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基本情報
| 登録情報 | データベース: PDB / ID: 8p8g | ||||||||||||
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| タイトル | Nitrogenase MoFe protein from A. vinelandii beta double mutant D353G/D357G | ||||||||||||
要素 |
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キーワード | OXIDOREDUCTASE / Molybdenum nitrogenase / N2-fixation / FeMocofactor / metal binding site / P cluster / NH3 production | ||||||||||||
| 機能・相同性 | 機能・相同性情報molybdenum-iron nitrogenase complex / nitrogenase / nitrogenase activity / iron-sulfur cluster binding / ATP binding / metal ion binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||||||||
| 生物種 | Azotobacter vinelandii DJ (窒素固定) | ||||||||||||
| 手法 | X線回折 / シンクロトロン / 分子置換 / 解像度: 1.55 Å | ||||||||||||
データ登録者 | Maslac, N. / Wagner, T. | ||||||||||||
| 資金援助 | ドイツ, スイス, 3件
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引用 | ジャーナル: Jacs Au / 年: 2023タイトル: The Mononuclear Metal-Binding Site of Mo-Nitrogenase Is Not Required for Activity. 著者: Cadoux, C. / Maslac, N. / Di Luzio, L. / Ratcliff, D. / Gu, W. / Wagner, T. / Milton, R.D. | ||||||||||||
| 履歴 |
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構造の表示
| 構造ビューア | 分子: Molmil Jmol/JSmol |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
| PDBx/mmCIF形式 | 8p8g.cif.gz | 847.8 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
|---|---|---|---|---|
| PDB形式 | pdb8p8g.ent.gz | 690.6 KB | 表示 | PDB形式 |
| PDBx/mmJSON形式 | 8p8g.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
| その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
| 文書・要旨 | 8p8g_validation.pdf.gz | 4.7 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
|---|---|---|---|---|
| 文書・詳細版 | 8p8g_full_validation.pdf.gz | 4.7 MB | 表示 | |
| XML形式データ | 8p8g_validation.xml.gz | 89.7 KB | 表示 | |
| CIF形式データ | 8p8g_validation.cif.gz | 139.1 KB | 表示 | |
| アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/p8/8p8g ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/p8/8p8g | HTTPS FTP |
-関連構造データ
| 類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 F&H 検索 |
|---|---|
| 実験データセット #1 | データ参照: 10.5281/zenodo.7973626 / データの種類: diffraction image data / Metadata reference: 10.5281/zenodo.7973626 |
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リンク
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集合体
| 登録構造単位 | ![]()
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| 1 |
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| 単位格子 |
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| Components on special symmetry positions |
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要素
-タンパク質 , 2種, 4分子 ACBD
| #1: タンパク質 | 分子量: 56467.234 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) Azotobacter vinelandii DJ (窒素固定)株: DJ / 組織: / / 細胞株: / / 遺伝子: nifD / 器官: / Plasmid details: Produces the MoFe protein with a poly(histidine)8 tag on the N-term of NifD and a double substituted NifK mutant 発現宿主: Azotobacter vinelandii DJ (窒素固定) / 参照: UniProt: C1DGZ7#2: タンパク質 | 分子量: 59419.809 Da / 分子数: 2 / Mutation: D353G and D357G / 由来タイプ: 組換発現 詳細: The double substitution D353G and D357G was introduced. 由来: (組換発現) Azotobacter vinelandii DJ (窒素固定)株: DJ / 組織: / / 細胞株: / / 遺伝子: nifK, Avin_01400 / 器官: / Plasmid details: Produces the MoFe protein with a poly(histidine)8 tag on the N-term of NifD and a double substituted NifK mutant 発現宿主: Azotobacter vinelandii DJ (窒素固定) / 参照: UniProt: C1DGZ8, nitrogenase |
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-非ポリマー , 10種, 2222分子 


















| #3: 化合物 | ChemComp-EDO / #4: 化合物 | #5: 化合物 | #6: 化合物 | #7: 化合物 | #8: 化合物 | ChemComp-GOL / | #9: 化合物 | #10: 化合物 | #11: 化合物 | ChemComp-NA / | #12: 水 | ChemComp-HOH / | |
