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- PDB-8y0a: Crystal structure of LbCas12a in complex with crRNA and 18nt targ... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8y0a
タイトルCrystal structure of LbCas12a in complex with crRNA and 18nt target DNA
要素
  • DNA (27-MER)
  • DNA (5'-D(*CP*GP*TP*CP*CP*TP*TP*TP*AP*TP*T)-3')
  • LbCas12a
  • RNA (38-MER)
キーワードRNA BINDING PROTEIN / CRISPR / Cas12a / crRNA / Complex
機能・相同性
機能・相同性情報


: / CRISPR-associated endonuclease Cpf1 PI domain / : / CRISPR-associated endonuclease Cpf1 REC2 domain / CRISPR-associated endonuclease Cas12a / Cas12a, REC1 domain / Cas12a, RuvC nuclease domain / Cas12a, nuclease domain / Alpha helical recognition lobe domain / Nuclease domain / RuvC nuclease domain
類似検索 - ドメイン・相同性
DNA / DNA (> 10) / RNA / RNA (> 10) / LbCas12a
類似検索 - 構成要素
生物種Lachnospiraceae bacterium ND2006 (バクテリア)
手法X線回折 / シンクロトロン / 分子置換 / 解像度: 3.51 Å
データ登録者Lin, X. / Chen, J. / Liu, L.
資金援助 中国, 1件
組織認可番号国
National Natural Science Foundation of China (NSFC)32022047 中国
引用ジャーナル: Nucleic Acids Res. / 年: 2025
タイトル: DNA target binding-induced pre-crRNA processing in type II and V CRISPR-Cas systems.
著者: Chen, J. / Lin, X. / Xiang, W. / Chen, Y. / Zhao, Y. / Huang, L. / Liu, L.
履歴
登録2024年1月22日登録サイト: PDBJ / 処理サイト: PDBJ
改定 1.02025年1月1日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12025年2月19日Group: Database references / カテゴリ: citation / citation_author
Item: _citation.journal_volume / _citation.year / _citation_author.identifier_ORCID

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: LbCas12a
B: RNA (38-MER)
C: DNA (27-MER)
D: DNA (5'-D(*CP*GP*TP*CP*CP*TP*TP*TP*AP*TP*T)-3')
E: LbCas12a
F: RNA (38-MER)
G: DNA (27-MER)
H: DNA (5'-D(*CP*GP*TP*CP*CP*TP*TP*TP*AP*TP*T)-3')
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)336,77812
ポリマ－336,6818
非ポリマー974
水28816
1
A: LbCas12a
B: RNA (38-MER)
C: DNA (27-MER)
D: DNA (5'-D(*CP*GP*TP*CP*CP*TP*TP*TP*AP*TP*T)-3')
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)168,3896
ポリマ－168,3414
非ポリマー492
水543
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1
Buried area16310 Å2
ΔGint-122 kcal/mol
Surface area64390 Å2
手法PISA
2
E: LbCas12a
F: RNA (38-MER)
G: DNA (27-MER)
H: DNA (5'-D(*CP*GP*TP*CP*CP*TP*TP*TP*AP*TP*T)-3')
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)168,3896
ポリマ－168,3414
非ポリマー492
水181
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1
Buried area16670 Å2
ΔGint-122 kcal/mol
Surface area63630 Å2
手法PISA
単位格子
Length a, b, c (Å)121.777, 142.673, 209.126
Angle α, β, γ (deg.)90.000, 90.000, 90.000
Int Tables number19
Space group name H-MP212121
Space group name HallP2ac2ab
Symmetry operation#1: x,y,z
#2: x+1/2,-y+1/2,-z
#3: -x,y+1/2,-z+1/2
#4: -x+1/2,-y,z+1/2
非結晶学的対称性 (NCS)NCSドメイン:
IDEns-ID
11
21
12
22
13
23
14
24

NCSドメイン領域:
Dom-IDComponent-IDEns-IDBeg auth comp-IDBeg label comp-IDEnd auth comp-IDEnd label comp-IDSelection detailsAuth asym-IDLabel asym-IDAuth seq-IDLabel seq-ID
111METMETARGARG(chain 'A' and (resid 1 through 222 or (resid 223...AA1 - 10761 - 1076
121ASNASNVALVAL(chain 'A' and (resid 1 through 222 or (resid 223...AA1081 - 12261081 - 1226
211METMETARGARG(chain 'E' and (resid 1 through 384 or (resid 385...EE1 - 10761 - 1076
221ASNASNVALVAL(chain 'E' and (resid 1 through 384 or (resid 385...EE1081 - 12261081 - 1226
112AACCchain 'B'BB-20 - 171 - 38
212AACCchain 'F'FF-20 - 171 - 38
113DGDGDGDGchain 'C'CC-17 - 91 - 27
213DGDGDGDGchain 'G'GG-17 - 91 - 27
114DCDCDTDTchain 'D'DD-9 - 11 - 11
214DCDCDTDTchain 'H'HH-9 - 11 - 11

NCSアンサンブル:
ID
1
2
3
4

-
要素

-
DNA鎖 , 2種, 4分子 CGDH

#3: DNA鎖 DNA (27-MER)


