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-基本情報
登録情報 | データベース: PDB / ID: 8buu | |||||||||
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タイトル | ARE-ABCF VmlR2 bound to a 70S ribosome | |||||||||
要素 |
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キーワード | RIBOSOME / ABC / ABCF / ABC-F / VmlR2 / antibiotic resistance / initiation / distorted P-tRNA / Shina-Dalgarno / Neobacillus vireti / Bacillus subtilis | |||||||||
機能・相同性 | 機能・相同性情報 positive regulation of rRNA processing / nucleoid / rRNA processing / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding ...positive regulation of rRNA processing / nucleoid / rRNA processing / ribosomal small subunit biogenesis / small ribosomal subunit rRNA binding / large ribosomal subunit / ribosomal small subunit assembly / small ribosomal subunit / 5S rRNA binding / large ribosomal subunit rRNA binding / transferase activity / cytosolic small ribosomal subunit / ribosomal large subunit assembly / cytoplasmic translation / cytosolic large ribosomal subunit / tRNA binding / negative regulation of translation / rRNA binding / ribosome / structural constituent of ribosome / ribonucleoprotein complex / translation / response to antibiotic / mRNA binding / ATP hydrolysis activity / DNA binding / RNA binding / zinc ion binding / ATP binding / cytosol / cytoplasm 類似検索 - 分子機能 | |||||||||
生物種 | Neobacillus vireti (バクテリア) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) | |||||||||
手法 | 電子顕微鏡法 / 単粒子再構成法 / クライオ電子顕微鏡法 / 解像度: 2.9 Å | |||||||||
データ登録者 | Crowe-McAuliffe, C. / Wilson, D.N. | |||||||||
資金援助 | ドイツ, スウェーデン, 2件
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引用 | ジャーナル: Nucleic Acids Res / 年: 2023 タイトル: Genome-encoded ABCF factors implicated in intrinsic antibiotic resistance in Gram-positive bacteria: VmlR2, Ard1 and CplR. 著者: Nozomu Obana / Hiraku Takada / Caillan Crowe-McAuliffe / Mizuki Iwamoto / Artyom A Egorov / Kelvin J Y Wu / Shinobu Chiba / Victoriia Murina / Helge Paternoga / Ben I C Tresco / Nobuhiko ...著者: Nozomu Obana / Hiraku Takada / Caillan Crowe-McAuliffe / Mizuki Iwamoto / Artyom A Egorov / Kelvin J Y Wu / Shinobu Chiba / Victoriia Murina / Helge Paternoga / Ben I C Tresco / Nobuhiko Nomura / Andrew G Myers / Gemma C Atkinson / Daniel N Wilson / Vasili Hauryliuk / 要旨: Genome-encoded antibiotic resistance (ARE) ATP-binding cassette (ABC) proteins of the F subfamily (ARE-ABCFs) mediate intrinsic resistance in diverse Gram-positive bacteria. The diversity of ...Genome-encoded antibiotic resistance (ARE) ATP-binding cassette (ABC) proteins of the F subfamily (ARE-ABCFs) mediate intrinsic resistance in diverse Gram-positive bacteria. The diversity of chromosomally-encoded ARE-ABCFs is far from being fully experimentally explored. Here we characterise phylogenetically diverse genome-encoded ABCFs from Actinomycetia (Ard1 from Streptomyces capreolus, producer of the nucleoside antibiotic A201A), Bacilli (VmlR2 from soil bacterium Neobacillus vireti) and Clostridia (CplR from Clostridium perfringens, Clostridium sporogenes and Clostridioides difficile). We demonstrate that Ard1 is a narrow spectrum ARE-ABCF that specifically mediates self-resistance against nucleoside antibiotics. The single-particle cryo-EM structure of a VmlR2-ribosome complex allows us to rationalise the resistance spectrum of this ARE-ABCF that is equipped with an unusually long antibiotic resistance