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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8q04 | ||||||||||||||||||
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タイトル | Chlorella sorokiniana Rubisco: D4 symmetry imposed | ||||||||||||||||||
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![]() | PLANT PROTEIN / Rubisco | ||||||||||||||||||
機能・相同性 | ![]() L-amino acid transmembrane transporter activity / photorespiration / ribulose-bisphosphate carboxylase / ribulose-bisphosphate carboxylase activity / reductive pentose-phosphate cycle / chloroplast / monooxygenase activity / magnesium ion binding / membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||||||||
生物種 | ![]() | ||||||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.39 Å | ||||||||||||||||||
![]() | Barrett, J. / Blaza, J.N. / Mackinder, L.C.M. | ||||||||||||||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: A promiscuous mechanism to phase separate eukaryotic carbon fixation in the green lineage. 著者: James Barrett / Mihris I S Naduthodi / Yuwei Mao / Clément Dégut / Sabina Musiał / Aidan Salter / Mark C Leake / Michael J Plevin / Alistair J McCormick / James N Blaza / Luke C M Mackinder / ![]() 要旨: CO fixation is commonly limited by inefficiency of the CO-fixing enzyme Rubisco. Eukaryotic algae concentrate and fix CO in phase-separated condensates called pyrenoids, which complete up to one- ...CO fixation is commonly limited by inefficiency of the CO-fixing enzyme Rubisco. Eukaryotic algae concentrate and fix CO in phase-separated condensates called pyrenoids, which complete up to one-third of global CO fixation. Condensation of Rubisco in pyrenoids is dependent on interaction with disordered linker proteins that show little conservation between species. We developed a sequence-independent bioinformatic pipeline to identify linker proteins in green algae. We report the linker from Chlorella and demonstrate that it binds a conserved site on the Rubisco large subunit. We show that the Chlorella linker phase separates Chlamydomonas Rubisco and that despite their separation by ~800 million years of evolution, the Chlorella linker can support the formation of a functional pyrenoid in Chlamydomonas. This cross-species reactivity extends to plants, with the Chlorella linker able to drive condensation of some native plant Rubiscos in vitro and in planta. Our results represent an exciting frontier for pyrenoid engineering in plants, which is modelled to increase crop yields. | ||||||||||||||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 865.5 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 713.9 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.5 MB | 表示 | ![]() |
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文書・詳細版 | ![]() | 1.5 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 107.1 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 174.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 18049MC ![]() 8q05C M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 52580.418 Da / 分子数: 8 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #2: タンパク質 | 分子量: 20507.385 Da / 分子数: 8 / 由来タイプ: 天然 / 由来: (天然) ![]() #3: 水 | ChemComp-HOH / | Has protein modification | N | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 | 名称: Rubisco holoenzyme purified from Chlorella sorokiniana UTEX1230 タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#2 / 由来: NATURAL | ||||||||||||||||||||||||||||||
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分子量 | 実験値: NO | ||||||||||||||||||||||||||||||
由来(天然) | 生物種: ![]() | ||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液 | pH: 6.8 | ||||||||||||||||||||||||||||||
緩衝液成分 |
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試料 | 濃度: 0.3 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES 詳細: Chlorella sorokiniana Rubisco at 0.3 mg/mL (0.5 micromolar) was incubated with alpha3-alpha4 at 16 micromolar. | ||||||||||||||||||||||||||||||
試料支持 | 詳細: Pressure was not recorded / グリッドの材料: COPPER / グリッドのサイズ: 400 divisions/in. / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3 | ||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 95 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K |
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電子顕微鏡撮影
顕微鏡 | モデル: TFS GLACIOS |
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電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 240000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 1800 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 800 nm / Cs: 2.7 mm / C2レンズ絞り径: 50 µm |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 平均露光時間: 6.52 sec. / 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: FEI FALCON IV (4k x 4k) 撮影したグリッド数: 1 / 実像数: 4447 |
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解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 237035 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: D4 (2回x4回 2面回転対称) | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.39 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 73962 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | B value: 44 / プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL 詳細: Initial rigid body fitting was completed in UCSF Chimrea. Flexible fitting was completed in COOT and the coordinates were real-space refined in Phenix. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | Source name: AlphaFold / タイプ: in silico model |