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- PDB-8p8g: Nitrogenase MoFe protein from A. vinelandii beta double mutant D3... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8p8g
タイトルNitrogenase MoFe protein from A. vinelandii beta double mutant D353G/D357G
要素
  • Nitrogenase molybdenum-iron protein beta chain
  • Nitrogenase protein alpha chain
キーワードOXIDOREDUCTASE / Molybdenum nitrogenase / N2-fixation / FeMocofactor / metal binding site / P cluster / NH3 production
機能・相同性
機能・相同性情報


molybdenum-iron nitrogenase complex / nitrogenase / nitrogenase activity / nitrogen fixation / iron-sulfur cluster binding / ATP binding / metal ion binding
類似検索 - 分子機能
Nitrogenase molybdenum-iron protein beta chain, N-terminal / Domain of unknown function (DUF3364) / Nitrogenase molybdenum-iron protein alpha chain / Nitrogenase molybdenum-iron protein beta chain / Nitrogenase component 1, alpha chain / Nitrogenase component 1, conserved site / Nitrogenases component 1 alpha and beta subunits signature 2. / Nitrogenases component 1 alpha and beta subunits signature 1. / Nitrogenase/oxidoreductase, component 1 / : / Nitrogenase component 1 type Oxidoreductase
類似検索 - ドメイン・相同性
FE(8)-S(7) CLUSTER, OXIDIZED / FE(8)-S(7) CLUSTER / 1,4-DIETHYLENE DIOXIDE / 3-HYDROXY-3-CARBOXY-ADIPIC ACID / Chem-ICS / Nitrogenase protein alpha chain / Nitrogenase molybdenum-iron protein beta chain
類似検索 - 構成要素
生物種Azotobacter vinelandii DJ (窒素固定)
手法X線回折 / シンクロトロン / 分子置換 / 解像度: 1.55 Å
データ登録者Maslac, N. / Wagner, T.
資金援助 ドイツ, スイス, 3件
組織認可番号
Max Planck Society ドイツ
German Research Foundation (DFG)WA 4053/1-1 ドイツ
Swiss National Science Foundation180544 スイス
引用ジャーナル: Jacs Au / : 2023
タイトル: The Mononuclear Metal-Binding Site of Mo-Nitrogenase Is Not Required for Activity.
著者: Cadoux, C. / Maslac, N. / Di Luzio, L. / Ratcliff, D. / Gu, W. / Wagner, T. / Milton, R.D.
履歴
登録2023年6月1日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02023年12月13日Provider: repository / タイプ: Initial release

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: Nitrogenase protein alpha chain
B: Nitrogenase molybdenum-iron protein beta chain
C: Nitrogenase protein alpha chain
D: Nitrogenase molybdenum-iron protein beta chain
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)238,98153
ポリマ-231,7744
非ポリマー7,20749
39,1472173
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者・ソフトウェアが定義した集合体
  • 根拠: native gel electrophoresis, gel filtration
タイプ名称対称操作
identity operation1_555x,y,z1
Buried area39720 Å2
ΔGint-140 kcal/mol
Surface area57810 Å2
手法PISA
単位格子
Length a, b, c (Å)167.486, 74.469, 208.467
Angle α, β, γ (deg.)90.00, 103.25, 90.00
Int Tables number5
Space group name H-MC121
Components on special symmetry positions
IDモデル要素
11A-1476-

HOH

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要素

-
タンパク質 , 2種, 4分子 ACBD

#1: タンパク質 Nitrogenase protein alpha chain


分子量: 56467.234 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Azotobacter vinelandii DJ (窒素固定)
: DJ / 組織: / / 細胞株: / / 遺伝子: nifD / 器官: /
Plasmid details: Produces the MoFe protein with a poly(histidine)8 tag on the N-term of NifD and a double substituted NifK mutant
発現宿主: Azotobacter vinelandii DJ (窒素固定) / 参照: UniProt: C1DGZ7
#2: タンパク質 Nitrogenase molybdenum-iron protein beta chain / Dinitrogenase


