723 米国
Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)ANR-19-CE11-0023-01 フランス
Biotechnology and Biological Sciences Research Council (BBSRC)P/0118017/1 英国
European CommissionFESR FSE 2014- 2020European Union
引用ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024
タイトル: 3D variability analysis reveals a hidden conformational change controlling ammonia transport in human asparagine synthetase.
著者: Adriana Coricello / Alanya J Nardone / Antonio Lupia / Carmen Gratteri / Matthijn Vos / Vincent Chaptal / Stefano Alcaro / Wen Zhu / Yuichiro Takagi / Nigel G J Richards /
要旨: Advances in X-ray crystallography and cryogenic electron microscopy (cryo-EM) offer the promise of elucidating functionally relevant conformational changes that are not easily studied by other ...Advances in X-ray crystallography and cryogenic electron microscopy (cryo-EM) offer the promise of elucidating functionally relevant conformational changes that are not easily studied by other biophysical methods. Here we show that 3D variability analysis (3DVA) of the cryo-EM map for wild-type (WT) human asparagine synthetase (ASNS) identifies a functional role for the Arg-142 side chain and test this hypothesis experimentally by characterizing the R142I variant in which Arg-142 is replaced by isoleucine. Support for Arg-142 playing a role in the intramolecular translocation of ammonia between the active site of the enzyme is provided by the glutamine-dependent synthetase activity of the R142 variant relative to WT ASNS, and MD simulations provide a possible molecular mechanism for these findings. Combining 3DVA with MD simulations is a generally applicable approach to generate testable hypotheses of how conformational changes in buried side chains might regulate function in enzymes.
履歴
登録2024年3月25日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02025年1月8日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12025年2月5日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: citation / citation_author / em_admin
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation.year / _citation_author.identifier_ORCID / _citation_author.name / _em_admin.last_update

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Asparagine synthetase [glutamine-hydrolyzing]
B: Asparagine synthetase [glutamine-hydrolyzing]


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)133,3442
ポリマ－133,3442
非ポリマー00
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法, not applicable
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551

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要素

#1: タンパク質 Asparagine synthetase [glutamine-hydrolyzing] / Cell cycle control protein TS11 / Glutamine-dependent asparagine synthetase


分子量: 66672.117 Da / 分子数: 2 / 変異: R142I / 由来タイプ: 組換発現
詳細: The gaps in sequence represent area of EM map as either no density was found, mostly likely disordered, or/and density was not good enough to place amino acid residues.
由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: ASNS, TS11
発現宿主: Insect cell expression vector pTIE1 (その他)
参照: UniProt: P08243, asparagine synthase (glutamine-hydrolysing)
Has protein modificationN

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: human asparagine synthetase dimer form / タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT
分子量値: 0.133 MDa / 実験値: NO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
由来(組換発現)生物種: Insect cell expression vector pTIE1 (その他)
緩衝液pH: 8
詳細: 25 mM Tris-HCl, pH 8.0, containing 200 mM NaCl, 5 % glycerol and 5 mM beta-mercaptoethanol
試料濃度: 3.2 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 300 divisions/in. / グリッドのタイプ: UltrAuFoil R1.2/1.3
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K

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電子顕微鏡撮影

顕微鏡モデル: TFS GLACIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 200 kV / 照射モード: OTHER
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2000 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 400 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm
撮影電子線照射量: 40 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k)

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解析

EMソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.21_5207 / カテゴリ: モデル精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
対称性点対称性: C2 (2回回転対称)
3次元再構成解像度: 3.35 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 147711 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築B value: 118.5 / 空間: REAL
原子モデル構築PDB-ID: 8SUE

8sue


Accession code: 8SUE / Source name: PDB / タイプ: experimental model
精密化交差検証法: NONE
立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2
原子変位パラメータBiso mean: 36.04 Å2
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.0028319
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.468511263
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.03751232
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0041448
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d6.32061131

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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