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万見
- PDB-8xgr: ETB-eGt complex bound to endothelin-1 -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8xgr
タイトルETB-eGt complex bound to endothelin-1
要素
  • Camelid antibody VHH fragment
  • Endothelin receptor type B
  • Endothelin-1
  • Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(O) subunit gamma-2,eGt-alpha
  • Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-1
キーワードPEPTIDE BINDING PROTEIN/IMMUNE SYSTEM / SIGNALING PROTEIN / PEPTIDE BINDING PROTEIN-IMMUNE SYSTEM complex
機能・相同性
機能・相同性情報


positive regulation of prostaglandin-endoperoxide synthase activity / endothelin A receptor binding / protein kinase C deactivation / phospholipase D-activating G protein-coupled receptor signaling pathway / rhythmic excitation / peptide hormone secretion / endothelin B receptor binding / cellular response to human chorionic gonadotropin stimulus / meiotic cell cycle process involved in oocyte maturation / positive regulation of artery morphogenesis ...positive regulation of prostaglandin-endoperoxide synthase activity / endothelin A receptor binding / protein kinase C deactivation / phospholipase D-activating G protein-coupled receptor signaling pathway / rhythmic excitation / peptide hormone secretion / endothelin B receptor binding / cellular response to human chorionic gonadotropin stimulus / meiotic cell cycle process involved in oocyte maturation / positive regulation of artery morphogenesis / semaphorin-plexin signaling pathway involved in axon guidance / body fluid secretion / neural crest cell fate commitment / vein smooth muscle contraction / glomerular endothelium development / response to prostaglandin F / sympathetic neuron axon guidance / positive regulation of sarcomere organization / noradrenergic neuron differentiation / positive regulation of renal sodium excretion / histamine secretion / leukocyte activation / maternal process involved in parturition / positive regulation of chemokine-mediated signaling pathway / rough endoplasmic reticulum lumen / pharyngeal arch artery morphogenesis / regulation of D-glucose transmembrane transport / positive regulation of odontogenesis / epithelial fluid transport / endothelin receptor signaling pathway involved in heart process / negative regulation of hormone secretion / cardiac neural crest cell migration involved in outflow tract morphogenesis / Weibel-Palade body / response to leptin / endothelin receptor signaling pathway / response to ozone / podocyte differentiation / positive regulation of cell growth involved in cardiac muscle cell development / renal sodium ion absorption / artery smooth muscle contraction / glomerular filtration / axonogenesis involved in innervation / positive regulation of cation channel activity / cellular response to follicle-stimulating hormone stimulus / cellular response to luteinizing hormone stimulus / negative regulation of nitric-oxide synthase biosynthetic process / regulation of pH / positive regulation of prostaglandin secretion / respiratory gaseous exchange by respiratory system / basal part of cell / cellular response to mineralocorticoid stimulus / positive regulation of smooth muscle contraction / response to salt / positive regulation of urine volume / positive regulation of hormone secretion / regulation of systemic arterial blood pressure by endothelin / vasoconstriction / negative regulation of blood coagulation / : / embryonic heart tube development / dorsal/ventral pattern formation / axon extension / superoxide anion generation / positive regulation of neutrophil chemotaxis / positive regulation of signaling receptor activity / cartilage development / middle ear morphogenesis / cellular response to glucocorticoid stimulus / Activation of G protein gated Potassium channels / G-protein activation / G beta:gamma signalling through PI3Kgamma / Prostacyclin signalling through prostacyclin receptor / G beta:gamma signalling through PLC beta / ADP signalling through P2Y purinoceptor 1 / Thromboxane signalling through TP receptor / Presynaptic function of Kainate receptors / G beta:gamma signalling through CDC42 / Inhibition of voltage gated Ca2+ channels via Gbeta/gamma subunits / Glucagon-type ligand receptors / G alpha (12/13) signalling events / G beta:gamma signalling through BTK / ADP signalling through P2Y purinoceptor 12 / Adrenaline,noradrenaline inhibits insulin secretion / negative regulation of protein metabolic process / Cooperation of PDCL (PhLP1) and TRiC/CCT in G-protein beta folding / Thrombin signalling through proteinase activated receptors (PARs) / Ca2+ pathway / prostaglandin biosynthetic process / Extra-nuclear estrogen signaling / G alpha (z) signalling events / G alpha (s) signalling events / cellular response to fatty acid / G alpha (q) signalling events / nitric oxide transport / G alpha (i) signalling events / Glucagon-like Peptide-1 (GLP1) regulates insulin secretion / positive regulation of heart rate / branching involved in blood vessel morphogenesis / Vasopressin regulates renal water homeostasis via Aquaporins / positive regulation of cardiac muscle hypertrophy
類似検索 - 分子機能
Endothelin-like toxin / Endothelin-like toxin, conserved site / Endothelin / Endothelin family / Endothelin family signature. / Endothelin / G-protein, gamma subunit / G-protein gamma subunit domain profile. / G-protein gamma-like domain / G-protein gamma-like domain superfamily ...Endothelin-like toxin / Endothelin-like toxin, conserved site / Endothelin / Endothelin family / Endothelin family signature. / Endothelin / G-protein, gamma subunit / G-protein gamma subunit domain profile. / G-protein gamma-like domain / G-protein gamma-like domain superfamily / GGL domain / G protein gamma subunit-like motifs / GGL domain
類似検索 - ドメイン・相同性
Endothelin-1 / Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(O) subunit gamma-2
類似検索 - 構成要素
生物種Bos taurus (ウシ)
Rattus rattus (エジプトネズミ)
Lama glama (ラマ)
Homo sapiens (ヒト)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.2 Å
データ登録者Oshima, H.S. / Sano, F.K. / Akasaka, H. / Iwama, A. / Shihoya, W. / Nureki, O.
資金援助 日本, 1件
組織認可番号国
Japan Society for the Promotion of Science (JSPS)21H05037 日本
引用ジャーナル: Biochem Biophys Res Commun / 年: 2024
タイトル: Optimizing cryo-EM structural analysis of G-coupling receptors via engineered G and Nb35 application.
著者: Hidetaka S Oshima / Fumiya K Sano / Hiroaki Akasaka / Aika Iwama / Wataru Shihoya / Osamu Nureki /
要旨: Cryo-EM single particle analysis has recently facilitated the high-resolution structural determination of numerous GPCR-G complexes. Diverse methodologies have been devised with this trend, and in ...Cryo-EM single particle analysis has recently facilitated the high-resolution structural determination of numerous GPCR-G complexes. Diverse methodologies have been devised with this trend, and in the case of GPCR-G complexes, scFv16, an antibody that recognizes the intricate interface of the complex, has been mainly implemented to stabilize the complex. However, owing to their flexibility and heterogeneity, structural determinations of GPCR-G complexes remain both challenging and resource-intensive. By employing eGα, which exhibits binding affinity to modified nanobody Nb35, the cryo-EM structure of Rhodopsin-eGα complex was previously reported. Using this modified G protein, we determined the structure of the ET-eG complex bound to the modified Nb35. The determined structure of ET receptor was the same as the previously reported ET-G complex, and the resulting dataset demonstrated significantly improved anisotropy. This modified G protein will be utilized for the structural determination of other GPCR-G complexes.
履歴
登録2023年12月15日登録サイト: PDBJ / 処理サイト: PDBJ
改定 1.02024年4月3日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年10月9日Group: Data collection / Structure summary
カテゴリ: em_admin / pdbx_entry_details / pdbx_modification_feature
Item: _em_admin.last_update

