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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8cea | |||||||||||||||
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タイトル | Cytochrome c maturation complex CcmABCD, E154Q | |||||||||||||||
要素 |
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キーワード | MEMBRANE PROTEIN / Cytochrome c maturation | |||||||||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 cytochrome c biosynthetic process / heme import across plasma membrane / ABC-type heme transporter / heme transmembrane transporter activity / ABC-type heme transporter activity / cytochrome complex assembly / ATP-binding cassette (ABC) transporter complex / heme binding / ATP hydrolysis activity / ATP binding / plasma membrane 類似検索 - 分子機能 | |||||||||||||||
生物種 | Escherichia coli K-12 (大腸菌) | |||||||||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.94 Å | |||||||||||||||
データ登録者 | Ilcu, L. / Zhang, L. / Einsle, O. | |||||||||||||||
資金援助 | European Union, ドイツ, 4件
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引用 | ジャーナル: Nat Commun / 年: 2023 タイトル: Architecture of the Heme-translocating CcmABCD/E complex required for Cytochrome c maturation. 著者: Lorena Ilcu / Lukas Denkhaus / Anton Brausemann / Lin Zhang / Oliver Einsle / 要旨: Mono- and multiheme cytochromes c are post-translationally matured by the covalent attachment of heme. For this, Escherichia coli employs the most complex type of maturation machineries, the Ccm- ...Mono- and multiheme cytochromes c are post-translationally matured by the covalent attachment of heme. For this, Escherichia coli employs the most complex type of maturation machineries, the Ccm-system (for cytochrome c maturation). It consists of two membrane protein complexes, one of which shuttles heme across the membrane to a mobile chaperone that then delivers the cofactor to the second complex, an apoprotein:heme lyase, for covalent attachment. Here we report cryo-electron microscopic structures of the heme translocation complex CcmABCD from E. coli, alone and bound to the heme chaperone CcmE. CcmABCD forms a heterooctameric complex centered around the ABC transporter CcmAB that does not by itself transport heme. Our data suggest that the complex flops a heme group from the inner to the outer leaflet at its CcmBC interfaces, driven by ATP hydrolysis at CcmA. A conserved heme-handling motif (WxWD) at the periplasmic side of CcmC rotates the heme by 90° for covalent attachment to the heme chaperone CcmE that we find interacting exclusively with the CcmB subunit. | |||||||||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8cea.cif.gz | 203.9 KB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8cea.ent.gz | 162.3 KB | 表示 | PDB形式 |
PDBx/mmJSON形式 | 8cea.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8cea_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8cea_full_validation.pdf.gz | 1.2 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8cea_validation.xml.gz | 38 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8cea_validation.cif.gz | 57.3 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ce/8cea ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/ce/8cea | HTTPS FTP |
-関連構造データ
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
#1: タンパク質 | 分子量: 24410.729 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 遺伝子: ccmA, yejW, b2201, JW5366 / 発現宿主: Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P33931, ABC-type heme transporter #2: タンパク質 | 分子量: 23632.676 Da / 分子数: 2 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 遺伝子: ccmB, yejV, b2200, JW2188 / 発現宿主: Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0ABL8 #3: タンパク質 | | 分子量: 27911.264 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 遺伝子: ccmC, yejT, yejU, b2199, JW2187 / 発現宿主: Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0ABM1 #4: タンパク質 | | 分子量: 7753.103 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 遺伝子: ccmD, yojM, b2198, JW2186 / 発現宿主: Escherichia coli K-12 (大腸菌) / 参照: UniProt: P0ABM5 |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: Complex of cytochrome c maturation system I, Ccm(AB)2CD タイプ: COMPLEX / Entity ID: all / 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Escherichia coli (大腸菌) |
由来(組換発現) | 生物種: Escherichia coli K-12 (大腸菌) |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: SPOT SCAN |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2000 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm |
撮影 | 電子線照射量: 50 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 QUANTUM (4k x 4k) |
-解析
ソフトウェア | 名称: PHENIX / バージョン: 1.20.1_4487: / 分類: 精密化 | ||||||||||||||||||||||||
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CTF補正 | タイプ: NONE | ||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 3.94 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 204806 / 対称性のタイプ: POINT | ||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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