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-詳細
| 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y |
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-実験情報
-実験
| 実験 | 手法: X線回折 / 使用した結晶の数: 1 |
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試料調製
| 結晶 | マシュー密度: 2.74 Å3/Da / 溶媒含有率: 55.06 % / 解説: Brown plate, which appeared in a couple of weeks |
|---|---|
| 結晶化 | 温度: 293.15 K / 手法: 蒸気拡散法, シッティングドロップ法 / pH: 5.6 詳細: The beta-D353G/D357G MoFe-protein was crystallized anaerobically at 17.5 mg/mL under 100% N2 atmosphere. The protein was spotted as a sitting drop to 96-Well MRC 2-Drop polystyrene ...詳細: The beta-D353G/D357G MoFe-protein was crystallized anaerobically at 17.5 mg/mL under 100% N2 atmosphere. The protein was spotted as a sitting drop to 96-Well MRC 2-Drop polystyrene Crystallization Plates (SWISSCI) containing 90 uL of crystallization solution in the reservoir. Each drop contained 0.5 uL of protein sample and 0.5 uL of crystallization solution. Crystals were obtained in the crystallization solution containing 10 % w/v Polyethylene glycol 10,000; 2 % v/v 1,4-Dioxane; 100 mM tri-Sodium citrate; pH 5.6, and 1 mM polyoxotungstate [TeW6O24]6- (TEW). Sealed plates were stored inside a Coy anaerobic chamber filled with an atmosphere of N2:H2 97:3 at 20 C. Crystals were soaked in the crystallization solution supplemented with 30% v/v ethylene glycol for a few seconds before freezing in liquid nitrogen. PH範囲: / / Temp details: / |
-データ収集
| 回折 | 平均測定温度: 100 K / Serial crystal experiment: N |
|---|---|
| 放射光源 | 由来: シンクロトロン / サイト: SLS / ビームライン: X06DA / 波長: 1.00002 Å |
| 検出器 | タイプ: DECTRIS PILATUS 2M-F / 検出器: PIXEL / 日付: 2021年10月16日 |
| 放射 | プロトコル: SINGLE WAVELENGTH / 単色(M)・ラウエ(L): M / 散乱光タイプ: x-ray |
| 放射波長 | 波長: 1.00002 Å / 相対比: 1 |
| 反射 | 解像度: 1.55→101.46 Å / Num. obs: 176043 / % possible obs: 94 % / 冗長度: 8.1 % / Biso Wilson estimate: 14 Å2 / CC1/2: 0.995 / Rmerge(I) obs: 0.177 / Rpim(I) all: 0.066 / Rrim(I) all: 0.189 / Net I/σ(I): 8.1 |
| 反射 シェル | 解像度: 1.55→1.76 Å / 冗長度: 9.3 % / Rmerge(I) obs: 1.89 / Mean I/σ(I) obs: 1.8 / Num. unique obs: 8391 / CC1/2: 0.566 / Rpim(I) all: 0.652 / Rrim(I) all: 2.001 / % possible all: 80.5 |
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解析
| ソフトウェア |
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| 精密化 | 構造決定の手法: 分子置換 / 解像度: 1.55→48.32 Å / SU ML: 0.14 / 交差検証法: FREE R-VALUE / σ(F): 1.33 / 位相誤差: 22.28 / 立体化学のターゲット値: ML詳細: The model was manually rebuilt with COOT and further refined with PHENIX. During the refinement, a translational-libration screw was applied with the model containing hydrogens added in the ...詳細: The model was manually rebuilt with COOT and further refined with PHENIX. During the refinement, a translational-libration screw was applied with the model containing hydrogens added in the riding position during the last refinement cycles. Hydrogens were removed in the final deposited model.
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| 溶媒の処理 | 減衰半径: 0.9 Å / VDWプローブ半径: 1.11 Å / 溶媒モデル: FLAT BULK SOLVENT MODEL | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 原子変位パラメータ | Biso mean: 18.62 Å2 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 精密化ステップ | サイクル: LAST / 解像度: 1.55→48.32 Å
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| 拘束条件 |
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| LS精密化 シェル |
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| 精密化 TLS | 手法: refined / Refine-ID: X-RAY DIFFRACTION
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| 精密化 TLSグループ |
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ムービー
コントローラー
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X線回折
ドイツ,
スイス, 3件
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