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- PDB-8bvm: Cryo-EM structure of Hfq-Crc-rbsB translation repression complex -

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基本情報

登録情報
データベース: PDB / ID: 8bvm
タイトルCryo-EM structure of Hfq-Crc-rbsB translation repression complex
要素
  • Catabolite repression control protein
  • RNA-binding protein Hfq
  • rbsB mRNA
キーワードRNA BINDING PROTEIN / co-transcriptional RNA folding / Crc / metabolic regulation / ribonucleoprotein assembly / RNA chaperone Hfq / translational regulation
機能・相同性
機能・相同性情報


exodeoxyribonuclease III / double-stranded DNA 3'-5' DNA exonuclease activity / DNA repair / regulation of DNA-templated transcription / RNA binding / metal ion binding
類似検索 - 分子機能
Exodeoxyribonuclease III-like / RNA-binding protein Hfq / Hfq protein / AP endonuclease 1 / AP endonucleases family 1 profile. / Endonuclease/exonuclease/phosphatase / Endonuclease/Exonuclease/phosphatase family / Endonuclease/exonuclease/phosphatase superfamily / : / Sm domain profile. / LSM domain superfamily
類似検索 - ドメイン・相同性
RNA / RNA (> 10) / RNA (> 100) / RNA-binding protein Hfq / Catabolite repression control protein
類似検索 - 構成要素
生物種Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
手法電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 3.8 Å
データ登録者Dendooven, T. / Luisi, B.F.
資金援助 英国, 1件
組織認可番号
Wellcome Trust 英国
引用ジャーナル: EMBO J / : 2023
タイトル: Translational regulation by Hfq-Crc assemblies emerges from polymorphic ribonucleoprotein folding.
著者: Tom Dendooven / Elisabeth Sonnleitner / Udo Bläsi / Ben F Luisi /
要旨: The widely occurring bacterial RNA chaperone Hfq is a key factor in the post-transcriptional control of hundreds of genes in Pseudomonas aeruginosa. How this broadly acting protein can contribute to ...The widely occurring bacterial RNA chaperone Hfq is a key factor in the post-transcriptional control of hundreds of genes in Pseudomonas aeruginosa. How this broadly acting protein can contribute to the regulatory requirements of many different genes remains puzzling. Here, we describe cryo-EM structures of higher order assemblies formed by Hfq and its partner protein Crc on control regions of different P. aeruginosa target mRNAs. Our results show that these assemblies have mRNA-specific quaternary architectures resulting from the combination of multivalent protein-protein interfaces and recognition of patterns in the RNA sequence. The structural polymorphism of these ribonucleoprotein assemblies enables selective translational repression of many different target mRNAs. This system elucidates how highly complex regulatory pathways can evolve with a minimal economy of proteinogenic components in combination with RNA sequence and fold.
履歴
登録2022年12月4日登録サイト: PDBE / 処理サイト: PDBE
改定 1.02023年1月25日Provider: repository / タイプ: Initial release
改定 1.12023年2月8日Group: Database references / カテゴリ: citation / Item: _citation.journal_volume / _citation.year
改定 1.22024年7月24日Group: Data collection / Refinement description
カテゴリ: chem_comp_atom / chem_comp_bond ...chem_comp_atom / chem_comp_bond / em_admin / refine / struct_ncs_dom_lim
Item: _em_admin.last_update / _refine.ls_d_res_high ..._em_admin.last_update / _refine.ls_d_res_high / _refine.ls_d_res_low / _struct_ncs_dom_lim.beg_auth_comp_id / _struct_ncs_dom_lim.beg_label_asym_id / _struct_ncs_dom_lim.beg_label_comp_id / _struct_ncs_dom_lim.beg_label_seq_id / _struct_ncs_dom_lim.end_auth_comp_id / _struct_ncs_dom_lim.end_label_asym_id / _struct_ncs_dom_lim.end_label_comp_id / _struct_ncs_dom_lim.end_label_seq_id