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
G: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(O) subunit gamma-2,eGt-alpha
B: Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-1
N: Camelid antibody VHH fragment
R: Endothelin receptor type B
L: Endothelin-1


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)176,8555
ポリマ－176,8555
非ポリマー00
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法, not applicable
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551

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要素

#1: タンパク質 Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(O) subunit gamma-2,eGt-alpha / G gamma-I


分子量: 48998.785 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Bos taurus (ウシ) / 遺伝子: GNG2
発現宿主: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
参照: UniProt: P63212
#2: タンパク質 Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-1


分子量: 40470.105 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Rattus rattus (エジプトネズミ)
発現宿主: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
#3: 抗体 Camelid antibody VHH fragment


分子量: 17395.631 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Lama glama (ラマ)
発現宿主: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
#4: タンパク質 Endothelin receptor type B


分子量: 67492.219 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: EDNRB, ETRB
発現宿主: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
#5: タンパク質・ペプチド Endothelin-1 / Preproendothelin-1 / PPET1


分子量: 2497.951 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P05305
Has protein modificationY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Complex of Endothelin-1, ETB, eGt trimer and Nb35* / タイプ: COMPLEX / Entity ID: #4-#5, #2-#3 / 由来: MULTIPLE SOURCES
分子量実験値: NO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト)
由来(組換発現)生物種: Spodoptera frugiperda (ツマジロクサヨトウ)
緩衝液pH: 8
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
急速凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 1600 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 800 nm
撮影電子線照射量: 50 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k)

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解析

CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
3次元再構成解像度: 3.2 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 52285 / 対称性のタイプ: POINT
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal数
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.0038456
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.5711437
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d14.0813076
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.0391301
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0051443

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

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  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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