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基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8hm0 | ||||||
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タイトル | F8-A22-E4 complex of MPXV in trimeric form | ||||||
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![]() | REPLICATION / MPXV / complex / RECOMBINATION | ||||||
機能・相同性 | ![]() uracil DNA N-glycosylase activity / viral DNA genome replication / DNA recombination / DNA-directed DNA polymerase / DNA-directed DNA polymerase activity / DNA replication / DNA repair / nucleotide binding / DNA binding 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | ![]() | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.1 Å | ||||||
![]() | Li, Y.N. / Shen, Y.P. / Hu, Z.W. / Yan, R.H. | ||||||
資金援助 | ![]()
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![]() | ![]() タイトル: Structural basis for the assembly of the DNA polymerase holoenzyme from a monkeypox virus variant. 著者: Yaning Li / Yaping Shen / Ziwei Hu / Renhong Yan / ![]() 要旨: The ongoing global pandemic caused by a variant of the monkeypox (or mpox) virus (MPXV) has prompted widespread concern. The MPXV DNA polymerase holoenzyme, consisting of F8, A22, and E4, is vital ...The ongoing global pandemic caused by a variant of the monkeypox (or mpox) virus (MPXV) has prompted widespread concern. The MPXV DNA polymerase holoenzyme, consisting of F8, A22, and E4, is vital for replicating the viral genome and represents a crucial target for the development of antiviral drugs. However, the assembly and working mechanism for the DNA polymerase holoenzyme of MPXV remains elusive. Here, we present the cryo-electron microscopy (cryo-EM) structure of the DNA polymerase holoenzyme at an overall resolution of 3.5 Å. Unexpectedly, the holoenzyme is assembled as a dimer of heterotrimers, of which the extra interface between the thumb domain of F8 and A22 shows a clash between A22 and substrate DNA, suggesting an autoinhibition state. Addition of exogenous double-stranded DNA shifts the hexamer into trimer exposing DNA binding sites, potentially representing a more active state. Our findings provide crucial steps toward developing targeted antiviral therapies for MPXV and related viruses. | ||||||
履歴 |
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構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
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ダウンロードとリンク
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ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 269.9 KB | 表示 | ![]() |
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PDB形式 | ![]() | 209 KB | 表示 | ![]() |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
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-関連構造データ
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リンク
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集合体
登録構造単位 | ![]()
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1 |
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要素
#1: タンパク質 | 分子量: 49203.926 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: A22R, MPXV-COP-126, MPXV-M2940_FCT-131, MPXV-M2957_Lagos-131, MPXV-M3021_Delta-131, MPXV-M5320_M15_Bayelsa-124, MPXV-Nig_SEV71_2_82-126, MPXV-PCH-128, MPXV-Singapore-131, MPXV-SL-126, MPXV- ...遺伝子: A22R, MPXV-COP-126, MPXV-M2940_FCT-131, MPXV-M2957_Lagos-131, MPXV-M3021_Delta-131, MPXV-M5320_M15_Bayelsa-124, MPXV-Nig_SEV71_2_82-126, MPXV-PCH-128, MPXV-Singapore-131, MPXV-SL-126, MPXV-UK_P1-131, MPXV-UK_P2-131, MPXV-UK_P3-131, MPXV-USA2003_099_GR-131, MPXV-USA2003_206_DM-131, MPXV-USA2003_223_RS-131, MPXV-UTC-122, MPXV-W_Nigeria-126, MPXV-WRAIR126, MPXV297957_122, MPXV298464_113, MPXV_LIB1970_184_138, MPXV_USA2003_039_138, MPXV_USA2003_044_138, PDLMKLCO_00135 発現宿主: ![]() |
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#2: タンパク質 | 分子量: 117147.102 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: POL, MPXV-M2940_FCT-055, MPXV-M2957_Lagos-055, MPXV-M3021_Delta-055, MPXV-M5320_M15_Bayelsa-048, MPXV-Singapore-055, MPXV-UK_P1-055, MPXV-UK_P2-055, MPXV-UK_P3-055, MPXV298464_038, PDLMKLCO_00060 発現宿主: ![]() |
#3: タンパク質 | 分子量: 25107.742 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: E4R, UNG, MPXV-CAM1990_02-093, MPXV-Congo_8-094, MPXV-COP-095, MPXV-GAB1988_001-094, MPXV-Ikubi-093, MPXV-M2940_FCT-099, MPXV-M2957_Lagos-099, MPXV-M3021_Delta-099, MPXV-M5320_M15_Bayelsa- ...遺伝子: E4R, UNG, MPXV-CAM1990_02-093, MPXV-Congo_8-094, MPXV-COP-095, MPXV-GAB1988_001-094, MPXV-Ikubi-093, MPXV-M2940_FCT-099, MPXV-M2957_Lagos-099, MPXV-M3021_Delta-099, MPXV-M5320_M15_Bayelsa-092, MPXV-Nig_SEV71_2_82-094, MPXV-PCH-096, MPXV-Singapore-099, MPXV-SL-095, MPXV-UK_P1-099, MPXV-UK_P2-099, MPXV-UK_P3-099, MPXV-USA2003_099_GR-099, MPXV-USA2003_206_DM-099, MPXV-USA2003_223_RS-099, MPXV-UTC-090, MPXV-W_Nigeria-094, MPXV-WRAIR095, MPXV297957_090, MPXV298464_081, MPXV_DRC_Yandongi_102, MPXV_LIB1970_184_106, MPXV_RCG2003_358_106, MPXV_SUD2005_01_102, MPXV_USA2003_039_106, MPXV_USA2003_044_106, MPXV_ZAI1979_005_106, MPXVgp101, PDLMKLCO_00104 発現宿主: ![]() |
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
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試料調製
構成要素 |
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由来(天然) |
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由来(組換発現) |
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緩衝液 | pH: 7.5 | ||||||||||||||||||||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||||||||||||||||||||
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
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電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 1800 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1400 nm / アライメント法: COMA FREE |
試料ホルダ | 凍結剤: NITROGEN 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
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解析
EMソフトウェア | 名称: RELION / バージョン: 3.0.6 / カテゴリ: 3次元再構成 |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
3次元再構成 | 解像度: 3.1 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 854700 / 対称性のタイプ: POINT |