determinant (ARD) subdomain. We show that CplR contributes to intrinsic pleuromutilin, lincosamide and streptogramin A resistance in Clostridioides, and demonstrate that C. difficile CplR (CDIF630_02847) synergises with the transposon-encoded 23S ribosomal RNA methyltransferase Erm to grant high levels of antibiotic resistance to the C. difficile 630 clinical isolate. Finally, assisted by uORF4u, our novel tool for detection of upstream open reading frames, we dissect the translational attenuation mechanism that controls the induction of cplR expression upon an antibiotic challenge. | |||||||||
履歴 |
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-構造の表示
構造ビューア | 分子: MolmilJmol/JSmol |
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-ダウンロードとリンク
-ダウンロード
PDBx/mmCIF形式 | 8buu.cif.gz | 4.3 MB | 表示 | PDBx/mmCIF形式 |
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PDB形式 | pdb8buu.ent.gz | 表示 | PDB形式 | |
PDBx/mmJSON形式 | 8buu.json.gz | ツリー表示 | PDBx/mmJSON形式 | |
その他 | その他のダウンロード |
-検証レポート
文書・要旨 | 8buu_validation.pdf.gz | 2 MB | 表示 | wwPDB検証レポート |
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文書・詳細版 | 8buu_full_validation.pdf.gz | 2 MB | 表示 | |
XML形式データ | 8buu_validation.xml.gz | 205.3 KB | 表示 | |
CIF形式データ | 8buu_validation.cif.gz | 363.7 KB | 表示 | |
アーカイブディレクトリ | https://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/bu/8buu ftp://data.pdbj.org/pub/pdb/validation_reports/bu/8buu | HTTPS FTP |
-関連構造データ
関連構造データ | 16246MC M: このデータのモデリングに利用したマップデータ C: 同じ文献を引用 (文献) |
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類似構造データ | 類似検索 - 機能・相同性F&H 検索 |
-リンク
-集合体
登録構造単位 |
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1 |
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-要素
-RNA鎖 , 5種, 5分子 ABVua
#1: RNA鎖 | 分子量: 949339.125 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) |
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#2: RNA鎖 | 分子量: 38423.863 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: GenBank: CP053102.1 |
#20: RNA鎖 | 分子量: 24787.770 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) |
#26: RNA鎖 | 分子量: 4128.384 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) |
#39: RNA鎖 | 分子量: 503353.125 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) |
+50S ribosomal protein ... , 26種, 26分子 CDEFGJKLMNOPQRSTUWXYZ01234
-30S ribosomal protein ... , 19種, 19分子 bfprtdehkloqcgijmns
#25: タンパク質 | 分子量: 28009.297 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 / 詳細: uS2 small ribosomal subunit protein 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21464 |
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#32: タンパク質 | 分子量: 11140.548 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21468 |
#33: タンパク質 | 分子量: 10153.833 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21474 |
#34: タンパク質 | 分子量: 8990.613 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21475 |
#35: タンパク質 | 分子量: 9622.217 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21477 |
#36: タンパク質 | 分子量: 22874.271 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21466 |
#37: タンパク質 | 分子量: 17650.625 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21467 |
#38: タンパク質 | 分子量: 14901.427 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P12879 |
#40: タンパク質 | 分子量: 13952.000 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P04969 |
#41: タンパク質 | 分子量: 15248.736 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21472 |
