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- PDB-8zyd: Cryo-EM structure of uropathogenic Escherichia coli CysK:CdiA:tRN... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8zyd
タイトルCryo-EM structure of uropathogenic Escherichia coli CysK:CdiA:tRNA complex B
要素
  • Cysteine synthase A
  • tRNA nuclease CdiA
  • tRNAIleGAU
キーワードTOXIN / RNase / Complex / Contact-dependent growth inhibition
機能・相同性
機能・相同性情報


tRNA-specific ribonuclease activity / cysteine synthase / cysteine synthase activity / other organism cell membrane / cysteine biosynthetic process from serine / RNA endonuclease activity / toxin activity / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素 / host cell cytoplasm / tRNA binding ...tRNA-specific ribonuclease activity / cysteine synthase / cysteine synthase activity / other organism cell membrane / cysteine biosynthetic process from serine / RNA endonuclease activity / toxin activity / 加水分解酵素; エステル加水分解酵素 / host cell cytoplasm / tRNA binding / lyase activity / extracellular region / membrane
類似検索 - 分子機能
Toxin CdiA-like, Filamentous hemagglutinin motif repeats / VENN motif-containing domain / Pre-toxin domain with VENN motif / Hemagglutinin repeat / Hemagglutinin repeat / Filamentous haemagglutinin FhaB/tRNA nuclease CdiA-like, TPS domain / TPS secretion domain / haemagglutination activity domain / Cysteine synthase CysK / Cysteine synthase ...Toxin CdiA-like, Filamentous hemagglutinin motif repeats / VENN motif-containing domain / Pre-toxin domain with VENN motif / Hemagglutinin repeat / Hemagglutinin repeat / Filamentous haemagglutinin FhaB/tRNA nuclease CdiA-like, TPS domain / TPS secretion domain / haemagglutination activity domain / Cysteine synthase CysK / Cysteine synthase / Parallel beta-helix repeat / Parallel beta-helix repeats / Cysteine synthase/cystathionine beta-synthase, pyridoxal-phosphate attachment site / Cysteine synthase/cystathionine beta-synthase P-phosphate attachment site. / : / Pectin lyase fold / Pyridoxal-phosphate dependent enzyme / Pyridoxal-phosphate dependent enzyme / Tryptophan synthase beta subunit-like PLP-dependent enzyme / Pectin lyase fold/virulence factor
類似検索 - ドメイン・相同性
: / RNA / RNA (> 10) / Cysteine synthase A / tRNA nuclease CdiA
類似検索 - 構成要素
生物種Escherichia coli (大腸菌)
Escherichia coli 536 (大腸菌)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.04 Å
データ登録者Feng, Z. / Yashiro, Y. / Tomita, K.
資金援助 日本, 2件
組織認可番号国
Japan Society for the Promotion of Science (JSPS)18H03980 日本
Japan Society for the Promotion of Science (JSPS)23H00368 日本
引用ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2025
タイトル: Mechanism of activation of contact-dependent growth inhibition tRNase toxin by the amino acid biogenesis factor CysK in the bacterial competition system.
著者: Zhaohang Feng / Yuka Yashiro / Kozo Tomita /
要旨: Contact-dependent growth inhibition (CDI) is a bacterial competition mechanism, wherein the C-terminal toxin domain of CdiA protein (CdiA-CT) is transferred from one bacterium to another, impeding ...Contact-dependent growth inhibition (CDI) is a bacterial competition mechanism, wherein the C-terminal toxin domain of CdiA protein (CdiA-CT) is transferred from one bacterium to another, impeding the growth of the toxin recipient. In uropathogenic Escherichia coli 536, CdiA-CT (CdiA-CTEC536) is a tRNA anticodon endonuclease that requires a cysteine biogenesis factor, CysK, for its activity. However, the mechanism underlying tRNA recognition and cleavage by CdiA-CTEC536 remains unresolved. Here, we present the cryo-EM structure of the CysK:CdiA-CTEC536:tRNA ternary complex. The interaction between CdiA-CTEC536 and CysK stabilizes the CdiA-CTEC536 structure and facilitates tRNA binding and the formation of the CdiA-CTEC536 catalytic core structure. The bottom-half of the tRNA interacts exclusively with CdiA-CTEC536 and the α-helices of CdiA-CTEC536 engage with the minor and major grooves of the bottom-half of tRNA, positioning the tRNA anticodon loop at the CdiA-CTEC536 catalytic site for tRNA cleavage. Thus, CysK serves as a platform facilitating the recognition and cleavage of substrate tRNAs by CdiA-CTEC536.
履歴
登録2024年6月17日登録サイト: PDBJ / 処理サイト: PDBJ
改定 1.02024年8月21日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年8月21日Data content type: EM metadata / Data content type: EM metadata / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年8月21日Data content type: FSC / Data content type: FSC / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年8月21日Data content type: Half map / Part number: 1 / Data content type: Half map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年8月21日Data content type: Half map / Part number: 2 / Data content type: Half map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年8月21日Data content type: Image / Data content type: Image / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年8月21日Data content type: Mask / Data content type: Mask / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02024年8月21日Data content type: Primary map / Data content type: Primary map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12025年3月5日Group: Data collection / Database references / Structure summary
カテゴリ: citation / em_admin ...citation / em_admin / pdbx_entry_details / pdbx_modification_feature
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_ASTM / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.journal_volume / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.year / _em_admin.last_update / _pdbx_entry_details.has_protein_modification
改定 1.12025年3月5日Data content type: EM metadata / Data content type: EM metadata / EM metadata / Group: Database references / Experimental summary / Data content type: EM metadata / EM metadata / カテゴリ: citation / em_admin
Data content type: EM metadata / EM metadata ...EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata / EM metadata
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_ASTM / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.journal_volume / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.year / _em_admin.last_update