分子量: 59419.809 Da / 分子数: 2 / Mutation: D353G and D357G / 由来タイプ: 組換発現
詳細: The double substitution D353G and D357G was introduced.
由来: (組換発現) Azotobacter vinelandii DJ (窒素固定)
: DJ / 組織: / / 細胞株: / / 遺伝子: nifK, Avin_01400 / 器官: /
Plasmid details: Produces the MoFe protein with a poly(histidine)8 tag on the N-term of NifD and a double substituted NifK mutant
発現宿主: Azotobacter vinelandii DJ (窒素固定) / 参照: UniProt: C1DGZ8, nitrogenase

-
非ポリマー , 10種, 2222分子

#3: 化合物...
ChemComp-EDO / 1,2-ETHANEDIOL / ETHYLENE GLYCOL / エチレングリコ-ル


分子量: 62.068 Da / 分子数: 35 / 由来タイプ: 合成 / : C2H6O2
#4: 化合物 ChemComp-CL / CHLORIDE ION / クロリド


分子量: 35.453 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / : Cl
#5: 化合物 ChemComp-HCA / 3-HYDROXY-3-CARBOXY-ADIPIC ACID / (2R)-2-ヒドロキシ-1,2,4-ブタントリカルボン酸


分子量: 206.150 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / : C7H10O7 / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
#6: 化合物 ChemComp-ICS / iron-sulfur-molybdenum cluster with interstitial carbon


分子量: 787.451 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / : CFe7MoS9 / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
#7: 化合物 ChemComp-DIO / 1,4-DIETHYLENE DIOXIDE / 1,4-ジオキサン


分子量: 88.105 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / : C4H8O2
#8: 化合物 ChemComp-GOL / GLYCEROL / GLYCERIN / PROPANE-1,2,3-TRIOL / グリセロ-ル


分子量: 92.094 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / : C3H8O3
#9: 化合物 ChemComp-1CL / FE(8)-S(7) CLUSTER, OXIDIZED


分子量: 671.215 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / : Fe8S7 / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
#10: 化合物 ChemComp-CLF / FE(8)-S(7) CLUSTER


分子量: 671.215 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / : Fe8S7 / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
#11: 化合物 ChemComp-NA / SODIUM ION / ナトリウムカチオン


分子量: 22.990 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / : Na
#12: 水 ChemComp-HOH / water


分子量: 18.015 Da / 分子数: 2173 / 由来タイプ: 天然 / : H2O

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詳細

研究の焦点であるリガンドがあるかY

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実験情報

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実験

実験手法: X線回折 / 使用した結晶の数: 1

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試料調製

結晶マシュー密度: 2.74 Å3/Da / 溶媒含有率: 55.06 % / 解説: Brown plate, which appeared in a couple of weeks
結晶化温度: 293.15 K / 手法: 蒸気拡散法, シッティングドロップ法 / pH: 5.6
詳細: The beta-D353G/D357G MoFe-protein was crystallized anaerobically at 17.5 mg/mL under 100% N2 atmosphere. The protein was spotted as a sitting drop to 96-Well MRC 2-Drop polystyrene ...詳細: The beta-D353G/D357G MoFe-protein was crystallized anaerobically at 17.5 mg/mL under 100% N2 atmosphere. The protein was spotted as a sitting drop to 96-Well MRC 2-Drop polystyrene Crystallization Plates (SWISSCI) containing 90 uL of crystallization solution in the reservoir. Each drop contained 0.5 uL of protein sample and 0.5 uL of crystallization solution. Crystals were obtained in the crystallization solution containing 10 % w/v Polyethylene glycol 10,000; 2 % v/v 1,4-Dioxane; 100 mM tri-Sodium citrate; pH 5.6, and 1 mM polyoxotungstate [TeW6O24]6- (TEW). Sealed plates were stored inside a Coy anaerobic chamber filled with an atmosphere of N2:H2 97:3 at 20 C. Crystals were soaked in the crystallization solution supplemented with 30% v/v ethylene glycol for a few seconds before freezing in liquid nitrogen.
PH範囲: / / Temp details: /

