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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8ffq | ||||||
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タイトル | Wildtype rabbit TRPV5 into nanodiscs in the presence of PI(4,5)P2 and ruthenium red | ||||||
要素 | Transient receptor potential cation channel subfamily V member 5 | ||||||
キーワード | MEMBRANE PROTEIN / TRPV5 / TRP Channel / Ruthenium Red / PI(4 / 5)P2 | ||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 regulation of urine volume / calcium ion import across plasma membrane / calcium ion homeostasis / calcium ion transmembrane transport / calcium channel activity / calcium ion transport / protein homotetramerization / calmodulin binding / apical plasma membrane / identical protein binding ...regulation of urine volume / calcium ion import across plasma membrane / calcium ion homeostasis / calcium ion transmembrane transport / calcium channel activity / calcium ion transport / protein homotetramerization / calmodulin binding / apical plasma membrane / identical protein binding / metal ion binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | ||||||
生物種 | Oryctolagus cuniculus (ウサギ) | ||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.65 Å | ||||||
データ登録者 | De Jesus-Perez, J.J. / Fluck, E.C. / Pumroy, R.A. / Protopopova, A.D. / Rocereta, J.A. / Moiseenkova-Bell, V.Y. | ||||||
資金援助 | 米国, 1件
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引用 | ジャーナル: EMBO Rep / 年: 2024 タイトル: Molecular details of ruthenium red pore block in TRPV channels. 著者: Ruth A Pumroy / José J De Jesús-Pérez / Anna D Protopopova / Julia A Rocereta / Edwin C Fluck / Tabea Fricke / Bo-Hyun Lee / Tibor Rohacs / Andreas Leffler / Vera Moiseenkova-Bell / 要旨: Transient receptor potential vanilloid (TRPV) channels play a critical role in calcium homeostasis, pain sensation, immunological response, and cancer progression. TRPV channels are blocked by ...Transient receptor potential vanilloid (TRPV) channels play a critical role in calcium homeostasis, pain sensation, immunological response, and cancer progression. TRPV channels are blocked by ruthenium red (RR), a universal pore blocker for a wide array of cation channels. Here we use cryo-electron microscopy to reveal the molecular details of RR block in TRPV2 and TRPV5, members of the two TRPV subfamilies. In TRPV2 activated by 2-aminoethoxydiphenyl borate, RR is tightly coordinated in the open selectivity filter, blocking ion flow and preventing channel inactivation. In TRPV5 activated by phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate, RR blocks the selectivity filter and closes the lower gate through an interaction with polar residues in the pore vestibule. Together, our results provide a detailed understanding of TRPV subfamily pore block, the dynamic nature of the selectivity filter and allosteric communication between the selectivity filter and lower gate. | ||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8ffq.cif.gz | 481.3 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8ffq.ent.gz | 394.3 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8ffq.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8ffq_validation.pdf.gz | 1.8 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8ffq_full_validation.pdf.gz | 1.9 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8ffq_validation.xml.gz | 71.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8ffq_validation.cif.gz | 105.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ff/8ffq ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ff/8ffq | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 83784.586 Da / 分子数: 4 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Oryctolagus cuniculus (ウサギ) / 遺伝子: Trpv5, Ecac1 / 発現宿主: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) / 参照: UniProt: Q9XSM3 #2: 化合物 | ChemComp-ERG / #3: 化合物 | ChemComp-R2R / | #4: 化合物 | ChemComp-CPL / 研究の焦点であるリガンドがあるか | Y | |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Tetramer of wildtype rabbit TRPV5 into nanodiscs in complex with ruthenium red and PI(4,5)P2 タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1 / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 0.33514 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Oryctolagus cuniculus (ウサギ) |
由来(組換発現) | 生物種: Saccharomyces cerevisiae (パン酵母) |
緩衝液 | pH: 8 |
試料 | 濃度: 2.5 mg/ml / 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 装置: FEI VITROBOT MARK IV / 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277.15 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 105000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 2500 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm / Cs: 2.7 mm |
試料ホルダ | 試料ホルダーモデル: FEI TITAN KRIOS AUTOGRID HOLDER |
撮影 | 電子線照射量: 43 e/Å2 / フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 (6k x 4k) / 実像数: 12412 |
-解析
EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 6859887 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
対称性 | 点対称性: C4 (4回回転対称) | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.65 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 368030 / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | プロトコル: FLEXIBLE FIT / 空間: REAL |