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- PDB-8y08: Crystal structure of LbCas12a in complex with crRNA and 14nt targ... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8y08
タイトルCrystal structure of LbCas12a in complex with crRNA and 14nt target DNA
要素
  • DNA (5'-D(*CP*GP*TP*CP*CP*TP*TP*TP*AP*TP*T)-3')
  • DNA (5'-D(P*CP*TP*TP*TP*AP*CP*TP*GP*GP*AP*TP*GP*CP*GP*TP*AP*AP*AP*GP*GP*AP*CP*G)-3')
  • LbCas12a
  • RNA (35-MER)
キーワードRNA BINDING PROTEIN / CRISPR / Cas12a / crRNA / Complex
機能・相同性
機能・相同性情報


: / CRISPR-associated endonuclease Cpf1 PI domain / : / CRISPR-associated endonuclease Cpf1 REC2 domain / CRISPR-associated endonuclease Cas12a / Cas12a, REC1 domain / Cas12a, RuvC nuclease domain / Cas12a, nuclease domain / Alpha helical recognition lobe domain / Nuclease domain / RuvC nuclease domain
類似検索 - ドメイン・相同性
: / DNA / DNA (> 10) / RNA / RNA (> 10) / LbCas12a
類似検索 - 構成要素
生物種Lachnospiraceae bacterium ND2006 (バクテリア)
手法X線回折 / シンクロトロン / 分子置換 / 解像度: 3.64 Å
データ登録者Lin, X. / Chen, J. / Liu, L.
資金援助 中国, 1件
組織認可番号国
National Natural Science Foundation of China (NSFC)32022047 中国
引用ジャーナル: Nucleic Acids Res. / 年: 2025
タイトル: DNA target binding-induced pre-crRNA processing in type II and V CRISPR-Cas systems.
著者: Chen, J. / Lin, X. / Xiang, W. / Chen, Y. / Zhao, Y. / Huang, L. / Liu, L.
履歴
登録2024年1月22日登録サイト: PDBJ / 処理サイト: PDBJ
改定 1.02025年1月1日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12025年2月19日Group: Database references / カテゴリ: citation / citation_author
Item: _citation.journal_volume / _citation.year / _citation_author.identifier_ORCID

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: LbCas12a
B: RNA (35-MER)
C: DNA (5'-D(P*CP*TP*TP*TP*AP*CP*TP*GP*GP*AP*TP*GP*CP*GP*TP*AP*AP*AP*GP*GP*AP*CP*G)-3')
D: DNA (5'-D(*CP*GP*TP*CP*CP*TP*TP*TP*AP*TP*T)-3')
E: LbCas12a
F: RNA (35-MER)
G: DNA (5'-D(P*CP*TP*TP*TP*AP*CP*TP*GP*GP*AP*TP*GP*CP*GP*TP*AP*AP*AP*GP*GP*AP*CP*G)-3')
H: DNA (5'-D(*CP*GP*TP*CP*CP*TP*TP*TP*AP*TP*T)-3')
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)334,22811
ポリマ－334,2088
非ポリマー213
水181
1
A: LbCas12a
B: RNA (35-MER)
C: DNA (5'-D(P*CP*TP*TP*TP*AP*CP*TP*GP*GP*AP*TP*GP*CP*GP*TP*AP*AP*AP*GP*GP*AP*CP*G)-3')
D: DNA (5'-D(*CP*GP*TP*CP*CP*TP*TP*TP*AP*TP*T)-3')
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)167,1257
ポリマ－167,1044
非ポリマー213
水0
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1
Buried area15230 Å2
ΔGint-114 kcal/mol
Surface area63970 Å2
手法PISA
2
E: LbCas12a
F: RNA (35-MER)
G: DNA (5'-D(P*CP*TP*TP*TP*AP*CP*TP*GP*GP*AP*TP*GP*CP*GP*TP*AP*AP*AP*GP*GP*AP*CP*G)-3')
H: DNA (5'-D(*CP*GP*TP*CP*CP*TP*TP*TP*AP*TP*T)-3')


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)167,1044
ポリマ－167,1044
非ポリマー00
水181
タイプ名称対称操作数
identity operation1_555x,y,z1
Buried area14680 Å2
ΔGint-98 kcal/mol
Surface area64080 Å2
手法PISA
単位格子
Length a, b, c (Å)121.390, 142.292, 208.582
Angle α, β, γ (deg.)90.000, 90.000, 90.000
Int Tables number19
Space group name H-MP212121
Space group name HallP2ac2ab
Symmetry operation#1: x,y,z
#2: x+1/2,-y+1/2,-z
#3: -x,y+1/2,-z+1/2
#4: -x+1/2,-y,z+1/2
非結晶学的対称性 (NCS)NCSドメイン:
IDEns-ID
11
21
12
22
13
23
14
24

NCSドメイン領域:
Dom-IDComponent-IDEns-IDBeg auth comp-IDBeg label comp-IDEnd auth comp-IDEnd label comp-IDSelection detailsAuth asym-IDLabel asym-IDAuth seq-IDLabel seq-ID
111METMETARGARGchain 'A'AA1 - 10761 - 1076
121ASNASNSERSERchain 'A'AA1081 - 12251081 - 1225
211METMETARGARGchain 'E'EE1 - 10761 - 1076
221ASNASNSERSERchain 'E'EE1081 - 12251081 - 1225
112AACCchain 'B'BB-20 - 141 - 35
212AACCchain 'F'FF-20 - 141 - 35
113DCDCDGDGchain 'C'CC-13 - 91 - 23
213DCDCDGDGchain 'G'GG-13 - 91 - 23
114DCDCDTDTchain 'D'DD-9 - 11 - 11
214DCDCDTDTchain 'H'HH-9 - 11 - 11