#42: タンパク質 | 分子量: 10597.224 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21473 |
#43: タンパク質 | 分子量: 10220.979 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P12874 |
#44: タンパク質 | 分子量: 24364.887 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21465 |
#45: タンパク質 | 分子量: 17915.879 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21469 |
#46: タンパク質 | 分子量: 14335.504 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21470 |
#47: タンパク質 | 分子量: 11687.661 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21471 |
#48: タンパク質 | 分子量: 13818.085 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P20282 |
#49: タンパク質 | 分子量: 7263.803 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P12878 |
#50: タンパク質 | 分子量: 10607.309 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 天然 由来: (天然) Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: P21476 |
-タンパク質 , 1種, 1分子 9
#51: タンパク質 | 分子量: 72167.875 Da / 分子数: 1 / 由来タイプ: 組換発現 詳細: EQ2 variant with C-terminal his tag, Tobacco Etch Virus protease cleavage site, and FLAG tag. 由来: (組換発現) Neobacillus vireti (バクテリア) / 遺伝子: BAVI_03309 発現宿主: Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) 参照: UniProt: W1SM44 |
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-非ポリマー , 4種, 107分子
#52: 化合物 | ChemComp-K / #53: 化合物 | ChemComp-MG / #54: 化合物 | ChemComp-ZN / #55: 化合物 | |
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-詳細
研究の焦点であるリガンドがあるか | N |
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-実験情報
-実験
実験 | 手法: 電子顕微鏡法 |
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EM実験 | 試料の集合状態: PARTICLE / 3次元再構成法: 単粒子再構成法 |
-試料調製
構成要素 | 名称: 70S ribosome with VmlR2 bound in the E site, a distorted tRNA in the P site, and a substoichiometric distorted tRNA in the A site タイプ: RIBOSOME Entity ID: #25, #20, #51, #26, #1-#2, #12, #14-#16, #21-#22, #27-#31, #3-#11, #13, #17-#19, #23-#24, #32-#50 由来: RECOMBINANT |
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分子量 | 値: 2.5 MDa / 実験値: NO |
由来(天然) | 生物種: Neobacillus vireti (バクテリア) |
由来(組換発現) | 生物種: Bacillus subtilis subsp. subtilis str. 168 (枯草菌) |
緩衝液 | pH: 7.5 |
試料 | 包埋: NO / シャドウイング: NO / 染色: NO / 凍結: YES |
試料支持 | グリッドの材料: COPPER / グリッドのタイプ: Quantifoil R2/2 |
急速凍結 | 凍結剤: ETHANE / 湿度: 100 % / 凍結前の試料温度: 277 K |
-電子顕微鏡撮影
実験機器 | モデル: Titan Krios / 画像提供: FEI Company |
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顕微鏡 | モデル: FEI TITAN KRIOS |
電子銃 | 電子線源: FIELD EMISSION GUN / 加速電圧: 300 kV / 照射モード: FLOOD BEAM |
電子レンズ | モード: BRIGHT FIELD / 倍率(公称値): 165000 X / 最大 デフォーカス(公称値): 1900 nm / 最小 デフォーカス(公称値): 700 nm / Cs: 2.7 mm |
撮影 | 電子線照射量: 28.25 e/Å2 フィルム・検出器のモデル: GATAN K2 SUMMIT (4k x 4k) |
-解析
ソフトウェア |
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EMソフトウェア |
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CTF補正 | タイプ: PHASE FLIPPING AND AMPLITUDE CORRECTION | |||||||||||||||||||||||||||
粒子像の選択 | 選択した粒子像数: 2797082 | |||||||||||||||||||||||||||
3次元再構成 | 解像度: 2.9 Å / 解像度の算出法: FSC 0.143 CUT-OFF / 粒子像の数: 140804 / アルゴリズム: FOURIER SPACE / 詳細: RELION 3D autorefine. / クラス平均像の数: 1 / 対称性のタイプ: POINT | |||||||||||||||||||||||||||
原子モデル構築 | 空間: REAL Target criteria: Map-model cross correlation and MolProbity score | |||||||||||||||||||||||||||
精密化 | 交差検証法: NONE 立体化学のターゲット値: GeoStd + Monomer Library + CDL v1.2 | |||||||||||||||||||||||||||
原子変位パラメータ | Biso mean: 34.33 Å2 | |||||||||||||||||||||||||||
拘束条件 |
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