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構造の表示

構造ビューア分子:
MolmilJmol/JSmol

ダウンロードとリンク

-
集合体

登録構造単位
A: Catabolite repression control protein
B: RNA-binding protein Hfq
C: RNA-binding protein Hfq
D: RNA-binding protein Hfq
E: RNA-binding protein Hfq
F: RNA-binding protein Hfq
G: RNA-binding protein Hfq
H: Catabolite repression control protein
I: RNA-binding protein Hfq
J: RNA-binding protein Hfq
K: RNA-binding protein Hfq
L: RNA-binding protein Hfq
M: RNA-binding protein Hfq
N: Catabolite repression control protein
O: RNA-binding protein Hfq
u: rbsB mRNA


分子量 (理論値)分子数
合計 (水以外)234,53016
ポリマ-234,53016
非ポリマー00
00
1


  • 登録構造と同一
  • 登録者・ソフトウェアが定義した集合体
  • 根拠: 電子顕微鏡法
タイプ名称対称操作
identity operation1_5551
Buried area32480 Å2
ΔGint-182 kcal/mol
Surface area71750 Å2
手法PISA
非結晶学的対称性 (NCS)NCSドメイン:
IDEns-ID詳細
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NCSドメイン領域:

Component-ID: _ / Refine code: _

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66
67
68
69

-
要素

#1: タンパク質 Catabolite repression control protein / Exodeoxyribonuclease III


分子量: 30101.869 Da / 分子数: 3 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)
遺伝子: crc, exoA, ALP65_01013, CAZ10_32350, CGU42_22755, DT376_09125, E4V10_18585, E5D53_27785, E5Z62_16095, E5Z63_23405, ECC04_031800, GNQ48_25180, GUL26_21635, IPC111_12165, IPC112_13745, ...遺伝子: crc, exoA, ALP65_01013, CAZ10_32350, CGU42_22755, DT376_09125, E4V10_18585, E5D53_27785, E5Z62_16095, E5Z63_23405, ECC04_031800, GNQ48_25180, GUL26_21635, IPC111_12165, IPC112_13745, IPC113_22800, IPC114_17225, IPC115_20105, IPC116_23795, IPC117_25625, IPC118_26680, IPC119_29495, IPC120_26430, IPC121_21355, IPC122_22810, IPC123_28525, IPC124_13695, IPC125_17530, IPC126_13890, IPC127_14855, IPC128_10355, IPC1295_10410, IPC129_12605, IPC1306_08360, IPC1307_28280, IPC1308_08250, IPC1309_21675, IPC130_13760, IPC1310_18070, IPC1311_27715, IPC1312_27760, IPC1313_12995, IPC1314_23305, IPC1315_13925, IPC1316_03820, IPC1317_21325, IPC1319_28440, IPC131_02850, IPC1320_21925, IPC1321_13670, IPC1322_08030, IPC1323_08650, IPC1324_08655, IPC1325_28715, IPC1326_03390, IPC1327_03390, IPC1329_17010, IPC132_06970, IPC1330_11465, IPC1331_28200, IPC1332_29425, IPC1333_11845, IPC1334_25345, IPC1335_28860, IPC1336_09225, IPC1337_29545, IPC1339_28790, IPC133_03360, IPC1340_28180, IPC1341_12600, IPC1342_25815, IPC1343_28125, IPC1345_26635, IPC1346_12480, IPC1347_06540, IPC1349_02495, IPC134_02845, IPC135_03360, IPC137_05170, IPC139_09290, IPC140_06730, IPC141_03365, IPC142_07260, IPC143_27785, IPC144_27850, IPC145_26565, IPC146_07875, IPC1474_29365, IPC1476_04745, IPC1477_00205, IPC1478_21530, IPC1479_05830, IPC147_27530, IPC1480_09320, IPC1481_08100, IPC1482_03390, IPC1485_09070, IPC1486_00200, IPC1487_09730, IPC1488_23420, IPC1489_30180, IPC148_13460, IPC1490_30060, IPC1491_03590, IPC1492_29195, IPC1494_10055, IPC1496_07955, IPC1498_13815, IPC1499_04620, IPC149_07870, IPC1500_13950, IPC1501_16685, IPC1502_17430, IPC1503_12005, IPC1504_12415, IPC1505_29825, IPC1506_17410, IPC1507_24155, IPC1508_30170, IPC1509_28695, IPC150_28080, IPC1510_28915, IPC1511_30420, IPC1512_29660, IPC1515_25380, IPC1516_25030, IPC1517_08725, IPC1518_07355, IPC1519_08150, IPC151_23655, IPC1521_08375, IPC1522_08210, IPC1523_29925, IPC152_28760, IPC153_23345, IPC154_17265, IPC155_18160, IPC156_17280, IPC157_20765, IPC1583_04500, IPC1584_21700, IPC1585_03355, IPC1586_12135, IPC1587_07630, IPC1588_00205, IPC1589_12850, IPC158_22475, IPC1590_04505, IPC1591_26650, IPC1592_03360, IPC1593_28620, IPC1594_08340, IPC1595_28610, IPC1596_08050, IPC1597_07705, IPC1598_07535, IPC1599_12520, IPC159_19675, IPC1600_03625, IPC1601_25405, IPC1602_28860, IPC1603_04480, IPC1604_17280, IPC1605_06980, IPC1606_28085, IPC161_21475, IPC168_27215, IPC172_03365, IPC173_03365, IPC174_04115, IPC175_27990, IPC176_00200, IPC177_23820, IPC178_12645, IPC179_03225, IPC180_03440, IPC181_03440, IPC182_27410, IPC183_07620, IPC184_23205, IPC26_03230, IPC27_25570, IPC29_25820, IPC30_25775, IPC31_26330, IPC32_23895, IPC33_16805, IPC34_07650, IPC35_07645, IPC36_11985, IPC37_11015, IPC38_07925, IPC40_27470, IPC41_03360, IPC42_03360, IPC43_23085, IPC44_22815, IPC45_21905, IPC46_07155, IPC47_03385, IPC48_27355, IPC49_03360, IPC50_30570, IPC51_28835, IPC54_18710, IPC55_30750, IPC56_25845, IPC574_05650, IPC575_13820, IPC576_07870, IPC577_30530, IPC578_05650, IPC579_06085, IPC57_11625, IPC580_13610, IPC582_05645, IPC584_14310, IPC586_05655, IPC589_14875, IPC58_27585, IPC596_07850, IPC597_03535, IPC598_09625, IPC599_08585, IPC59_11860, IPC600_09330, IPC601_08240, IPC602_08660, IPC603_03370, IPC604_03350, IPC605_03350, IPC606_24980, IPC607_31450, IPC608_28595, IPC609_14300, IPC60_11070, IPC610_25045, IPC611_03630, IPC612_03625, IPC613_03625, IPC614_10255, IPC615_03650, IPC616_03650, IPC618_03645, IPC61_27990, IPC620_03665, IPC621_02265, IPC622_09600, IPC623_28715, IPC624_03390, IPC625_10215, IPC627_06380, IPC629_12080, IPC630_04660, IPC632_00200, IPC633_27305, IPC634_00200, IPC64_27165, IPC65_28585, IPC66_27855, IPC67_03650, IPC68_03420, IPC70_17275, IPC71_27005, IPC737_07685, IPC73_27875, IPC74_28395, IPC75_18330, IPC76_17335, IPC77_23945, IPC78_12120, NCTC13621_05232, PA52Ts2_6132, PAMH19_3299
発現宿主: Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌) / 参照: UniProt: Q51380, exodeoxyribonuclease III
#2: タンパク質
RNA-binding protein Hfq