NCSアンサンブル:
ID
1
2
3
4

-
要素

-
DNA鎖 , 2種, 4分子 CGDH

#3: DNA鎖 DNA (5'-D(P*CP*TP*TP*TP*AP*CP*TP*GP*GP*AP*TP*GP*CP*GP*TP*AP*AP*AP*GP*GP*AP*CP*G)-3')


分子量: 7120.609 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成
由来: (合成) Lachnospiraceae bacterium ND2006 (バクテリア)
#4: DNA鎖 DNA (5'-D(*CP*GP*TP*CP*CP*TP*TP*TP*AP*TP*T)-3')


分子量: 3290.157 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成
由来: (合成) Lachnospiraceae bacterium ND2006 (バクテリア)

-
タンパク質 / RNA鎖 , 2種, 4分子 AEBF

#1: タンパク質 LbCas12a


分子量: 143888.359 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Lachnospiraceae bacterium ND2006 (バクテリア)
発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A5S8WF58
#2: RNA鎖 RNA (35-MER)


分子量: 12804.658 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Lachnospiraceae bacterium ND2006 (バクテリア)
発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)

-
非ポリマー , 2種, 4分子

#5: 化合物 ChemComp-LI / LITHIUM ION / リチウムカチオン


分子量: 6.941 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 合成 / 式: Li
#6: 水 ChemComp-HOH / water


分子量: 18.015 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 式: H2O

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詳細

研究の焦点であるリガンドがあるかN
Has protein modificationN

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実験情報

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実験

実験手法: X線回折 / 使用した結晶の数: 1

-
試料調製

結晶マシュー密度: 2.7 Å3/Da / 溶媒含有率: 54.36 %
結晶化温度: 289 K / 手法: 蒸気拡散法, ハンギングドロップ法
詳細: 0.2 M Li2SO4, 30 mM Na2HPO4, 43.75 mM citric acid, 13% PEG 1000

-
データ収集

回折平均測定温度: 100 K / Serial crystal experiment: N
放射光源由来: シンクロトロン / サイト: SSRF / ビームライン: BL18U1 / 波長: 0.97915 Å
検出器タイプ: DECTRIS PILATUS 6M / 検出器: PIXEL / 日付: 2023年3月15日
放射プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray
放射波長波長: 0.97915 Å / 相対比: 1
反射解像度: 3.64→50 Å / Num. obs: 39629 / % possible obs: 95.9 % / 冗長度: 9.4 % / Biso Wilson estimate: 45.39 Å2 / Rpim(I) all: 0.115 / Net I/σ(I): 6.75
反射 シェル解像度: 3.64→3.71 Å / 冗長度: 9.1 % / Num. unique obs: 1938 / Rpim(I) all: 0.366 / % possible all: 96

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解析

ソフトウェア
名称バージョン分類
PHENIX1.17.1_3660精密化
HKL-30007.21データスケーリング
HKL-30007.21データ削減
Coot0.7.2.1モデル構築
PHENIX1.17.1_3660位相決定
精密化構造決定の手法: 分子置換
開始モデル: 5XUZ

5xuz


解像度: 3.64→26.07 Å / SU ML: 0.5186 / 交差検証法: FREE R-VALUE / σ(F): 1.99 / 位相誤差: 30.5204
立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2
Rfactor反射数%反射
Rfree0.2849 1871 5.02 %
Rwork0.2515 35380 -
obs0.2532 37251 90.5 %
溶媒の処理減衰半径: 0.9 Å / VDWプローブ半径: 1.11 Å / 溶媒モデル: FLAT BULK SOLVENT MODEL
原子変位パラメータBiso mean: 49.36 Å2
精密化ステップサイクル: LAST / 解像度: 3.64→26.07 Å
タンパク質核酸リガンド溶媒全体
原子数19928 2864 3 1 22796
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
X-RAY DIFFRACTIONf_bond_d0.003723548
X-RAY DIFFRACTIONf_angle_d0.68432346
X-RAY DIFFRACTIONf_chiral_restr0.04353544
X-RAY DIFFRACTIONf_plane_restr0.0043656
X-RAY DIFFRACTIONf_dihedral_angle_d18.63414162
LS精密化 シェル
解像度 (Å)Rfactor RfreeNum. reflection RfreeRfactor RworkNum. reflection RworkRefine-ID% reflection obs (%)
3.64-3.740.3967690.32941529X-RAY DIFFRACTION51.3
3.74-3.850.3531220.30342421X-RAY DIFFRACTION81.19
3.85-3.970.34711410.2792639X-RAY DIFFRACTION89.13
3.97-4.110.31581550.2712767X-RAY DIFFRACTION93.92
4.11-4.270.3291670.25182803X-RAY DIFFRACTION94.89
4.27-4.470.28151460.24532823X-RAY DIFFRACTION94.34
4.47-4.70.28641540.23292827X-RAY DIFFRACTION95
4.7-4.990.24441440.23212873X-RAY DIFFRACTION95.69
5-5.380.2411670.24442849X-RAY DIFFRACTION95.32
5.38-5.910.28171580.24372842X-RAY DIFFRACTION94.64
5.91-6.760.33321450.25422904X-RAY DIFFRACTION95.25
6.76-8.460.23161510.24243001X-RAY DIFFRACTION97.71
8.46-26.070.22011520.21743102X-RAY DIFFRACTION97.08

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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