-
データ収集

回折平均測定温度: 100 K / Serial crystal experiment: N
放射光源由来: シンクロトロン / サイト: SLS / ビームライン: X06DA / 波長: 1.00002 Å
検出器タイプ: DECTRIS PILATUS 2M-F / 検出器: PIXEL / 日付: 2021年10月16日
放射プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray
放射波長波長: 1.00002 Å / 相対比: 1
反射解像度: 1.55→101.46 Å / Num. obs: 176043 / % possible obs: 94 % / 冗長度: 8.1 % / Biso Wilson estimate: 14 Å2 / CC1/2: 0.995 / Rmerge(I) obs: 0.177 / Rpim(I) all: 0.066 / Rrim(I) all: 0.189 / Net I/σ(I): 8.1
反射 シェル解像度: 1.55→1.76 Å / 冗長度: 9.3 % / Rmerge(I) obs: 1.89 / Mean I/σ(I) obs: 1.8 / Num. unique obs: 8391 / CC1/2: 0.566 / Rpim(I) all: 0.652 / Rrim(I) all: 2.001 / % possible all: 80.5

-
解析

ソフトウェア
名称バージョン分類
PHENIX(1.20.1_4487: ???)精密化
autoPROCデータ削減
autoPROCデータスケーリング
PHASER位相決定
精密化構造決定の手法: 分子置換 / 解像度: 1.55→48.32 Å / SU ML: 0.14 / 交差検証法: FREE R-VALUE / σ(F): 1.33 / 位相誤差: 22.28 / 立体化学のターゲット値: ML
詳細: The model was manually rebuilt with COOT and further refined with PHENIX. During the refinement, a translational-libration screw was applied with the model containing hydrogens added in the ...詳細: The model was manually rebuilt with COOT and further refined with PHENIX. During the refinement, a translational-libration screw was applied with the model containing hydrogens added in the riding position during the last refinement cycles. Hydrogens were removed in the final deposited model.
Rfactor反射数%反射
Rfree0.1872 8763 4.98 %
Rwork0.155 --
obs0.1566 175938 48.69 %
溶媒の処理減衰半径: 0.9 Å / VDWプローブ半径: 1.11 Å / 溶媒モデル: FLAT BULK SOLVENT MODEL
原子変位パラメータBiso mean: 18.62 Å2
精密化ステップサイクル: LAST / 解像度: 1.55→48.32 Å
タンパク質核酸リガンド溶媒全体
原子数15912 0 285 2176 18373
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal
X-RAY DIFFRACTIONf_bond_d0.01216703
X-RAY DIFFRACTIONf_angle_d1.03522651
X-RAY DIFFRACTIONf_dihedral_angle_d15.6296193
X-RAY DIFFRACTIONf_chiral_restr0.0612347
X-RAY DIFFRACTIONf_plane_restr0.012877
LS精密化 シェル
解像度 (Å)Rfactor RfreeNum. reflection RfreeRfactor RworkNum. reflection RworkRefine-ID% reflection obs (%)
1.55-1.570.508870.2917172X-RAY DIFFRACTION2
1.57-1.590.469240.27334X-RAY DIFFRACTION3
1.59-1.610.3035230.2612466X-RAY DIFFRACTION4
1.61-1.630.3693470.2659607X-RAY DIFFRACTION5
1.63-1.650.227360.2613734X-RAY DIFFRACTION6
1.65-1.670.219370.2532895X-RAY DIFFRACTION8
1.67-1.690.2364660.2491070X-RAY DIFFRACTION9
1.69-1.720.2807690.24491345X-RAY DIFFRACTION12
1.72-1.750.2471750.23751526X-RAY DIFFRACTION13
1.75-1.770.2677970.241785X-RAY DIFFRACTION16
1.77-1.80.24541210.24161969X-RAY DIFFRACTION17
1.8-1.840.24321260.22772264X-RAY DIFFRACTION20
1.84-1.870.25781100.21562685X-RAY DIFFRACTION23
1.87-1.910.24211680.21373091X-RAY DIFFRACTION27
1.91-1.950.23292090.20613597X-RAY DIFFRACTION32
1.95-20.20432240.19164241X-RAY DIFFRACTION37
2-2.050.20272640.19434982X-RAY DIFFRACTION44
2.05-2.10.27783250.23066038X-RAY DIFFRACTION53
2.1-2.170.22964140.18847602X-RAY DIFFRACTION67
2.17-2.240.2254450.1928785X-RAY DIFFRACTION77
2.24-2.320.23955060.19869890X-RAY DIFFRACTION86
2.32-2.410.20956100.172510918X-RAY DIFFRACTION95
2.41-2.520.20675680.169711285X-RAY DIFFRACTION99
2.52-2.650.19486060.167411459X-RAY DIFFRACTION100
2.65-2.820.19325330.157411504X-RAY DIFFRACTION100
2.82-3.030.19116000.144511529X-RAY DIFFRACTION100
3.03-3.340.1786160.132911488X-RAY DIFFRACTION100
3.34-3.820.14875870.118911576X-RAY DIFFRACTION100
3.82-4.810.12686140.103111566X-RAY DIFFRACTION100
4.81-48.320.17186360.15211772X-RAY DIFFRACTION100
精密化 TLS