分子量: 9114.487 Da / 分子数: 12 / 由来タイプ: 組換発現 / 由来: (組換発現) Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌) / 遺伝子: hfq, PSPA7_5673 / 発現宿主: Escherichia coli (大腸菌) / 参照: UniProt: A6VD57
#3: RNA鎖 rbsB mRNA


分子量: 34850.766 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 合成 / 由来: (合成) Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)

-
実験情報

-
実験

実験手法: 電子顕微鏡法
EM実験試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法

-
試料調製

構成要素
ID名称タイプEntity IDParent-ID由来
1Complex of the RNA chaperone Hfq and helper protein Crc assembled on a rbsB mRNA fragmentCOMPLEXall0RECOMBINANT
2Catabolite repression control proteinCOMPLEX#11RECOMBINANT
3rbsB mRNACOMPLEX#31RECOMBINANT
4RNA-binding protein HfqCOMPLEX#21RECOMBINANT
分子量: 0.180 MDa / 実験値: NO
由来(天然)
IDEntity assembly-ID生物種Ncbi tax-ID
22Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)287
33Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)287
44Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)287
由来(組換発現)
IDEntity assembly-ID生物種Ncbi tax-ID
22Pseudomonas aeruginosa (緑膿菌)287
33Synthetic construct (人工物)32630
44Escherichia coli (大腸菌)562
緩衝液pH: 7.5
試料包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES
試料支持グリッドの材料: COPPER / グリッドのタイプ: Quantifoil R1.2/1.3
急速凍結凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K

