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万見
- PDB-8k60: Cryo-EM structure of Streptomyces coelicolor transcription initia... -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8k60
タイトルCryo-EM structure of Streptomyces coelicolor transcription initiation complex with the global transcription factor AfsR
要素
  • (DNA-directed RNA polymerase subunit ...) x 4
  • Non-template strand DNA for AfsS promoter
  • RNA polymerase principal sigma factor HrdB
  • Regulatory protein AfsR
  • Template strand DNA for AfsS promoter
キーワードGENE REGULATION / transcription factor / TRANSCRIPTION-DNA complex
機能・相同性
機能・相同性情報


pigment binding / bacterial-type RNA polymerase holo enzyme binding / nucleoid / sigma factor activity / phosphorelay signal transduction system / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / antibiotic biosynthetic process / DNA-directed RNA polymerase complex / DNA-templated transcription initiation ...pigment binding / bacterial-type RNA polymerase holo enzyme binding / nucleoid / sigma factor activity / phosphorelay signal transduction system / bacterial-type RNA polymerase core enzyme binding / cytosolic DNA-directed RNA polymerase complex / antibiotic biosynthetic process / DNA-directed RNA polymerase complex / DNA-templated transcription initiation / ADP binding / ribonucleoside binding / : / : / : / : / : / : / DNA-directed RNA polymerase / protein dimerization activity / regulation of DNA-templated transcription / magnesium ion binding / DNA binding / zinc ion binding / ATP binding / cytoplasm
類似検索 - 分子機能
Bacterial transcriptional activator domain / : / Bacterial transcriptional activator domain / Bacterial transcriptional activator domain / Tetratricopeptide repeat / NB-ARC / NB-ARC domain / OmpR/PhoB-type DNA-binding domain / Transcriptional regulatory protein, C terminal / OmpR/PhoB-type DNA-binding domain profile. ...Bacterial transcriptional activator domain / : / Bacterial transcriptional activator domain / Bacterial transcriptional activator domain / Tetratricopeptide repeat / NB-ARC / NB-ARC domain / OmpR/PhoB-type DNA-binding domain / Transcriptional regulatory protein, C terminal / OmpR/PhoB-type DNA-binding domain profile. / Transcriptional regulatory protein, C terminal / Tetratricopeptide repeat / Signal transduction response regulator, C-terminal effector / Sigma-70 factors family signature 1. / RNA polymerase sigma factor RpoD, C-terminal / RNA polymerase sigma factor RpoD / : / RNA polymerase sigma-70 region 1.2 / Sigma-70 factor, region 1.2 / RNA polymerase sigma-70 region 3 / Sigma-70 region 3 / Sigma-70 factors family signature 2. / RNA polymerase sigma-70 / RNA polymerase sigma-70 region 4 / Sigma-70, region 4 / RNA polymerase sigma-70 region 2 / RNA polymerase sigma-70 like domain / Sigma-70 region 2 / RNA polymerase sigma factor, region 2 / RNA polymerase sigma factor, region 3/4-like / DNA-directed RNA polymerase, omega subunit / DNA-directed RNA polymerase, subunit beta-prime, bacterial type / DNA-directed RNA polymerase, beta subunit, external 1 domain superfamily / DNA-directed RNA polymerase, beta subunit, external 1 domain / RNA polymerase beta subunit external 1 domain / RNA polymerase, alpha subunit, C-terminal / Bacterial RNA polymerase, alpha chain C terminal domain / DNA-directed RNA polymerase, alpha subunit / DNA-directed RNA polymerase beta subunit, bacterial-type / TPR repeat region circular profile. / TPR repeat profile. / Tetratricopeptide repeats / Tetratricopeptide repeat / DNA-directed RNA polymerase, subunit beta-prime / RNA polymerase Rpb6 / RNA polymerase, subunit omega/Rpo6/RPB6 / RNA polymerase Rpb6 / RNA polymerase Rpb2, domain 2 superfamily / RNA polymerase Rpb1, domain 3 superfamily / RPB6/omega subunit-like superfamily / DNA-directed RNA polymerase, insert domain / DNA-directed RNA polymerase, RpoA/D/Rpb3-type / RNA polymerase Rpb3/RpoA insert domain / RNA polymerase Rpb3/Rpb11 dimerisation domain / RNA polymerases D / RNA polymerase Rpb1, clamp domain superfamily / RNA polymerase Rpb1, domain 3 / RNA polymerase Rpb1, domain 3 / RNA polymerase Rpb1, domain 1 / RNA polymerase Rpb1, domain 1 / RNA