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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8t5h | |||||||||
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タイトル | Cryo-EM studies of the interplay between uS2 ribosomal protein and leaderless mRNA during bacterial translation initiation | |||||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME / leaderless mRNA / Cryo-EM / 70S / HflX / bS21 / uS2 | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 transcription elongation-coupled chromatin remodeling / ribosome assembly / assembly of large subunit precursor of preribosome / cytosolic ribosome assembly / regulation of DNA-templated transcription elongation / transcription antitermination / DNA-templated transcription termination / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding ...transcription elongation-coupled chromatin remodeling / ribosome assembly / assembly of large subunit precursor of preribosome / cytosolic ribosome assembly / regulation of DNA-templated transcription elongation / transcription antitermination / DNA-templated transcription termination / mRNA 5'-UTR binding / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation / response to antibiotic / mRNA binding / membrane / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Escherichia coli (大腸菌) Bacteriophage sp. (ファージ) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.3 Å | |||||||||
データ登録者 | Bhattacharjee, S. / Gottesman, M.E. / Frank, J. | |||||||||
資金援助 | 米国, 2件
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引用 | ジャーナル: J Mol Biol / 年: 2024 タイトル: How Dedicated Ribosomes Translate a Leaderless mRNA. 著者: Francisco J Acosta-Reyes / Sayan Bhattacharjee / Max Gottesman / Joachim Frank / 要旨: In bacteriophage λ lysogens, the λcI repressor is encoded by the leaderless transcript (lmRNA) initiated at the λpRM promoter. Translation is enhanced in rpsB mutants deficient in ribosomal ...In bacteriophage λ lysogens, the λcI repressor is encoded by the leaderless transcript (lmRNA) initiated at the λpRM promoter. Translation is enhanced in rpsB mutants deficient in ribosomal protein uS2. Although translation initiation of lmRNA is conserved in bacteria, archaea, and eukaryotes, structural insight of a lmRNA translation initiation complex is missing. Here, we use cryo-EM to solve the structures of the uS2-deficient 70S ribosome of host E. coli mutant rpsB11 and the wild-type 70S complex with λcI lmRNA and fMet-tRNA. Importantly, the uS2-deficient 70S ribosome also lacks protein bS21. The anti-Shine-Dalgarno (aSD) region is structurally supported by bS21, so that the absence of the latter causes the aSD to divert from the normal mRNA exit pathway, easing the exit of lmRNA. A π-stacking interaction between the monitor base A1493 and A(+4) of lmRNA potentially acts as a recognition signal. Coulomb charge flow, along with peristalsis-like dynamics within the mRNA entrance channel due to the increased 30S head rotation caused by the absence of uS2, are likely to facilitate the propagation of lmRNA through the ribosome. These findings lay the groundwork for future research on the mechanism of translation and the co-evolution of lmRNA and mRNA that includes the emergence of a defined ribosome-binding site of the transcript. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8t5h.cif.gz | 3 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8t5h.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 8t5h.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
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-検証レポート
文書・要旨 | 8t5h_validation.pdf.gz | 2 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8t5h_full_validation.pdf.gz | 2.1 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8t5h_validation.xml.gz | 206.2 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8t5h_validation.cif.gz | 358.5 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/t5/8t5h ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/t5/8t5h | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 41050MC 8t5dC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
+50S ribosomal protein ... , 26種, 26分子 01234CDEFGJKLMNOPQSTUVWXYZ
-RNA鎖 , 5種, 5分子 ABvx5
#6: RNA鎖 | 分子量: 37848.555 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: GenBank: 1845258627 |
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#7: RNA鎖 | 分子量: 941306.188 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: GenBank: 937521852 |
#49: RNA鎖 | 分子量: 498725.406 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: GenBank: 1338015391 |
