[日本語] English
万見
- PDB-8v30: Smooth Muscle Gamma Actin (ACTG2) Filament Mutant R40C -

+
データを開く


IDまたはキーワード:

読み込み中...

-
基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8v30
タイトルSmooth Muscle Gamma Actin (ACTG2) Filament Mutant R40C
要素
  • Actin, gamma-enteric smooth muscle
  • Phalloidin
キーワードSTRUCTURAL PROTEIN / Filament / Actin / Smooth Muscle / CYTOSOLIC PROTEIN
機能・相同性
機能・相同性情報


myosin filament / mesenchyme migration / Smooth Muscle Contraction / filopodium / cell periphery / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / lamellipodium / cell body / blood microparticle / cytoskeleton ...myosin filament / mesenchyme migration / Smooth Muscle Contraction / filopodium / cell periphery / 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与 / lamellipodium / cell body / blood microparticle / cytoskeleton / hydrolase activity / positive regulation of gene expression / extracellular space / extracellular exosome / ATP binding / cytosol / cytoplasm
類似検索 - 分子機能
Actins signature 1. / Actin, conserved site / Actins signature 2. / Actin/actin-like conserved site / Actins and actin-related proteins signature. / Actin / Actin family / Actin / ATPase, nucleotide binding domain
類似検索 - ドメイン・相同性
: / ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE / Actin, gamma-enteric smooth muscle
類似検索 - 構成要素
生物種Homo sapiens (ヒト)
synthetic construct (人工物)
手法電子顕微鏡法 / らせん対称体再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.54 Å
データ登録者Palmer, N.J. / Carman, P.J. / Ceron, R.H. / Dominguez, R.
資金援助 米国, 1件
組織認可番号国
National Institutes of Health/National Institute of Diabetes and Digestive and Kidney Disease (NIH/NIDDK) 米国
引用ジャーナル: Sci Adv / 年: 2024
タイトル: Molecular mechanisms linking missense ACTG2 mutations to visceral myopathy.
著者: Rachel H Ceron / Faviolla A Báez-Cruz / Nicholas J Palmer / Peter J Carman / Malgorzata Boczkowska / Robert O Heuckeroth / E Michael Ostap / Roberto Dominguez /
要旨: Visceral myopathy is a life-threatening disease characterized by muscle weakness in the bowel, bladder, and uterus. Mutations in smooth muscle γ-actin (ACTG2) are the most common cause of the ...Visceral myopathy is a life-threatening disease characterized by muscle weakness in the bowel, bladder, and uterus. Mutations in smooth muscle γ-actin (ACTG2) are the most common cause of the disease, but the mechanisms by which the mutations alter muscle function are unknown. Here, we examined four prevalent ACTG2 mutations (R40C, R148C, R178C, and R257C) that cause different disease severity and are spread throughout the actin fold. R178C displayed premature degradation, R148C disrupted interactions with actin-binding proteins, R40C inhibited polymerization, and R257C destabilized filaments. Because these mutations are heterozygous, we also analyzed 50/50 mixtures with wild-type (WT) ACTG2. The WT/R40C mixture impaired filament nucleation by leiomodin 1, and WT/R257C produced filaments that were easily fragmented by smooth muscle myosin. Smooth muscle tropomyosin isoform Tpm1.4 partially rescued the defects of R40C and R257C. Cryo-electron microscopy structures of filaments formed by R40C and R257C revealed disrupted intersubunit contacts. The biochemical and structural properties of the mutants correlate with their genotype-specific disease severity.
履歴
登録2023年11月25日登録サイト: RCSB / 処理サイト: RCSB
改定 1.02024年5月1日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年6月12日Group: Database references / カテゴリ: citation
Item: _citation.country / _citation.journal_abbrev ..._citation.country / _citation.journal_abbrev / _citation.journal_id_CSD / _citation.journal_id_ISSN / _citation.journal_volume / _citation.page_first / _citation.page_last / _citation.pdbx_database_id_DOI / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _citation.year