polymerase, beta subunit, protrusion / RNA polymerase beta subunit / RNA polymerase, alpha subunit / RNA polymerase Rpb1, domain 5 / RNA polymerase Rpb1, domain 4 / RNA polymerase Rpb1, domain 2 / RNA polymerase Rpb1, domain 5 / RNA polymerase Rpb1, domain 4 / DNA-directed RNA polymerase, insert domain superfamily / RNA polymerase, N-terminal / RNA polymerase Rpb1, funnel domain superfamily / RNA polymerase I subunit A N-terminus / RNA polymerase Rpb2, domain 2 / RNA polymerase Rpb2, domain 2 / RNA polymerase, RBP11-like subunit / RNA polymerase, beta subunit, conserved site / RNA polymerase Rpb2, domain 7 / RNA polymerase Rpb2, domain 3 / RNA polymerase Rpb2, OB-fold / RNA polymerase Rpb2, domain 7 / RNA polymerase Rpb2, domain 3 / RNA polymerases beta chain signature. / DNA-directed RNA polymerase, subunit 2, hybrid-binding domain / DNA-directed RNA polymerase, subunit 2 / DNA-directed RNA polymerase, subunit 2, hybrid-binding domain superfamily / RNA polymerase Rpb2, domain 6 / Tetratricopeptide-like helical domain superfamily / Winged helix-like DNA-binding domain superfamily / P-loop containing nucleoside triphosphate hydrolase
類似検索 - ドメイン・相同性
DNA / DNA (> 10) / RNA polymerase principal sigma factor HrdB / Regulatory protein AfsR / DNA-directed RNA polymerase subunit alpha / DNA-directed RNA polymerase subunit beta' / DNA-directed RNA polymerase subunit omega / DNA-directed RNA polymerase subunit beta
類似検索 - 構成要素
生物種Streptomyces coelicolor (バクテリア)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.4 Å
データ登録者Lin, W. / Shi, J.
資金援助 中国, 1件
組織認可番号国
National Natural Science Foundation of China (NSFC)81903526 中国
引用ジャーナル: iScience / 年: 2024
タイトル: Structural insights into transcription activation of the antibiotic regulatory protein, AfsR.
著者: Jing Shi / Zonghang Ye / Zhenzhen Feng / Aijia Wen / Lu Wang / Zhipeng Zhang / Liqiao Xu / Qian Song / Fulin Wang / Tianyu Liu / Shuang Wang / Yu Feng / Wei Lin /
要旨: The antibiotic regulatory proteins (SARPs) are ubiquitously distributed transcription activators in and control antibiotics biosynthesis and morphological differentiation. However, the molecular ...The antibiotic regulatory proteins (SARPs) are ubiquitously distributed transcription activators in and control antibiotics biosynthesis and morphological differentiation. However, the molecular mechanism behind SARP-dependent transcription initiation remains elusive. We here solve the cryo-EM structure of an AfsR-loading RNA polymerase (RNAP)-promoter intermediate complex (AfsR-RPi) including the RNAP, a large SARP member AfsR, and its target promoter DNA that retains the upstream portion straight. The structure reveals that one dimeric N-terminal AfsR-SARP domain (AfsR-SARP) specifically engages with the same face of the AfsR-binding sites by the conserved DNA-binding domains (DBDs), replacing σR4 to bind the suboptimal -35 element, and shortens the spacer between the -10 and -35 elements. Notably, the AfsR-SARPs also recruit RNAP through extensively interacting with its conserved domains (β flap, σR4, and αCTD). Thus, these macromolecular snapshots support a general model and provide valuable clues for SARP-dependent transcription activation in .
履歴
登録2023年7月24日登録サイト: PDBJ / 処理サイト: PDBC
改定 1.02024年7月31日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12024年8月21日Group: Data collection / Database references / カテゴリ: citation / em_admin
Item: _citation.page_last / _citation.pdbx_database_id_PubMed ..._citation.page_last / _citation.pdbx_database_id_PubMed / _citation.title / _em_admin.last_update

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

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集合体

登録構造単位
A: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha
B: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha
C: DNA-directed RNA polymerase subunit beta
D: DNA-directed RNA polymerase subunit beta'
E: DNA-directed RNA polymerase subunit omega
F: RNA polymerase principal sigma factor HrdB
G: Non-template strand DNA for AfsS promoter
H: Template strand DNA for AfsS promoter
I: Regulatory protein AfsR
J: Regulatory protein AfsR
K: DNA-directed RNA polymerase subunit alpha
ヘテロ分子