-
電子顕微鏡撮影

実験機器
モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company
顕微鏡モデル: FEI TITAN KRIOS
電子銃電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: SPOT SCAN
電子レンズモード: BRIGHT FIELD / 最大 デフォーカス(公称値): 2600 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 1000 nm
撮影電子線照射量: 50 e/Å2
フィルム・検出器のモデル: GATAN K3 BIOQUANTUM (6k x 4k)

-
解析

ソフトウェア名称: PHENIX / バージョン: 1.18rc5_3822: / 分類: 精密化
EMソフトウェア
ID名称バージョンカテゴリ
2EPU画像取得
4CTFFIND4.1CTF補正
7UCSF Chimera1.13.1モデルフィッティング
9cryoSPARC2.15初期オイラー角割当
10cryoSPARC2.15最終オイラー角割当
12cryoSPARC2.153次元再構成
13REFMACモデル精密化
14PHENIXモデル精密化
CTF補正タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION
3次元再構成解像度: 3.8 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 148700 / 対称性のタイプ: POINT
原子モデル構築プロトコル: RIGID BODY FIT
精密化解像度: 3.8→3.8 Å / Cor.coef. Fo:Fc: 0.915 / SU B: 17.532 / SU ML: 0.247 / ESU R: 0.264
立体化学のターゲット値: MAXIMUM LIKELIHOOD WITH PHASES
詳細: HYDROGENS HAVE BEEN ADDED IN THE RIDING POSITIONS
Rfactor反射数%反射
Rwork0.39935 --
obs0.39935 471805 100 %
溶媒の処理溶媒モデル: PARAMETERS FOR MASK CACLULATION
原子変位パラメータBiso mean: 251.902 Å2
Baniso -1Baniso -2Baniso -3
1-11.97 Å23.08 Å2-5.64 Å2
2---5.23 Å2-1.64 Å2
3----6.73 Å2
精密化ステップサイクル: 1 / 合計: 14008
拘束条件
Refine-IDタイプDev ideal
ELECTRON MICROSCOPYf_bond_d0.00114342
ELECTRON MICROSCOPYf_angle_d0.3819692
ELECTRON MICROSCOPYf_dihedral_angle_d15.1422352
ELECTRON MICROSCOPYf_chiral_restr0.042226
ELECTRON MICROSCOPYf_plane_restr0.0032351
Refine LS restraints NCS

Refine-ID: ELECTRON MICROSCOPY / タイプ: interatomic distance / Weight position: 0.05

Ens-IDDom-IDAuth asym-IDRms dev position (Å)
11A175760.09
12H175760.09
21A174320.09
22N174320.09
31B36400.14
32C36400.14
41B36280.13
42D36280.13
51B36840.12
52E36840.12
61B37540.13
62F37540.13
71B36560.13
72G36560.13
81B38940.08
82I38940.08
91B36860.12
92J36860.12
101B36160.12
102K36160.12
111B36880.11
112L36880.11
121B37220.14
122M37220.14
131B36680.13
132O36680.13
141C35260.14
142D35260.14
151C35320.15
152E35320.15
161C36560.12
162F36560.12
171C35260.15
172G35260.15
181C36160.14
182I36160.14
191C37860.1
192J37860.1
201C35040.14
202K35040.14
211C35500.14
212L35500.14
221C36120.13
222M36120.13
231C35460.15
232O35460.15
241D36840.11
242E36840.11
251D36240.12
252F36240.12
261D38100.12
262G38100.12
271D36580.12
272I36580.12
281D35480.13
282J35480.13
291D38460.08
292K38460.08
301D36880.1
302L36880.1
311D35880.13
312M35880.13
321D37580.12
322O37580.12
331E37040.12
332F37040.12
341E36920.13
342G36920.13
351E37160.12
352I37160.12
361E35860.14
362J35860.14
371E36920.11
372K36920.11
381E39340.09
382L39340.09
391E36520.13
392M36520.13
401E37020.13
402O37020.13
411F36760.13
412G36760.13
421F37920.12
422I37920.12
431F36940.1
432J36940.1
441F36240.12
442K36240.12
451F37120.11
452L37120.11
461F38480.08
462M38480.08
471F36640.12
472O36640.12
481G37060.12
482I37060.12
491G35740.14
492J35740.14
501G37960.12
502K37960.12
511G36980.12
512L36980.12
521G36320.14
522M36320.14
531G38740.08
532O38740.08
541H177460.09
542N177460.09
551I36860.12
552J36860.12
561I36540.12
562K36540.12
571I37220.11
572L37220.11
581I37320.14
582M37320.14
591I36960.12
592O36960.12
601J35420.13
602K35420.13
611J36160.13
612L36160.13
621J36820.11
622M36820.11
631J35640.13
632O35640.13
641K37040.1
642L37040.1
651K35820.13
652M35820.13
661K37660.12
662O37660.12
671L36580.12
672M36580.12
681L37020.12
682O37020.12
691M36220.14
692O36220.14
LS精密化 シェル解像度: 3.6→3.693 Å / Total num. of bins used: 20
Rfactor反射数%反射
Rfree0 0 -
Rwork1.883 34782 -
obs--100 %

