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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8w8f | ||||||
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タイトル | human co-transcriptional RNA capping enzyme RNGTT-CMTR1 | ||||||
要素 |
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キーワード | TRANSCRIPTION / RNA polymerase II / capping / RNGTT / CMTR1 | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 RNA guanylyltransferase activity / inorganic triphosphate phosphatase activity / negative regulation of DNA-templated transcription, elongation / DSIF complex / regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / B-WICH complex positively regulates rRNA expression / RNA Polymerase I Transcription Initiation / RNA Polymerase I Promoter Escape / RNA Polymerase I Transcription Termination / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 1 Promoter ...RNA guanylyltransferase activity / inorganic triphosphate phosphatase activity / negative regulation of DNA-templated transcription, elongation / DSIF complex / regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / B-WICH complex positively regulates rRNA expression / RNA Polymerase I Transcription Initiation / RNA Polymerase I Promoter Escape / RNA Polymerase I Transcription Termination / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 1 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 2 Promoter / RNA Polymerase III Transcription Initiation From Type 3 Promoter / Formation of RNA Pol II elongation complex / Formation of the Early Elongation Complex / Transcriptional regulation by small RNAs / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / FGFR2 alternative splicing / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / mRNA Capping / mRNA Splicing - Minor Pathway / Processing of Capped Intron-Containing Pre-mRNA / RNA Polymerase II Promoter Escape / RNA Polymerase II Transcription Pre-Initiation And Promoter Opening / RNA Polymerase II Transcription Initiation / RNA Polymerase II Transcription Elongation / RNA Polymerase II Transcription Initiation And Promoter Clearance / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Estrogen-dependent gene expression / Formation of TC-NER Pre-Incision Complex / Dual incision in TC-NER / Gap-filling DNA repair synthesis and ligation in TC-NER / mRNA Splicing - Major Pathway / mRNA 5'-triphosphate monophosphatase activity / mRNA 5'-phosphatase / polynucleotide 5'-phosphatase activity / positive regulation of DNA-templated transcription, elongation / Abortive elongation of HIV-1 transcript in the absence of Tat / transcription elongation-coupled chromatin remodeling / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE during HIV infection / RNA Pol II CTD phosphorylation and interaction with CE / Formation of the Early Elongation Complex / Formation of the HIV-1 Early Elongation Complex / mRNA Capping / RNA polymerase III activity / maintenance of transcriptional fidelity during transcription elongation by RNA polymerase II / RNA polymerase II complex binding / negative regulation of transcription elongation by RNA polymerase II / Pausing and recovery of Tat-mediated HIV elongation / Tat-mediated HIV elongation arrest and recovery / positive regulation of macroautophagy / phosphoprotein phosphatase activity / positive regulation of nuclear-transcribed mRNA poly(A) tail shortening / HIV elongation arrest and recovery / Pausing and recovery of HIV elongation / RNA polymerase II transcribes snRNA genes / RNA polymerase II activity / Tat-mediated elongation of the HIV-1 transcript / 7-methylguanosine mRNA capping / Formation of HIV-1 elongation complex containing HIV-1 Tat / transcription-coupled nucleotide-excision repair / tRNA transcription by RNA polymerase III / RNA polymerase I activity / RNA polymerase I complex / RNA polymerase III complex / positive regulation of translational initiation / Formation of HIV elongation complex in the absence of HIV Tat / RNA polymerase II, core complex / RNA Polymerase II Transcription Elongation / RNA processing / Formation of RNA Pol II elongation complex / RNA Polymerase II Pre-transcription Events / translation initiation factor binding / TP53 Regulates Transcription of DNA Repair Genes / transcription initiation at RNA polymerase II promoter / transcription elongation by RNA polymerase II / P-body / ribonucleoside binding / fibrillar center / DNA-directed 5'-3' RNA polymerase activity / DNA-directed RNA polymerase / mRNA processing / mRNA guanylyltransferase activity / single-stranded DNA binding / mRNA guanylyltransferase / methyltransferase cap1 / mRNA (nucleoside-2'-O-)-methyltransferase activity / methylation / transcription by RNA polymerase II / nucleic acid binding / single-stranded RNA binding / protein dimerization activity / protein heterodimerization activity / intracellular membrane-bounded organelle / mRNA binding / nucleotide binding / DNA-templated transcription / chromatin binding / regulation of DNA-templated transcription / GTP binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Homo sapiens (ヒト) Sus scrofa (ブタ) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 4 Å | ||||||
データ登録者 | Li, Y. / Wang, Q. / Xu, Y. / Li, Z. | ||||||