-
構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

-
集合体

登録構造単位
A: Actin, gamma-enteric smooth muscle
B: Actin, gamma-enteric smooth muscle
C: Actin, gamma-enteric smooth muscle
D: Actin, gamma-enteric smooth muscle
E: Actin, gamma-enteric smooth muscle
F: Phalloidin
G: Phalloidin
H: Phalloidin
I: Phalloidin
J: Phalloidin
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)215,71120
ポリマ－213,45310
非ポリマー2,25810
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法, not applicable
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551

-
要素

#1: タンパク質
Actin, gamma-enteric smooth muscle / Alpha-actin-3 / Gamma-2-actin / Smooth muscle gamma-actin


分子量: 41881.766 Da / 分子数: 5 / 変異: R40C / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Homo sapiens (ヒト) / 組織: Smooth Muscle / 遺伝子: ACTG2, ACTA3, ACTL3, ACTSG / 細胞株 (発現宿主): Expi293F / 発現宿主: Homo sapiens (ヒト)
参照: UniProt: P63267, 加水分解酵素; 酸無水物に作用; 酸無水物に作用・細胞または細胞小器官の運動に関与
#2: タンパク質・ペプチド
Phalloidin


タイプ: Peptide-like / クラス: 毒素 / 分子量: 808.899 Da / 分子数: 5 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) / 参照: BIRD: PRD_002366
#3: 化合物
ChemComp-ADP / ADENOSINE-5'-DIPHOSPHATE / ADP


分子量: 427.201 Da / 分子数: 5 / 由来タイプ: 合成 / 式: C10H15N5O10P2 / コメント: ADP, エネルギー貯蔵分子*YM
#4: 化合物
ChemComp-MG / MAGNESIUM ION / マグネシウムジカチオン


分子量: 24.305 Da / 分子数: 5 / 由来タイプ: 合成 / 式: Mg
研究の焦点であるリガンドがあるかN

-
実験情報

-
実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: FILAMENT / ３次元再構成法: らせん対称体再構成法

-
試料調製

構成要素名称: ACTG2 R40C Filament / タイプ: COMPLEX
詳細: ACTG2 filaments, purified from Expi293 cells R40C mutation
Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT
分子量単位: KILODALTONS/NANOMETER / 実験値: NO
由来(天然)生物種: Homo sapiens (ヒト) / 組織: Smooth Muscle
由来(組換発現)生物種: Homo sapiens (ヒト) / 細胞: Expi293F
緩衝液pH: 8 / 詳細: Actin F-buffer
緩衝液成分
ID濃度名称式Buffer-ID
15 mMTrisC4H11NO31
2100 mMPotassium ChlorideKCl1
30.2 mMCalcium ChlorideCaCl21
41 mMEGTAC14H24N2O101
51 mMMagnesium ChlorideMgCl21
60.2 mMATPC10H16N5O13P31
75 uMPhalloidinC35H48N8O11S1
試料濃度: 0.168 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES / 詳細: ACTG2 F-actin in the ADP state. R40C mutation
試料支持グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 200 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3
急速凍結装置: FEI VITROBOT MARK III / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K / 詳細: Blot Force: 0 Blot Time: 2.5 s

-
電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: SPOT SCAN
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 倍率（公称値）: 81000 X / 最大 デフォーカス（公称値）: 2500 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 500 nm
試料ホルダ凍結剤: NITROGEN
試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER
撮影電子線照射量: 45 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 実像数: 4461

-
解析

EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ詳細
1cryoSPARC4粒子像選択Filament tracer job
2EPU画像取得
4cryoSPARC4CTF補正CTF correction job
7Coot0.9.8.3モデルフィッティング
12cryoSPARC4３次元再構成Helix Refinement
13PHENIX1.20.1モデル精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
らせん対称回転角度/サブユニット: -166.6 ° / 軸方向距離/サブユニット: 27.5 Å / らせん対称軸の対称性: C1
3次元再構成解像度: 2.54 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 3400116 / 対称性のタイプ: HELICAL
原子モデル構築プロトコル: RIGID BODY FIT / 空間: REAL
原子モデル構築PDB-ID: 8F8P

8f8p


Accession code: 8F8P / Source name: PDB / タイプ: experimental model

+
万見について

-
お知らせ

-
2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

-
2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

+
2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

+
2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

+
2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

-
万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

他の情報も見る