手法: refined / Refine-ID: X-RAY DIFFRACTION

IDL112)L122)L132)L222)L232)L332)S11 (Å °)S12 (Å °)S13 (Å °)S21 (Å °)S22 (Å °)S23 (Å °)S31 (Å °)S32 (Å °)S33 (Å °)T112)T122)T132)T222)T232)T332)Origin x (Å)Origin y (Å)Origin z (Å)
11.0038-0.4195-0.1561.27910.21770.5937-0.0378-0.22830.11570.22410.0360.0933-0.0338-0.19290.00010.1586-0.02780.02310.27150.00820.094624.924.182391.4121
20.8082-0.1563-0.37360.7109-0.11820.3903-0.0013-0.1344-0.21290.06820.01770.06380.313-0.1830.01380.2158-0.0846-0.02530.15030.05620.1334.2895-20.432579.2988
30.73850.08150.02470.6684-0.04590.80850.0175-0.1313-0.09250.13360.0054-0.04440.1634-0.0126-0.01920.1308-0.019-0.02160.13830.0170.072947.7463-6.628491.6231
40.79490.1057-0.04680.7927-0.01110.899-0.0046-0.09990.13190.0630.00460.0579-0.2009-0.14810.0020.11490.02080.01210.1138-0.01920.082936.595315.090981.4913
51.1430.01040.07491.01290.25230.72620.002-0.0462-0.1309-0.04820.0753-0.14520.16920.0684-0.05870.1329-0.0007-0.02080.08060.03310.040448.418-12.662970.3308
60.39020.1294-0.17580.2054-0.11990.25550.0117-0.1959-0.02840.0983-0.00620.16650.0636-0.3379-0.05050.0341-0.15150.10320.44660.06410.147110.1246-6.034680.8261
70.82780.01020.00780.4996-0.11320.3340.0239-0.04650.04490.0658-0.02240.22820.0363-0.3163-0.02610.0808-0.0860.03150.45270.01560.23612.1566-4.707759.0284
80.33910.26740.22860.23140.17640.1550.0116-0.04180.07820.0318-0.00640.17360.024-0.25260.00860.1032-0.03590.01740.43890.02050.21924.74251.831263.9165
91.62760.1731-0.84590.1658-0.22050.5539-0.0009-0.062-0.16270.04420.00090.13380.1439-0.20290.0340.1656-0.19470.01220.37460.04540.23783.4212-16.30660.1976
100.28180.04470.02210.22440.01730.41320.0427-0.0246-0.0852-0.0123-0.00120.06730.193-0.2234-0.0320.1438-0.0935-0.00810.15520.02580.143524.8814-14.528452.064
112.23240.206-0.71750.4096-0.09990.7098-0.0118-0.0853-0.01230.02080.0213-0.02060.0728-0.0425-0.01350.0997-0.0379-0.00650.0528-0.00190.080138.0489-4.952242.461
121.9009-0.5448-0.09972.52990.87790.97080.06960.2839-0.2396-0.2888-0.04820.25470.2005-0.1955-0.00190.2056-0.045-0.05020.1474-0.00410.123124.1402-7.22751.1823
130.6668-0.05610.2040.6495-0.07950.4588-0.02340.09540.0968-0.03870.0306-0.081-0.16910.1408-0.00730.1213-0.04480.01130.0549-0.0040.090950.849511.216421.5721
140.62850.0246-0.00480.6486-0.03970.7210.01310.0656-0.0923-0.01070.0263-0.02610.16820.0715-0.02770.126-0.0209-0.01620.0375-0.01930.077646.504-12.189515.1577
150.5196-0.59520.03070.89040.15870.9544-0.0063-0.0479-0.18190.06880.0060.13920.1286-0.2240.00690.1674-0.0894-0.02220.04670.01520.133529.5601-14.532328.8723
160.8935-0.10730.02160.60930.19980.68110.0569-0.0597-0.01390.0911-0.0146-0.11260.0660.1655-0.02630.1009-0.0197-0.02320.0790.00570.065856.838-1.200235.5801