#50: RNA鎖 | 分子量: 3866.424 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Bacteriophage sp. (ファージ) / 発現宿主: Bacteriophage sp. (ファージ) |
#51: RNA鎖 | 分子量: 24802.785 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: GenBank: 1848934315 |
-タンパク質 , 2種, 2分子 Ru
#21: タンパク質 | 分子量: 11586.374 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rplU, ECMP0215528_3699 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A829CSJ4 |
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#48: タンパク質 | 分子量: 6639.455 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: nusG / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A2X1MT45 |
-30S ribosomal protein ... , 18種, 18分子 bcdefghijklmnopqrs
#30: タンパク質 | 分子量: 23078.785 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rpsC / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: V0Y888 |
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#31: タンパク質 | 分子量: 23383.002 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) 遺伝子: rpsD, rpsD_2, A2F99_003133, A5U30_004530, A6592_25685, A8499_003310, A8502_004045, A8X14_004364, A9X72_02295, AAG43_004468, AAG80_001471, AAG81_002934, AAS29_002184, ACN68_01785, ACN81_ ...遺伝子: rpsD, rpsD_2, A2F99_003133, A5U30_004530, A6592_25685, A8499_003310, A8502_004045, A8X14_004364, A9X72_02295, AAG43_004468, AAG80_001471, AAG81_002934, AAS29_002184, ACN68_01785, ACN81_25410, ACU57_21070, AM464_09110, APX88_16185, AT845_004400, AW118_24790, AW119_26600, AWP47_12755, B6R12_002829, B6R15_004091, B6R31_004990, B6R48_005057, B6R87_004967, BANRA_04306, BANRA_04454, BEA19_23315, BER14_25080, BF481_004952, BG944_001111, BGM66_003615, BHS81_19725, BJI68_08785, BJJ90_02235, BK292_20395, BK383_24755, BKL28_004565, BLM69_000018, BMC79_004441, BMO21_000808, BMT50_12325, BMT91_19960, BO178_004290, BON92_01160, BR158_003768, BRV02_004619, BRV34_003992, BRV41_004380, BSR05_22680, BTB68_004378, BTQ06_10580, BUO55_004719, BvCmsHHP019_04126, BvCmsHHP056_02698, BvCmsKKP061_03008, BvCmsKSNP073_02050, BXT93_05585, BZL69_25920, C0P57_002646, C1Q91_004926, C2121_004184, C2M16_25515, C2R31_004611, C3F40_19830, C5N07_23600, C9114_23780, C9E67_02835, C9Z68_22525, CA593_09760, CCS08_00105, CCV24_003537, CDL36_25620, CDL37_18565, CF22_004871, CG831_003627, CIG67_10785, CO706_15175, CQ986_004903, CQB02_00600, CR538_02530, CR539_21790, CR628_001344, CSE52_004356, CTR35_003608, CWS33_24830, CX690_001674, CX691_001950, CX692_003176, CX693_003183, CX694_003140, CX696_002237, CX699_003071, CX938_003809, CY655_21210, CYM75_002789, D0X26_24470, D1912_27635, D3C88_00295, D3G36_23160, D4M65_20545, D4N09_20145, D4U49_16120, D9D43_22660, D9E34_23635, D9E49_05130, D9H94_20860, D9J03_20025, D9J61_16625, DD762_23520, DIV22_15285, DN627_24395, DNQ45_03730, DNX30_25505, DRW19_25110, DS732_24235, DTL43_21025, DTL90_24665, DTM45_24580, DU321_11975, E0I42_22165, E3N34_07135, E4K51_21465, E5H86_24550, E6D34_21785, EA239_22765, EA435_23005, EAI46_07450, EAX79_10685, EBP16_21900, EC95NR1_02686, ECs4161, EHD79_24265, EIA08_23930, EIZ93_12495, EKI52_17690, EL79_0420, ELT17_22465, ELT48_22895, ELV28_22900, ELX68_21515, ELX69_22945, ELX76_22915, ELX79_22025, ELX96_16780, ELY32_12890, ELY41_18695, ELY48_23135, EN85_004371, EPS76_07240, ERS085406_04412, ERS085411_04292, ERS139208_04360, EWK56_24970, ExPECSC038_03662, F0L67_25290, F3N40_22390, F7F11_22750, F7N46_24035, F9413_21260, F9461_25680, F9B07_24710, F9S83_18965, F9U58_14355, F9V22_13840, FA868_22720, FDM60_20865, FEJ01_22540, FFF58_25480, FGG80_25160, FHD44_21240, FIJ20_21220, FJQ40_18280, FJQ53_22940, FKO60_25610, FNA08_03300, FOI11_019285, FOI11_03895, FPI65_20280, FPS11_25455, FTV90_00725, FTV93_20925, FV293_22490, FVB16_04845, FWK02_29585, FZN31_02660, FZU14_21795, G3565_26290, G3V95_19820, G3W53_20930, G4A38_21485, G4A47_20755, G5603_24560, G9448_17100, GAI89_24855, GAJ12_24745, GAJ26_21985, GF699_19710, GFY34_22925, GGB84_004473, GIB53_19425, GJ11_21360, GJO56_22710, GKF66_21520, GKF89_18445, GNW61_16605, GNZ05_26010, GOP25_22680, GP711_23280, GP944_18765, GP954_00970, GP965_04270, GP975_01160, GP979_02030, GQA06_03975, GQM04_10540, GQM13_25175, GQM21_11205, GQN34_23240, GQW07_21575, GRC73_21775, GRO95_20840, GRW05_09035, GRW24_04780, GRW56_00270, GRW57_03565, GSM54_23355, GSY44_19975, GUC01_21155, GUI33_20020, H0O51_24710, H0O53_20855, H0O72_19390, H6Y26_003158, HCQ42_003954, HEP30_018610, HEP34_004776, HHH44_004541, HI055_004134, HIE29_005181, HJ942_004444, HJQ60_005017, HKA49_005041, HL563_21575, HL601_22380, HLV18_23365, HLX92_10100, HLZ50_22205, HMV95_19580, HMW38_23080, HV109_02215, HV146_21645, HV209_14740, HVV39_09240, HVW04