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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8tsw | ||||||
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タイトル | S. thermodepolymerans KpsMT-KpsE Apo 1 | ||||||
要素 |
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キーワード | MEMBRANE PROTEIN / ABC transporter / Capsular polysaccharide | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 lipopolysaccharide transport / ABC-type transporter activity / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / ATP hydrolysis activity / ATP binding / membrane / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Caldimonas thermodepolymerans (バクテリア) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å | ||||||
データ登録者 | Kuklewicz, J. / Zimmer, J. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: Nature / 年: 2024 タイトル: Molecular insights into capsular polysaccharide secretion. 著者: Jeremi Kuklewicz / Jochen Zimmer / 要旨: Capsular polysaccharides (CPSs) fortify the cell boundaries of many commensal and pathogenic bacteria. Through the ABC-transporter-dependent biosynthesis pathway, CPSs are synthesized intracellularly ...Capsular polysaccharides (CPSs) fortify the cell boundaries of many commensal and pathogenic bacteria. Through the ABC-transporter-dependent biosynthesis pathway, CPSs are synthesized intracellularly on a lipid anchor and secreted across the cell envelope by the KpsMT ABC transporter associated with the KpsE and KpsD subunits. Here we use structural and functional studies to uncover crucial steps of CPS secretion in Gram-negative bacteria. We show that KpsMT has broad substrate specificity and is sufficient for the translocation of CPSs across the inner bacterial membrane, and we determine the cell surface organization and localization of CPSs using super-resolution fluorescence microscopy. Cryo-electron microscopy analyses of the KpsMT-KpsE complex in six different states reveal a KpsE-encaged ABC transporter, rigid-body conformational rearrangements of KpsMT during ATP hydrolysis and recognition of a glycolipid inside a membrane-exposed electropositive canyon. In vivo CPS secretion assays underscore the functional importance of canyon-lining basic residues. Combined, our analyses suggest a molecular model of CPS secretion by ABC transporters. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8tsw.cif.gz | 512.3 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8tsw.ent.gz | 414.6 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8tsw.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ts/8tsw ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ts/8tsw | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
関連構造データ | 41601MC 8tshC 8tsiC 8tslC 8tt3C 8tunC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 26224.729 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Caldimonas thermodepolymerans (バクテリア) 遺伝子: C1702_11080 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A2S5T4B3 #2: タンパク質 | 分子量: 30800.959 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Caldimonas thermodepolymerans (バクテリア) 遺伝子: C1702_11075 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A2S5T447 #3: タンパク質 | 分子量: 44057.266 Da / 分子数: 8 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Caldimonas thermodepolymerans (バクテリア) 遺伝子: C1702_11085 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A2S5T4A0 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: ABC transporter KpsMT in complex with polysaccharide co-polymerase KpsE in Apo 1 state タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Caldimonas thermodepolymerans (バクテリア) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1800 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON III (4k x 4k) |
-解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
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3次元再構成 | 解像度: 3.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 43811 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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