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Cysteine synthase A
B: tRNA nuclease CdiA
C: tRNAIleGAU
E: Cysteine synthase A
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)119,7446
ポリマ－119,6954
非ポリマー492
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者・ソフトウェアが定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法, not applicable
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1

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要素

#1: タンパク質 Cysteine synthase A / CSase A / O-acetylserine (thiol)-lyase A / OAS-TL A / O-acetylserine sulfhydrylase A / Sulfate ...CSase A / O-acetylserine (thiol)-lyase A / OAS-TL A / O-acetylserine sulfhydrylase A / Sulfate starvation-induced protein 5 / SSI5


分子量: 34756.688 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: cysK, Z3680, ECs3286 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P0ABK6, cysteine synthase
#2: タンパク質 tRNA nuclease CdiA / tRNase CdiA / Anticodon nuclease CdiA / CdiA-EC536 / Toxin CdiA


分子量: 25181.250 Da / 分子数: 1 / Mutation: H178A / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli 536 (大腸菌) / 遺伝子: cdiA, ECP_4580 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
参照: UniProt: Q0T963, 加水分解酵素; エステル加水分解酵素
#3: RNA鎖 tRNAIleGAU


分子量: 25000.869 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 株 (発現宿主): JM101tr / 参照: GenBank: 1845258627
#4: 化合物 ChemComp-MG / MAGNESIUM ION


分子量: 24.305 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / 式: Mg
研究の焦点であるリガンドがあるかN
Has protein modificationY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: CysK in complex with CdiA-CT and tRNA. / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#3 / 由来: RECOMBINANT
分子量値: 0.11 MDa / 実験値: NO
由来(天然)生物種: Escherichia coli 536 (大腸菌)
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
緩衝液pH: 7
詳細: 25mM Tris-HCl,50mM NaCl,2mM MgCl2, 10mM 2-mercaptoethanol
緩衝液成分
ID濃度名称式Buffer-ID
125 mMTris-HClTris-HCl1
250 mMSodium chlorideNaCl1
32 mMMagnesium chlorideMgCl21
410 mM2-mercaptoethanol2-mercaptoethanol1
試料濃度: 1.6 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 倍率（公称値）: 105000 X / 最大 デフォーカス（公称値）: 1800 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 800 nm / Cs: 2.7 mm
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN
撮影平均露光時間: 1 sec. / 電子線照射量: 50 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)
撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 7044
画像スキャン横: 4092 / 縦: 5760

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解析

EMソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.18.2_3874: / カテゴリ: モデル精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
粒子像の選択選択した粒子像数: 4707496
対称性点対称性: C1 (非対称)
3次元再構成解像度: 3.04 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 103127 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築PDB-ID: 5J43

5j43


Accession code: 5J43 / Source name: PDB / タイプ: experimental model
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.0087317
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.86610260
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d11.712960
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.0551242
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0091048

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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