_17560, HVW43_18695, HVX31_01995, HVX32_19020, HVY77_02200, HVZ29_19070, HVZ30_02080, HVZ71_02385, HX136_02220, I6H00_20950, I6H02_11965, IA00_004082, IFB95_004800, IH772_24040, IT029_004959, J0541_004391, J4S20_004808, J5U05_004093, JFD_03707, JNP96_25280, NCTC10082_02845, NCTC10089_00508, NCTC10090_03533, NCTC10418_00697, NCTC10429_01101, NCTC10764_03869, NCTC10767_01522, NCTC10865_00667, NCTC10974_00558, NCTC11112_01030, NCTC11126_02778, NCTC11181_02744, NCTC11341_01883, NCTC12950_00485, NCTC13127_00793, NCTC13148_03435, NCTC13216_01346, NCTC4450_02481, NCTC7922_04037, NCTC7927_00557, NCTC7928_02509, NCTC8009_01519, NCTC8179_05949, NCTC8333_00495, NCTC8450_04944, NCTC8621_00514, NCTC8622_00500, NCTC8959_03255, NCTC8960_03076, NCTC9001_04260, NCTC9044_01350, NCTC9045_00572, NCTC9075_00730, NCTC9077_00610, NCTC9081_00925, NCTC9111_00873, NCTC9117_00761, NCTC9702_00543, NCTC9706_02743, NCTC9775_04009, NCTC9777_01897, NCTC9962_06803, ND22_005162, RG28_21585, SAMEA3472044_01168, SAMEA3472056_05405, SAMEA3472147_04298, SAMEA3751407_00018, SAMEA3752557_01946, SAMEA3753106_04640, TUM18780_04410, WR15_19580 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: C3SR62 |
#32: タンパク質 | 分子量: 15804.282 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rpsE, ECJG_02962 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: F4TL26 |
#33: タンパク質 | 分子量: 11669.371 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rpsF, b4200, JW4158 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P02358 |
#34: タンパク質 | 分子量: 16861.523 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rpsG, b3341, JW3303 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P02359 |
#35: タンパク質 | 分子量: 14015.361 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rpsH, ECDEC2D_3910 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A828U358 |
#36: タンパク質 | 分子量: 14554.882 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rpsI, HMPREF1599_00992 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: V0A2W7 |
#37: タンパク質 | 分子量: 11196.988 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rpsJ, NRG857_16455 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A0H3EQD3 |
#38: タンパク質 | 分子量: 12487.200 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rpsK, b3297, JW3259 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: P0A7R9 |
#39: タンパク質 | 分子量: 13636.961 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rpsL, EC40522_4581 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: I2UHF1 |
#40: タンパク質 | 分子量: 12625.753 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rpsM, A13A_03621 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: S1P5F8 |
#41: タンパク質 | 分子量: 11489.390 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rpsN, ECIAI1_3456 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: B7M1M1 |
#42: タンパク質 | 分子量: 10159.621 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rpsO, HMPREF9536_02433 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: D7XN21 |
#43: タンパク質 | 分子量: 9207.572 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rpsP / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: C3SYP2 |
#44: タンパク質 | 分子量: 9263.946 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rpsQ, AC28_3826 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A080IK26 |
#45: タンパク質 | 分子量: 6466.477 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rpsR / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: W1EY92 |
#46: タンパク質 | 分子量: 9057.626 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rpsS, ECKIH15140_04691 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A0A7U9LGZ0 |
#47: タンパク質 | 分子量: 9506.190 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli (大腸菌) / 遺伝子: rpsT / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: C3TRH7 |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: CELL / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Apo 70S at 900 ms / タイプ: RIBOSOME / 詳細: control experiment / Entity ID: all / 由来: NATURAL |
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由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: DARK FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm |
撮影 | 電子線照射量: 58 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) |
-解析
EMソフトウェア |
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画像処理 | 詳細: High-pass filtered | ||||||||||||||||||||||||
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.3 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 96000 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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