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万見について

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お知らせ

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2022年2月9日: EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

EMDBエントリの付随情報ファイルのフォーマットが新しくなりました

  • EMDBのヘッダファイルのバージョン3が、公式のフォーマットとなりました。
  • これまでは公式だったバージョン1.9は、アーカイブから削除されます。

関連情報:EMDBヘッダ

外部リンク:wwPDBはEMDBデータモデルのバージョン3へ移行します

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2020年8月12日: 新型コロナ情報

新型コロナ情報

URL: https://pdbj.org/emnavi/covid19.php

新ページ: EM Navigatorに新型コロナウイルスの特設ページを開設しました。

関連情報:Covid-19情報 / 2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

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2020年3月5日: 新型コロナウイルスの構造データ

新型コロナウイルスの構造データ

関連情報:万見生物種 / 2020年8月12日: 新型コロナ情報

外部リンク:COVID-19特集ページ - PDBj / 今月の分子2020年2月:コロナウイルスプロテーアーゼ

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2019年1月31日: EMDBのIDの桁数の変更

EMDBのIDの桁数の変更

  • EMDBエントリに付与されているアクセスコード(EMDB-ID)は4桁の数字(例、EMD-1234)でしたが、間もなく枯渇します。これまでの4桁のID番号は4桁のまま変更されませんが、4桁の数字を使い切った後に発行されるIDは5桁以上の数字(例、EMD-12345)になります。5桁のIDは2019年の春頃から発行される見通しです。
  • EM Navigator/万見では、接頭語「EMD-」は省略されています。

関連情報:Q: 「EMD」とは何ですか? / 万見/EM NavigatorにおけるID/アクセスコードの表記

外部リンク:EMDB Accession Codes are Changing Soon! / PDBjへお問い合わせ

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2017年7月12日: PDB大規模アップデート

PDB大規模アップデート

  • 新バージョンのPDBx/mmCIF辞書形式に基づくデータがリリースされました。
  • 今回の更新はバージョン番号が4から5になる大規模なもので、全エントリデータの書き換えが行われる「Remediation」というアップデートに該当します。
  • このバージョンアップで、電子顕微鏡の実験手法に関する多くの項目の書式が改定されました(例:em_softwareなど)。
  • EM NavigatorとYorodumiでも、この改定に基づいた表示内容になります。

外部リンク:wwPDB Remediation / OneDepデータ基準に準拠した、より強化された内容のモデル構造ファイルが、PDBアーカイブで公開されました。

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万見 (Yorodumi)

幾万の構造データを、幾万の視点から

  • 万見(Yorodumi)は、EMDB/PDB/SASBDBなどの構造データを閲覧するためのページです。
  • EM Navigatorの詳細ページの後継、Omokage検索のフロントエンドも兼ねています。

関連情報:EMDB / PDB / SASBDB / 3つのデータバンクの比較 / 万見検索 / 2016年8月31日: 新しいEM Navigatorと万見 / 万見文献 / Jmol/JSmol / 機能・相同性情報 / 新しいEM Navigatorと万見の変更点

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