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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8v9l | ||||||||||||
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タイトル | Cryo-EM structure of the Mycobacterium smegmatis 70S ribosome in complex with hibernation factor Msmeg1130 (Balon) and MsmegEF-Tu(GDP) (Composite structure 6) | ||||||||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME / cryo-EM / mycobacteria / hibernation / Msmeg1130 / Balon / MsmegEF-Tu | ||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 translation elongation factor activity / large ribosomal subunit / ribosomal small subunit biogenesis / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / small ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic small ribosomal subunit ...translation elongation factor activity / large ribosomal subunit / ribosomal small subunit biogenesis / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / small ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / cytosolic small ribosomal subunit / cytosolic large ribosomal subunit / cytoplasmic translation / tRNA binding / rRNA binding / negative regulation of translation / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation / GTPase activity / mRNA binding / GTP binding / RNA binding / zinc ion binding / metal ion binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
生物種 | Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) | ||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Rybak, M.Y. / Helena-Bueno, K. / Hill, C.H. / Melnikov, S.V. / Gagnon, M.G. | ||||||||||||
資金援助 | 米国, 3件
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引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2024 タイトル: A new family of bacterial ribosome hibernation factors. 著者: Karla Helena-Bueno / Mariia Yu Rybak / Chinenye L Ekemezie / Rudi Sullivan / Charlotte R Brown / Charlotte Dingwall / Arnaud Baslé / Claudia Schneider / James P R Connolly / James N Blaza / ...著者: Karla Helena-Bueno / Mariia Yu Rybak / Chinenye L Ekemezie / Rudi Sullivan / Charlotte R Brown / Charlotte Dingwall / Arnaud Baslé / Claudia Schneider / James P R Connolly / James N Blaza / Bálint Csörgő / Patrick J Moynihan / Matthieu G Gagnon / Chris H Hill / Sergey V Melnikov / 要旨: To conserve energy during starvation and stress, many organisms use hibernation factor proteins to inhibit protein synthesis and protect their ribosomes from damage. In bacteria, two families of ...To conserve energy during starvation and stress, many organisms use hibernation factor proteins to inhibit protein synthesis and protect their ribosomes from damage. In bacteria, two families of hibernation factors have been described, but the low conservation of these proteins and the huge diversity of species, habitats and environmental stressors have confounded their discovery. Here, by combining cryogenic electron microscopy, genetics and biochemistry, we identify Balon, a new hibernation factor in the cold-adapted bacterium Psychrobacter urativorans. We show that Balon is a distant homologue of the archaeo-eukaryotic translation factor aeRF1 and is found in 20% of representative bacteria. During cold shock or stationary phase, Balon occupies the ribosomal A site in both vacant and actively translating ribosomes in complex with EF-Tu, highlighting an unexpected role for EF-Tu in the cellular stress response. Unlike typical A-site substrates, Balon binds to ribosomes in an mRNA-independent manner, initiating a new mode of ribosome hibernation that can commence while ribosomes are still engaged in protein synthesis. Our work suggests that Balon-EF-Tu-regulated ribosome hibernation is a ubiquitous bacterial stress-response mechanism, and we demonstrate that putative Balon homologues in Mycobacteria bind to ribosomes in a similar fashion. This finding calls for a revision of the current model of ribosome hibernation inferred from common model organisms and holds numerous implications for how we understand and study ribosome hibernation. | ||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8v9l.cif.gz | 3.4 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8v9l.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 8v9l.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/v9/8v9l ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/v9/8v9l | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | 43076MC 8rd8C 8rdvC 8rdwC 8v9jC 8v9kC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-RNA鎖 , 5種, 5分子 avyAB
#1: RNA鎖 | 分子量: 495373.656 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: GenBank: 118168627 |
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#22: RNA鎖 | 分子量: 1179.706 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 |
#24: RNA鎖 | 分子量: 24531.672 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 |
#26: RNA鎖 | 分子量: 1026283.438 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: GenBank: 118168627 |
#27: RNA鎖 | 分子量: 38061.816 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: GenBank: 118168627 |
-30S Ribosomal Protein ... , 15種, 15分子 bcdfgijklmpqstu
#2: タンパク質 | 分子量: 30145.230 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QVB8 |
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#3: タンパク質 | 分子量: 30191.227 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSD7 |
#4: タンパク質 | 分子量: 23415.787 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSL7 |
#6: タンパク質 | 分子量: 10991.637 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0A2U9Q0X2 |
#7: タンパク質 | 分子量: 17660.375 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QS97 |
#9: タンパク質 | 分子量: 16794.365 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSP9 |
#10: タンパク質 | 分子量: 11454.313 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSD0 |
#11: タンパク質 | 分子量: 14671.762 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSL6 |
#12: タンパク質 | 分子量: 13896.366 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QS96 |
#13: タンパク質 | 分子量: 14249.619 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSL5 |
#16: タンパク質 | 分子量: 16795.207 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QV37 |
