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万見
- PDB-8znj: Cryo-EM structure of a short prokaryotic Argonaute system from ar... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8znj
タイトルCryo-EM structure of a short prokaryotic Argonaute system from archaeon Suldolobus islandicus
要素
  • DNA (5'-D(*CP*CP*TP*CP*CP*AP*GP*GP*GP*TP*AP*TP*CP*TP*AP*AP*GP*CP*TP*TP*TP*GP*AP*A)-3')
  • Piwi domain-containing protein
  • RNA (5'-R(P*UP*CP*AP*AP*AP*GP*CP*UP*UP*AP*GP*AP*UP*AP*CP*CP*CP*UP*GP*GP*A)-3')
  • SiAgo-associated protein1, SiAga1
キーワードRNA BINDING PROTEIN/RNA/DNA / Argonaute / RNA BINDING PROTEIN-RNA-DNA complex
機能・相同性
機能・相同性情報


nucleic acid binding
類似検索 - 分子機能
Piwi domain / Piwi domain / Piwi / Ribonuclease H superfamily / Ribonuclease H-like superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
DNA / DNA (> 10) / RNA / RNA (> 10) / Uncharacterized protein / Piwi domain-containing protein
類似検索 - 構成要素
生物種Saccharolobus islandicus M.16.4 (古細菌)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3 Å
データ登録者Dai, Z.K. / Guan, Z.Y. / Han, W.Y. / Zou, T.T.
資金援助 中国, 1件
組織認可番号国
National Natural Science Foundation of China (NSFC) 中国
引用ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2025
タイトル: Structural and mechanistic insights into the activation of a short prokaryotic argonaute system from archaeon Sulfolobus islandicus.
著者: Zhikang Dai / Yu Chen / Zeyuan Guan / Xueting Chen / Keyi Tan / Kaiyue Yang / Xuhui Yan / Yidong Liu / Zhou Gong / Wenyuan Han / Tingting Zou /
要旨: Prokaryotic Argonaute proteins (pAgos) defend the host against invading nucleic acids, including plasmids and viruses. Short pAgo systems confer immunity by inducing cell death upon detecting ...Prokaryotic Argonaute proteins (pAgos) defend the host against invading nucleic acids, including plasmids and viruses. Short pAgo systems confer immunity by inducing cell death upon detecting invading nucleic acids. However, the activation mechanism of the SiAgo system, comprising a short pAgo from the archaeon Sulfolobus islandicus and its associated proteins SiAga1 and SiAga2, remains largely unknown. Here, we determined the cryo-electron microscopy structures of the SiAgo-Aga1 apo complex and the RNA-DNA-bound SiAgo-Aga1 complex at resolutions of 2.7 and 3.0 Å, respectively. Our results revealed that a positively charged pocket is generated from the interaction between SiAgo and SiAga1, exhibiting an architecture similar to APAZ-pAgo of short pAgo systems and accommodating the nucleic acids. Further investigation elucidated the conserved mechanism of nucleic acid recognition by SiAgo-Aga1. Both the SiAgo-Aga1 interaction and nucleic acid recognition by the complex are essential for antiviral defense. Biochemical and structural analyses demonstrated that SiAgo-Aga1 undergoes extensive conformational changes upon binding to the RNA-DNA duplex, thereby licensing its interaction with the effector SiAga2 to trigger the immune response. Overall, our findings highlight the evolutionary conservation of Agos across phylogenetic clades and provide structural insights into the activation mechanism of the SiAgo system.
履歴
登録2024年5月27日登録サイト: PDBJ / 処理サイト: PDBC
改定 1.02025年2月19日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02025年2月19日Data content type: EM metadata / Data content type: EM metadata / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02025年2月19日Data content type: Half map / Part number: 1 / Data content type: Half map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02025年2月19日Data content type: Half map / Part number: 2 / Data content type: Half map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02025年2月19日Data content type: Image / Data content type: Image / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.02025年2月19日Data content type: Primary map / Data content type: Primary map / Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12025年7月23日Group: Data collection / カテゴリ: em_admin / em_software / Item: _em_admin.last_update / _em_software.name
改定 1.12025年7月23日Data content type: EM metadata / Data content type: EM metadata / EM metadata / Group: Data processing / Experimental summary / Data content type: EM metadata / EM metadata / カテゴリ: em_admin / em_software / Data content type: EM metadata / EM metadata / Item: _em_admin.last_update / _em_software.name

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Piwi domain-containing protein
B: SiAgo-associated protein1, SiAga1
D: RNA (5'-R(P*UP*CP*AP*AP*AP*GP*CP*UP*UP*AP*GP*AP*UP*AP*CP*CP*CP*UP*GP*GP*A)-3')
E: DNA (5'-D(*CP*CP*TP*CP*CP*AP*GP*GP*GP*TP*AP*TP*CP*TP*AP*AP*GP*CP*TP*TP*TP*GP*AP*A)-3')
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)95,9415
ポリマ－95,9174
非ポリマー241
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者・ソフトウェアが定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法, not applicable
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1

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要素

#1: タンパク質 Piwi domain-containing protein


分子量: 52741.414 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharolobus islandicus M.16.4 (古細菌)
遺伝子: M164_1614 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: C4KI01
#2: タンパク質 SiAgo-associated protein1, SiAga1


分子量: 29133.615 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Saccharolobus islandicus M.16.4 (古細菌)
遺伝子: M164_1613 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: C4KI00
#3: RNA鎖 RNA (5'-R(P*UP*CP*AP*AP*AP*GP*CP*UP*UP*AP*GP*AP*UP*AP*CP*CP*CP*UP*GP*GP*A)-3')


分子量: 6697.044 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成
由来: (合成) Saccharolobus islandicus M.16.4 (古細菌)
#4: DNA鎖 DNA (5'-D(*CP*CP*TP*CP*CP*AP*GP*GP*GP*TP*AP*TP*CP*TP*AP*AP*GP*CP*TP*TP*TP*GP*AP*A)-3')


分子量: 7344.753 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成
由来: (合成) Saccharolobus islandicus M.16.4 (古細菌)
#5: 化合物 ChemComp-MG / MAGNESIUM ION / マグネシウムジカチオン


分子量: 24.305 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 式: Mg / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
研究の焦点であるリガンドがあるかY
Has protein modificationY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: SiAgo-SiAga1 complex / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#4 / 由来: MULTIPLE SOURCES
由来(天然)生物種: Sulfolobus islandicus (strain M.16.4 / Kamchatka #3) (古細菌)
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
緩衝液pH: 8
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
急速凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: TFS KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 1500 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1000 nm
撮影電子線照射量: 50 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)

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解析

EMソフトウェア名称: PHENIX / カテゴリ: モデル精密化
CTF補正タイプ: NONE
3次元再構成解像度: 3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 388934 / 対称性のタイプ: POINT
精密化最高解像度: 3 Å
立体化学のターゲット値: REAL-SPACE (WEIGHTED MAP SUM AT ATOM CENTERS)
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.0036722
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.5749264
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d17.2061287
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.0441056
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0051015

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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