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)697,76914
ポリマ－697,61411
非ポリマー1553
水00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者が定義した集合体
  • 根拠: gel filtration, not applicable
タイプ名称対称操作数
identity operation1_5551

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要素

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DNA-directed RNA polymerase subunit ... , 4種, 6分子 ABKCDE

#1: タンパク質 DNA-directed RNA polymerase subunit alpha / RNAP subunit alpha / RNA polymerase subunit alpha / Transcriptase subunit alpha


分子量: 36734.641 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Streptomyces coelicolor (strain ATCC BAA-471 / A3(2) / M145) (バクテリア)
遺伝子: rpoA, SCO4729, SC6G4.07 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P60312, DNA-directed RNA polymerase
#2: タンパク質 DNA-directed RNA polymerase subunit beta / RNAP subunit beta / RNA polymerase subunit beta / Transcriptase subunit beta


分子量: 128644.945 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Streptomyces coelicolor (strain ATCC BAA-471 / A3(2) / M145) (バクテリア)
遺伝子: rpoB, SCO4654, SCD82.26 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: Q9L0L0, DNA-directed RNA polymerase
#3: タンパク質 DNA-directed RNA polymerase subunit beta' / RNAP subunit beta' / RNA polymerase subunit beta' / Transcriptase subunit beta'


分子量: 144807.078 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Streptomyces coelicolor (strain ATCC BAA-471 / A3(2) / M145) (バクテリア)
遺伝子: rpoC, SCO4655, SCD40A.01, SCD82.27 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: Q8CJT1, DNA-directed RNA polymerase
#4: タンパク質 DNA-directed RNA polymerase subunit omega / RNAP omega subunit / RNA polymerase omega subunit / Transcriptase subunit omega


分子量: 9716.941 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Streptomyces coelicolor (strain ATCC BAA-471 / A3(2) / M145) (バクテリア)
遺伝子: rpoZ, SCO1478, SC9C5.02c / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: Q9KXS1, DNA-directed RNA polymerase

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タンパク質 , 2種, 3分子 FIJ

#5: タンパク質 RNA polymerase principal sigma factor HrdB / RNA polymerase sigma factor SigA


分子量: 56017.578 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Streptomyces coelicolor (strain ATCC BAA-471 / A3(2) / M145) (バクテリア)
遺伝子: hrdB, sigA, SCO5820, SC5B8.10 / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P18183
#8: タンパク質 Regulatory protein AfsR


分子量: 105842.578 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現
由来: (組換発現) Streptomyces coelicolor (strain ATCC BAA-471 / A3(2) / M145) (バクテリア)
遺伝子: afsR, afsB, SCO4426, SCD6.04c / 発現宿主: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌) / 参照: UniProt: P25941

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DNA鎖 , 2種, 2分子 GH

#6: DNA鎖 Non-template strand DNA for AfsS promoter


分子量: 18177.602 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成
由来: (合成) Streptomyces coelicolor (strain ATCC BAA-471 / A3(2) / M145) (バクテリア)
#7: DNA鎖 Template strand DNA for AfsS promoter


分子量: 18360.770 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成
由来: (合成) Streptomyces coelicolor (strain ATCC BAA-471 / A3(2) / M145) (バクテリア)

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非ポリマー , 2種, 3分子

#9: 化合物 ChemComp-MG / MAGNESIUM ION / マグネシウムジカチオン


分子量: 24.305 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 式: Mg / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION
#10: 化合物 ChemComp-ZN / ZINC ION


分子量: 65.409 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 合成 / 式: Zn / タイプ: SUBJECT OF INVESTIGATION

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詳細

研究の焦点であるリガンドがあるかY

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実験情報

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実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / ３次元再構成法: 単粒子再構成法

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試料調製

構成要素名称: Streptomyces coelicolor transcription initiation complex with the global transcription factor AfsR
タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#8 / 由来: MULTIPLE SOURCES
由来(天然)生物種: Streptomyces coelicolor (strain ATCC BAA-471 / A3(2) / M145) (バクテリア)
由来(組換発現)生物種: Escherichia coli BL21(DE3) (大腸菌)
緩衝液pH: 7.9
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
急速凍結凍結剤: ETHANE

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電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス（公称値）: 2000 nm / 最小 デフォーカス（公称値）: 1000 nm
撮影電子線照射量: 52 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k)

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解析

EMソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.20.1_4487: / カテゴリ: モデル精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
3次元再構成解像度: 3.4 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 231221 / 対称性のタイプ: POINT

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月：コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか？ / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例：em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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