170.37830.0040.27020.6672-0.25891.0865-0.01230.04630.086-0.08960.00520.0315-0.1153-0.1170.00530.10570.01730.0040.05580.02450.093427.876913.357316.5644
180.16070.01810.0230.13550.19470.90210.00470.06340.1246-0.03190.00570.0985-0.263-0.2184-0.00540.18610.07420.0030.09120.0360.177822.650724.181817.023
190.4128-0.1743-0.08380.47810.27220.1619-0.0072-0.04510.0825-0.05850.00740.154-0.1475-0.32390.00280.15290.10910.0080.23590.01850.166414.207318.290834.1082
200.6701-0.84010.05021.1674-0.1080.0216-0.00280.02770.2551-0.0525-0.0781-0.0864-0.2904-0.07420.06510.27170.0953-0.00190.1397-0.00060.201523.329330.679236.1414
210.4457-0.1420.10510.5627-0.28260.8564-0.0313-0.05310.11590.02520.02370.0512-0.2696-0.19080.00960.14520.02970.00660.0954-0.0180.107528.882519.862452.2158
221.1061-0.3875-0.24371.24150.18190.5812-0.0036-0.08460.19260.10120.0338-0.0513-0.26580.0597-0.01270.1701-0.0498-0.0030.0535-0.01660.122545.181220.849346.7897
230.00540.0247-0.00560.1931-0.05090.63050.0172-0.0444-0.00650.0372-0.0061-0.0281-0.00120.0039-0.01190.0668-0.0199-0.00580.065-0.00040.086939.59953.320851.3688
精密化 TLSグループ
IDRefine-IDRefine TLS-IDSelection details
1X-RAY DIFFRACTION1chain 'A' and (resid 4 through 91 )
2X-RAY DIFFRACTION2chain 'A' and (resid 92 through 162 )
3X-RAY DIFFRACTION3chain 'A' and (resid 163 through 317 )
4X-RAY DIFFRACTION4chain 'A' and (resid 318 through 480 )
5X-RAY DIFFRACTION5chain 'B' and (resid 2 through 70 )
6X-RAY DIFFRACTION6chain 'B' and (resid 71 through 209 )
7X-RAY DIFFRACTION7chain 'B' and (resid 210 through 246 )
8X-RAY DIFFRACTION8chain 'B' and (resid 247 through 292 )
9X-RAY DIFFRACTION9chain 'B' and (resid 293 through 320 )
10X-RAY DIFFRACTION10chain 'B' and (resid 321 through 485 )
11X-RAY DIFFRACTION11chain 'B' and (resid 486 through 523 )
12X-RAY DIFFRACTION12chain 'C' and (resid 4 through 49 )
13X-RAY DIFFRACTION13chain 'C' and (resid 50 through 173 )
14X-RAY DIFFRACTION14chain 'C' and (resid 174 through 433 )
15X-RAY DIFFRACTION15chain 'C' and (resid 434 through 480 )
16X-RAY DIFFRACTION16chain 'D' and (resid 2 through 70 )
17X-RAY DIFFRACTION17chain 'D' and (resid 71 through 161 )
18X-RAY DIFFRACTION18chain 'D' and (resid 162 through 212 )
19X-RAY DIFFRACTION19chain 'D' and (resid 213 through 292 )
20X-RAY DIFFRACTION20chain 'D' and (resid 293 through 320 )
21X-RAY DIFFRACTION21chain 'D' and (resid 321 through 399 )
22X-RAY DIFFRACTION22chain 'D' and (resid 400 through 445 )
23X-RAY DIFFRACTION23chain 'D' and (resid 446 through 523 )

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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