+
データを開く
-
基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8eey | |||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
タイトル | Cas7-11 in complex with DR-mismatched target RNA, Csx29 and Csx30 | |||||||||
![]() |
| |||||||||
![]() | RNA BINDING PROTEIN/RNA / CRISPR / endonuclease / endopeptidase / RNA BINDING PROTEIN-RNA complex | |||||||||
機能・相同性 | ![]() | |||||||||
生物種 | ![]() synthetic construct (人工物) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.53 Å | |||||||||
![]() | Demircioglu, F.E. / Wilkinson, M.E. / Strecker, J. / Li, D. / Faure, G. / Macrae, R.K. / Zhang, F. | |||||||||
資金援助 | ![]()
| |||||||||
![]() | ![]() タイトル: RNA-activated protein cleavage with a CRISPR-associated endopeptidase. 著者: Jonathan Strecker / F Esra Demircioglu / David Li / Guilhem Faure / Max E Wilkinson / Jonathan S Gootenberg / Omar O Abudayyeh / Hiroshi Nishimasu / Rhiannon K Macrae / Feng Zhang / ![]() ![]() 要旨: In prokaryotes, CRISPR-Cas systems provide adaptive immune responses against foreign genetic elements through RNA-guided nuclease activity. Recently, additional genes with non-nuclease functions have ...In prokaryotes, CRISPR-Cas systems provide adaptive immune responses against foreign genetic elements through RNA-guided nuclease activity. Recently, additional genes with non-nuclease functions have been found in genetic association with CRISPR systems, suggesting that there may be other RNA-guided non-nucleolytic enzymes. One such gene from encodes the TPR-CHAT protease Csx29, which is associated with the CRISPR effector Cas7-11. Here, we demonstrate that this CRISPR-associated protease (CASP) exhibits programmable RNA-activated endopeptidase activity against a sigma factor inhibitor to regulate a transcriptional response. Cryo-electron microscopy of an active and substrate-bound CASP complex reveals an allosteric activation mechanism that reorganizes Csx29 catalytic residues upon target RNA binding. This work reveals an RNA-guided function in nature that can be leveraged for RNA-sensing applications in vitro and in human cells. | |||||||||
履歴 |
|
-
構造の表示
構造ビューア | 分子: ![]() ![]() |
---|
-
ダウンロードとリンク
-
ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | ![]() | 539.9 KB | 表示 | ![]() |
---|---|---|---|---|
PDB形式 | ![]() | 表示 | ![]() | |
PDBx/mmJSON形式 | ![]() | ツリー表示 | ![]() | |
その他 | ![]() |
-検証レポート
文書・要旨 | ![]() | 1.4 MB | 表示 | ![]() |
---|---|---|---|---|
文書・詳細版 | ![]() | 1.4 MB | 表示 | |
XML形式データ | ![]() | 71.8 KB | 表示 | |
CIF形式データ | ![]() | 113.4 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | ![]() ![]() | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | ![]() 28065MC ![]() 8eexC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 ( |
---|---|
類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性 ![]() |
-
リンク
-
集合体
登録構造単位 | ![]()
|
---|---|
1 |
|
-
要素
-タンパク質 , 3種, 3分子 EAB
#1: タンパク質 | 分子量: 62688.184 Da / 分子数: 1 変異: 427-MKKDKKA-433 replaced with 427-GGS-429. A gap exists because low-resolution density in EM map permitted modeling of only a single residue of the insertion, G at position 427. 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: DENIS_1080 / 発現宿主: ![]() ![]() |
---|---|
#2: タンパク質 | 分子量: 183844.984 Da / 分子数: 1 / 変異: D429A,D654A / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: DENIS_1082 / 発現宿主: ![]() ![]() |
#3: タンパク質 | 分子量: 88311.875 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 遺伝子: DENIS_1081 / 発現宿主: ![]() ![]() |
-RNA鎖 , 2種, 2分子 CD
#4: RNA鎖 | 分子量: 12134.133 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 由来: (組換発現) ![]() 発現宿主: ![]() ![]() |
---|---|
#5: RNA鎖 | 分子量: 8931.381 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) synthetic construct (人工物) |
-非ポリマー , 1種, 4分子 ![](data/chem/img/ZN.gif)
#6: 化合物 | ChemComp-ZN / |
---|
-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
---|
-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
---|---|
EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-
試料調製
構成要素 | 名称: Cas7-11 in complex with DR-mismatched target RNA, Csx29 and Csx30 タイプ: COMPLEX / Entity ID: #1-#5 / 由来: MULTIPLE SOURCES | ||||||||||||
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
由来(天然) |
| ||||||||||||
由来(組換発現) | 生物種: ![]() ![]() | ||||||||||||
緩衝液 | pH: 8 | ||||||||||||
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES | ||||||||||||
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-
電子顕微鏡撮影
実験機器 | ![]() モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
---|---|
顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: ![]() |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 500 nm / Cs: 2.7 mm |
撮影 | 電子線照射量: 40 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k) |
-
解析
CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION |
---|---|
3次元再構成 | 解像度: 2.53 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 65733 / 対称性のタイプ: POINT |