分子量: 8357.384 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成
由来: (合成) Lachnospiraceae bacterium ND2006 (バクテリア)
#4: DNA鎖 DNA (5'-D(*CP*GP*TP*CP*CP*TP*TP*TP*AP*TP*T)-3')


分子量: 3290.157 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成
由来: (合成) Lachnospiraceae bacterium ND2006 (バクテリア)

-
タンパク質 / RNA鎖 , 2種, 4分子 AEBF

#1: タンパク質 LbCas12a


分子量: 143888.359 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Lachnospiraceae bacterium ND2006 (バクテリア)
発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A5S8WF58
#2: RNA鎖 RNA (38-MER)


分子量: 12804.658 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Lachnospiraceae bacterium ND2006 (バクテリア)
発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)

-
非ポリマー , 2種, 20分子

#5: 化合物
ChemComp-MG / MAGNESIUM ION / マグネシウムジカチオン


分子量: 24.305 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 合成 / 式: Mg
#6: 水 ChemComp-HOH / water


分子量: 18.015 Da / 分子数: 16 / 由来タイプ: 天然 / 式: H2O

-
詳細

研究の焦点であるリガンドがあるかN
Has protein modificationN

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実験情報

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実験

実験手法: X線回折 / 使用した結晶の数: 1

-
試料調製

結晶マシュー密度: 2.7 Å3/Da / 溶媒含有率: 54.41 %
結晶化温度: 289 K / 手法: 蒸気拡散法, ハンギングドロップ法
詳細: 0.1875 mM lithium sulfate, 75 mM sodium phosphate dibasic, 50 mM citric acid, 16% PEG 1000

-
データ収集

回折平均測定温度: 289 K / Serial crystal experiment: N
放射光源由来: シンクロトロン / サイト: SSRF / ビームライン: BL18U1 / 波長: 0.97915 Å
検出器タイプ: DECTRIS PILATUS 6M / 検出器: PIXEL / 日付: 2022年10月22日
放射プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray
放射波長波長: 0.97915 Å / 相対比: 1
反射解像度: 3.51→50 Å / Num. obs: 46071 / % possible obs: 100 % / 冗長度: 11.3 % / Biso Wilson estimate: 48.66 Å2 / Rpim(I) all: 0.113 / Net I/σ(I): 8
反射 シェル解像度: 3.51→3.58 Å / 冗長度: 10.7 % / Mean I/σ(I) obs: 2.45 / Num. unique obs: 2289 / Rpim(I) all: 0.29 / % possible all: 100

-
解析

ソフトウェア
名称バージョン分類
PHENIX1.17.1_3660精密化
HKL-30007.21データスケーリング
HKL-30007.21データ削減
Coot0.7.2.1モデル構築
PHENIX1.17.1_3660位相決定
精密化構造決定の手法: 分子置換
開始モデル: 5XUZ

5xuz


解像度: 3.51→25.87 Å / SU ML: 0.4102 / 交差検証法: FREE R-VALUE / σ(F): 2.03 / 位相誤差: 31.7435
立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2
Rfactor反射数%反射
Rfree0.2938 2209 4.98 %
Rwork0.2376 42106 -
obs0.2404 44315 96.23 %
溶媒の処理減衰半径: 0.9 Å / VDWプローブ半径: 1.11 Å / 溶媒モデル: FLAT BULK SOLVENT MODEL
原子変位パラメータBiso mean: 54.84 Å2
精密化ステップサイクル: LAST / 解像度: 3.51→25.87 Å
タンパク質核酸リガンド溶媒全体
原子数19922 3160 4 16 23102
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
X-RAY DIFFRACTIONf_bond_d0.003823874
X-RAY DIFFRACTIONf_angle_d0.69632854
X-RAY DIFFRACTIONf_chiral_restr0.04263606
X-RAY DIFFRACTIONf_plane_restr0.0043668
X-RAY DIFFRACTIONf_dihedral_angle_d21.96139244
LS精密化 シェル
解像度 (Å)Rfactor RfreeNum. reflection RfreeRfactor RworkNum. reflection RworkRefine-ID% reflection obs (%)
3.51-3.590.3495920.28571759X-RAY DIFFRACTION65.2
3.59-3.670.34341250.26692263X-RAY DIFFRACTION84.03
3.67-3.760.33221400.27432578X-RAY DIFFRACTION96.08
3.76-3.860.33691320.26322661X-RAY DIFFRACTION98.59
3.86-3.980.32671520.25622681X-RAY DIFFRACTION99.4
3.98-4.110.30781450.25212687X-RAY DIFFRACTION99.82
4.11-4.250.2361290.23222743X-RAY DIFFRACTION99.9
4.25-4.420.27231300.22342690X-RAY DIFFRACTION99.86
4.42-4.620.27221370.22132736X-RAY DIFFRACTION99.97
4.62-4.860.27781490.21582730X-RAY DIFFRACTION99.9
4.86-5.170.27781400.22652720X-RAY DIFFRACTION99.93
5.17-5.560.30591520.22882719X-RAY DIFFRACTION99.79
5.56-6.110.34161350.23532765X-RAY DIFFRACTION99.9
6.11-6.980.27621470.25152748X-RAY DIFFRACTION99.83
6.98-8.740.26371450.22062809X-RAY DIFFRACTION99.73
8.74-25.870.26151590.21082817X-RAY DIFFRACTION97.38

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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