資金援助 | 1件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2024 タイトル: Structures of co-transcriptional RNA capping enzymes on paused transcription complex. 著者: Yan Li / Qianmin Wang / Yanhui Xu / Ze Li / 要旨: The 5'-end capping of nascent pre-mRNA represents the initial step in RNA processing, with evidence demonstrating that guanosine addition and 2'-O-ribose methylation occur in tandem with early steps ...The 5'-end capping of nascent pre-mRNA represents the initial step in RNA processing, with evidence demonstrating that guanosine addition and 2'-O-ribose methylation occur in tandem with early steps of transcription by RNA polymerase II, especially at the pausing stage. Here, we determine the cryo-EM structures of the paused elongation complex in complex with RNGTT, as well as the paused elongation complex in complex with RNGTT and CMTR1. Our findings show the simultaneous presence of RNGTT and the NELF complex bound to RNA polymerase II. The NELF complex exhibits two conformations, one of which shows a notable rearrangement of NELF-A/D compared to that of the paused elongation complex. Moreover, CMTR1 aligns adjacent to RNGTT on the RNA polymerase II stalk. Our structures indicate that RNGTT and CMTR1 directly bind the paused elongation complex, illuminating the mechanism by which 5'-end capping of pre-mRNA during transcriptional pausing. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8w8f.cif.gz | 1.1 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8w8f.ent.gz | 860.4 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8w8f.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8w8f_validation.pdf.gz | 1.5 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8w8f_full_validation.pdf.gz | 1.5 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8w8f_validation.xml.gz | 131.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8w8f_validation.cif.gz | 213 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/w8/8w8f ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/w8/8w8f | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 37353MC 8w8eC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-タンパク質 , 3種, 3分子 abL
#1: タンパク質 | 分子量: 68655.695 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 細胞株: HEK Expi293 / 遺伝子: RNGTT, CAP1A / 細胞株 (発現宿主): Expi293 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) 参照: UniProt: O60942, mRNA 5'-phosphatase, mRNA guanylyltransferase |
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#2: タンパク質 | 分子量: 95454.773 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: CMTR1, FTSJD2, KIAA0082, MTR1 / 細胞株 (発現宿主): Expi293 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: Q8N1G2, methyltransferase cap1 |
#14: タンパク質 | 分子量: 7018.244 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A4X1TRS6 |
-DNA-directed RNA polymerase ... , 9種, 9分子 ABCDEFGIK
#3: タンパク質 | 分子量: 217450.078 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A8D1DPV6 |
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#4: タンパク質 | 分子量: 134041.422 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A4X1TVZ5, DNA-directed RNA polymerase |
#5: タンパク質 | 分子量: 30997.557 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A481DF93 |
#6: タンパク質 | 分子量: 16331.255 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A481BYI6 |
#7: タンパク質 | 分子量: 24644.318 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A4X1VTX4 |
#8: タンパク質 | 分子量: 14477.001 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A4X1VEK9 |
#9: タンパク質 | 分子量: 19314.283 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A4X1VKG7 |
#11: タンパク質 | 分子量: 14541.221 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: P60899 |
#13: タンパク質 | 分子量: 13310.284 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: F1RKE4 |
-DNA-directed RNA polymerases I, II, and III subunit ... , 2種, 2分子 HJ
#10: タンパク質 | 分子量: 17162.273 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: I3LCB2 |
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#12: タンパク質 | 分子量: 7655.123 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) Sus scrofa (ブタ) / 参照: UniProt: A0A493TD97 |
-DNA鎖 , 2種, 2分子 NT
#15: DNA鎖 | 分子量: 14932.533 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Homo sapiens (ヒト) |
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#17: DNA鎖 | 分子量: 14672.335 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Homo sapiens (ヒト) |
-RNA鎖 , 1種, 1分子 P
#16: RNA鎖 | 分子量: 5528.404 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Homo sapiens (ヒト) |
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-Transcription elongation factor ... , 2種, 2分子 YZ
#18: タンパク質 | 分子量: 13508.496 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: SUPT4H1, SPT4H, SUPT4H / 細胞株 (発現宿主): Expi293 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: P63272 |
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#19: タンパク質 | 分子量: 121145.477 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 遺伝子: SUPT5H, SPT5, SPT5H / 細胞株 (発現宿主): Expi293 / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト) / 参照: UniProt: O00267 |
-非ポリマー , 3種, 10分子
#20: 化合物 | ChemComp-MG / | ||
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#21: 化合物 | ChemComp-ZN / #22: 化合物 | ChemComp-GTP / | |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 |
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由来(天然) |
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由来(組換発現) | 生物種: Homo sapiens (ヒト) | ||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 8 | ||||||||||||||||||||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE-PROPANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1500 nm |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
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3次元再構成 | 解像度: 4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 92000 / 対称性のタイプ: POINT |