#17: タンパク質 | 分子量: 11127.002 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSE0 |
#19: タンパク質 | 分子量: 10800.602 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSD5 |
#20: タンパク質 | 分子量: 9556.104 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0R102 |
#21: タンパク質・ペプチド | 分子量: 4164.300 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 |
-Small ribosomal subunit protein ... , 5種, 5分子 ehnor
#5: タンパク質 | 分子量: 21946.090 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSG6 |
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#8: タンパク質 | 分子量: 14492.638 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSG3 |
#14: タンパク質 | 分子量: 6976.409 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSG2 |
#15: タンパク質 | 分子量: 10368.097 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QVQ3 |
#18: タンパク質 | 分子量: 9524.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0R7F7 |
-タンパク質 , 2種, 2分子 xz
#23: タンパク質 | 分子量: 43792.586 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: MsmegEF-Tu 由来: (組換発現) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 遺伝子: tuf / プラスミド: pET28-SMT3-MsmegEF-Tu / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: A0QS98 |
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#25: タンパク質 | 分子量: 41390.672 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 詳細: MSMEG_1130 由来: (組換発現) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 遺伝子: MSMEG_1130 / プラスミド: pET28-SMT3-MSMEG_1130 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: A0QRI6 |
-50S ribosomal protein ... , 20種, 20分子 CDGHIJMNPRWXY1246789
#28: タンパク質 | 分子量: 30425.945 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSD4 |
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#29: タンパク質 | 分子量: 23011.393 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSD1 |
#32: タンパク質 | 分子量: 19483.361 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSG4 |
#33: タンパク質 | 分子量: 15949.253 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0R7F6 |
#34: タンパク質 | 分子量: 18035.736 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QS62 |
#35: タンパク質 | 分子量: 15023.374 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QS45 |
#37: タンパク質 | 分子量: 13400.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSF9 |
#38: タンパク質 | 分子量: 15602.244 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSG8 |
#40: タンパク質 | 分子量: 21892.246 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSL9 |
#42: タンパク質 | 分子量: 12892.806 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QV42 |
#47: タンパク質 | 分子量: 11228.946 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSG0 |
#48: タンパク質 | 分子量: 22571.078 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0R3D2 |
#49: タンパク質 | 分子量: 9249.582 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0R150 |
#51: タンパク質 | 分子量: 8790.895 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSD9 |
#52: タンパク質 | 分子量: 7022.147 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSG7 |
#54: タンパク質 | 分子量: 6467.719 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0R3I9 |
#56: タンパク質・ペプチド | 分子量: 5522.580 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0R7K0 |
#57: タンパク質 | 分子量: 7298.505 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QYU7 |
#58: タンパク質・ペプチド | 分子量: 4341.277 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSL4 |
#59: タンパク質・ペプチド | 分子量: 2841.375 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QTP4 |
-Large ribosomal subunit protein ... , 12種, 12分子 EFLOQSTUVZ35
#30: タンパク質 | 分子量: 22920.949 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSD2 |
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#31: タンパク質 | 分子量: 21152.328 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSG1 |
#36: タンパク質 | 分子量: 16146.689 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSP8 |
#39: タンパク質 | 分子量: 15627.065 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSD8 |
#41: タンパク質 | 分子量: 13711.728 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: I7FGD9 |
#43: タンパク質 | 分子量: 14494.693 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QYU6 |
#44: タンパク質 | 分子量: 11055.894 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0R151 |
#45: タンパク質 | 分子量: 16353.600 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSD6 |
#46: タンパク質 | 分子量: 11047.836 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QSD3 |
#50: タンパク質 | 分子量: 6891.016 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: I7FJ52 |
#53: タンパク質 | 分子量: 8312.485 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0R215 |
#55: タンパク質 | 分子量: 6468.501 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) 株: MC2155 / 参照: UniProt: A0QS39 |
-非ポリマー , 2種, 3分子
#60: 化合物 | ChemComp-GDP / |
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#61: 化合物 |
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Cryo-EM structure of the Mycobacterium smegmatis 70S ribosome in complex with hibernation factor Msmeg1130 (Balon) and MsmegEF-Tu(GDP) (Composite structure 6) タイプ: RIBOSOME / Entity ID: #1-#59 / 由来: NATURAL |
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分子量 | 値: 2.6 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Mycolicibacterium smegmatis MC2 155 (バクテリア) |
緩衝液 | pH: 7.5 詳細: 20 mM HEPES-KOH, 60 mM KCl, 10 mM MgCl2, 1 mM dithiothreitol |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: GOLD / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/1 |
急速凍結 | 装置: LEICA EM GP / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 85 % / 凍結前の試料温度: 295 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: TFS KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 105000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 100 µm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 40.12 e/Å2 / 検出モード: COUNTING フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 10161 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C1 (非対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 101909 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | PDB-ID: 5o61 Accession code: 5o61 / Source name: PDB / タイプ: experimental model | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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